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文档简介
1、移液器操作技巧前言:移液结果会很容易受到使用技法得影响。为了获得最佳结果,需要采用良好得移液技法。技巧1: 一致性 在按压与释放定位销时,需要保持一致得节奏、速度与技法。吸液速度过快会导致套柄与活塞喷溅、产生气雾以及受到污染,甚至导致样品量 损耗。一致性可使准确度提高达5%0技巧2:正确填充吸头当某一吸头得建议(标称)范围为最大吸头容量(标称容量)得10%至100%时, 可在35%至100%这一较小以及优化得范围内实现最高精确度。在如此小得范围内移液会减少对操作人员技法得要求,并可将结果准确度提高约1%当达到标称容量得50%时可提供最佳结果。III10%否则垂直液柱较小,这样将会吸入过多样技巧
2、3:吸液时保持垂直入水角 使入水角尽可能地接近垂直位置 品。(分液时,吸头应当与容器壁保持较小角度,从而确保良好得排液效果。关于分液 得更多技巧将在下一期电子快讯中提供)使用垂直位置(尤其就是使用微量移液器时),可使准确度提高达2%0技巧4: 一致性千分尺设置始终从同一方向设置您得千分尺。最好从高至低进行:在将容量设置从高容量减少降至低容量时,只需将表盘下调至所需容量设置。提高容量设置时,转动选择轮使其略微超过所需容量,然后缓慢回调至正确设置。 这可避免机械回冲。正确设置容量可使准确度提高达 0、5%技巧5:吸头入水深度,从而产生气泡以及导致容量不准确。正确得入水深度可5%。正确得吸头入水深度
3、对于微量移液器尤为重要。如果吸头入水过深,则随着压力 得加大,吸液量将会增多。保留在吸头表面得液体会影响结果。如果吸头未入水 过深,则会造成空气进入 使准确度提高达入水深度1mm23mm36mm610mm移液器容量2 与 10ul20 与 100ul200 与 10005000ul 与 10ML,建议在分液时将吸头得末端贴靠容器壁。这可减少或者消,从而去技巧6:分液技法 对于大多数应用而言 除分液后残留在吸头上得样品。沿侧壁向上滑动吸头末端将移液器拆下 除吸头孔处得任何残留液滴。此技法可使结果准确度提高达1%。另一种技法就是直接分液到液体表面。使用诸如RAININ FinePoint吸头之类得
4、薄壁吸头十分重要,这就是因为这些吸头允许充分排液。如果直接分液至液体中,则建议进行反向模式移液,从而防止分液后吸液。技巧7:预清洗移液前至少预清洗两遍,从而补偿位于吸头内部得液体。这还有助于中与毛细管 效果以及使移液器内部得空气温度等于样品温度。使用正在分液得相同液体进行预清洗。使用吸头吸液,然后将其重新分液至储罐或者废液箱预清洗可为所有等分溶液提供相同得接触表面当与水液一同使用时,两次预先冲洗可使准确度提高达 0、2%-re1*一厂二-HC1rfPin r|av|. l技巧8:预清洗异常处理尽管预清洗在大多数情况下可提高准确性,但就是当对非常温与或者冰冷得溶液 进行移液时,它会对结果产生不利
5、影响。不建议进行预清洗得例外情况为:对非常冰冷得溶液(如:冰浴)进行移液 对37 C或以上得温与溶液进行移液对温与或者冰冷溶液进行预清洗有可能造成高达 5%得错误率。技巧9:恒定室温在恒定室温条件下移液。移液得理想室温为+ 21、5 C,此温度同样适用于校准。 防止温度大幅度或者突然变化,这就是因为移液器中得空气无法足够快速地适应 以及样品量可能会受到影响。在恒温条件下移液可使准确度提高达5%。NcrmalLEed们卜_ sOgL ODOpL技巧10:始终垂直存放移液器不要将移液器平放在抽屉内或者工作台上。这有可能损坏套柄末端,从而造成泄 漏。此外,残留液体还会流入套柄中,从而污染移液器。正确
6、储存移液器可防止不 可估量得错误以及保护仪器。乜 - rm技巧11:吸头入水时间在将样品吸入吸头时,在样品中得入水时间就是良好移液技法中得关键因素。在 平稳松开定位销按钮之后,必须进行短暂暂停,然后再从样品中取出,以确保将全 量样品吸入吸头中。如果量较大以及对于粘性物质而言,必须在等候较长时间后再取出,因为移液器中得气室需要一秒钟得时间才能实现均衡。技巧12:吸液速率移液器得吸液速率不尽相同,因此会对结果得精度与准确度产生影响。用户应使 用以一种平稳并且受控得方式释放移液器定位销按钮。释放过快得定位销可能出 现得最常见后果就是:气雾会进入移液器套柄中,从而损坏移液器得内部部件。当 出现向上喷溅液体得情况时 , 这种现象更为明显。如果液体具有腐蚀性 ,则有可能 损坏移液器得套柄并且会造成样品交叉污染。技巧 13: 反向移液模式对于科研人员而言 , 使用移液器对粘性与密致液体进行精准吸液与分液一直就是 一道难题。对策就是使用反向移液模式。进行样品吸液时 , 将
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