HPLC验证方案

1、设备/系统名称：高效液相色谱仪设备/系统型号：Waters515泵、2487检测器方案编号： VM-QC-001-01方案制备姓名：日期：方案审核姓名：日期：姓名：日期：方案审核/批准姓名：日期：姓名：日期：目录1 .目的仪器编号：R211-JY-04与分工4. 偏差解决5. 变更控制6. 确认内容6.1安装确认6.2运行确认6.3性能确认127. 验证结果汇总及评价 8 .验证周期.9.设备确认总结报告10.附件1410.1偏差记录1510.2.偏差和解决报告1610.3 .附录文件清单1711.方案完成后审核/批准181.目的为确认waters515HPLC+waters UV2487高效

2、液相色谱系统测试数据准确可靠，性能稳定，特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。验证过程应严格按照本方案规定的内容进行。2.范围2.1 设备验证内容包括：安装确认、运行确认、性能确认。2.2 该方案适用于本公司实验室高效液相色谱系统的验证。3.组织与分工部门姓名职务3.1成员组成:分工3.2(1)由QC负责制订本验证方案。(2)由QA负责确认本验证方案。由QC负责进行本验证方案的具体执行。由QC负责编写验证报告。3.3.职责划分:(1)验证小组负责本验证方案的设计、批准及实施。(2) QC负责按本验证方案对受试仪器进行验证，并及时报告验证结果，提供验证原始数据。(3)验证小组组长全面协调各

3、项验证工作，负责报告验证结果、审核验证的评价与建议以及相应的结论，并在验证过程中提供相关的技术支持。4.偏差解决偏差指的是任何的测试失败，偏离规格，缺失文件，或重大偏离已建立的程序而导致潜在的GMF符合性影响。对于一个偏差事件，偏差必须被审核并评估确定导致偏差的根源。另外，根据设备的状态对偏差的影响进行分析。如必要，必须进行偏差原因的调查，将调查结果包括在“偏差和解决报告”中，偏差的解决(如需要采取的纠正措施，或不采取任何纠正措施但接受该偏差)和说明也包括在“偏差和解决报告”中，如需要纠正措施将会影响部分确认，这些部分的确认测试将延迟至改正措施完成。偏差还需要完整的记录在“偏差记录”中并在最终

4、总结报告中讨论。所有的偏差报告和相关的文件必须包括在最终的确认文件中。5.变更控制所有的变更和修正将根据相应的变更程序进行。如果需要进行变更，应对其作单独评估以决定是否有必要进行再确认。6.验证内容6.1安装确认6.1.1仪器基本情况:设备名称液相色谱仪设备编号R211-JY-04型号Waters515+UV2487生产厂家美国waters公司操作软件浙江智达N2000安装位置精密仪器室日期:检查人:复核人:日期:6.1.2安装确认所需文件资料工程部在设备开箱验收后建立设备档案，整理使用手册等技术资料，归档保存。资料档案数量存放处Waters515泵使用说明书1工程部UV2487使用说明书1工

5、程部AT-330柱温箱使用说明书1工程部浙江智达N2000工作站1质量部合格证1工程部资料档案:检查人:日期:日期:复核人:6.1.3设备的外观检查项目结果设备是否无损坏。设备部件是否无缺失。设备是否易于拆卸、清洗。设备安装、固定是否牢靠。设备工作环境是否符合说明书要求。设备安装位置是否恰当，是否留有足够的空间。电气接线连接是否正确，是否有可靠的接地保护。电缆 是否无损坏。管路连接是否正确，管路和各连接处是否无泄露。检查人:日期:日期:复核人:6.1.4高效液相色谱仪主要部件名称型号编号液相色谱泵Waters515E04515 795M紫外检测器Waters uv2487E04487 719M

6、柱温箱AT-330检查人:日期:日期:复核人:6.1.5备注/备件核实备品/备件名称型号数量生产厂家色谱柱4.6mm*200mm*0.5i m1支大连依利特氘灯LH-36X21个sonn tek针孔滤头0.45 卩 m*13mm*10个/ 包8包德国 MEMBRANE小系滤膜0.45 卩 m *50nm*50 张/盒ITTL6盒德国 MEMBRANE日期:复核人:6.1.6.设备安装环境检查确认设备的安装环境和地点符合仪器说明书要求。检查结果在下表记录。确认项目可接受标准确认结果项目结论设备安装检查1、电源：电压：220 10% 频率，50/60HZ可靠接地电压： 频率： 接地：符合不符合2、

7、环境检查温度：4 40C,湿度：20%- 95%温度：湿度：符合不符合结论:日期:日期:检查人:复核人:6.2运行确认6.2.1按waters高效液相色谱仪操作规程进行操作，进行控制旋钮的测试。1. 通电测试：接通仪器电源，将电源开关按向上，则指示灯亮。2. 断电测试：关闭仪器电源，则指示灯灭。3.泵测试：增加流速时，显示屏显示压力上升，直至稳定，并有废液流出；降低流速速时，显示屏显示压力上升，直至稳定。6.2.2测试结果，在下表记录。项目可接受标准结果结论waters高效液相色谱仪操作规程应通过审核、批准符合不符合通电测试接通仪器电源，将电源开关按向上，则 指示灯亮。符合不符合断电测试关闭仪

8、器电源，则指示灯灭。符合不符合泵测试增加流速时，显示屏显示压力上升，直 至稳定，并有废液流出；降低流速速时， 显示屏显示压力上升，直至稳定。符合不符合结论:复核人:日期:6.3性能确认检定项目可接受标准泵流量设定值误差泵流量设定值误差Ss 2%泵流量设定值误差流量稳定性误差SR 2%定性测量重复性（5次定量进样）RSDC 1.5%.定量测量重复性（5次定量进样）RSDC 1.5%UV检测器波长准确性示值误差 3nm基线漂移. 5 X 10 (AU/h)基线噪声 5 X 10 (AU最小检测浓度（静态）4 X 10-7g/ml （萘的甲醇溶液）631验证项目和技术要求序号名 称仪器编号规格校准日

9、期有效期至1秒表2电子分析天平3容量瓶4温湿度表6.3.2确认使用的检定设备校正情况，结果在下表记录。结论:检查人:日期:复核人:日期:6.3.3试剂 D-盐酸氨基葡萄糖、重铬酸钾、甲醇、硫酸等。6.4证方法及结果6.4.1泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的检定。将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，按表1设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确地收集10-25分钟，称量。按下式计算 Ss和SR流量设疋值 ml/mi n0.51.01.5表1测量次数333收集流动相时间min251510允许误差Ss3%2%

10、2%SR3%2%2%计算公式：Ss=（Fm-Fs）/Fs * 100%SR=（Fmax-Fmi n）/F*100%式中Ss为流量设定值误差（%W2Fm=（W2-W1）p .t 为流量实测值（ml/min ）； 容量瓶+流动相的重量（g）;W!容量瓶的重量（g）;Fs流量设定值（ml/mi n ）；实验温度下流动相的密度（g/cm2）；收集流动相的时间（min）；SR流量稳定性误差（% ;Fmax同一组测量中流量最大值（ml/min）；Fmin同一组测量中流量最小值（ml/min）；同一组测量的算术平均值（ml/min）；流量设疋值（ml/min ）0.51.01.5流量实测值（ml/min ）

11、平均值流量设定值误差S S （%平均值流量稳定性误差（%泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差SR的检定结论:检定人:日期:日期:复核人:642定性、定量测量重复性的验证将仪器联接好，使之处于正常工作状态，用进样阀的定量管注入稳定的待分析样品溶液(D-盐酸氨 基葡萄糖)，记录保留时间和峰面积，连续测量 5次，计算相对标准偏差 RSD色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以流动相A:流动相B (90/10) 为流动相(流动相 A为磷酸：辛烷磺酸钠：水=0.08ml : 0.12g : 99.8ml ;流动相B为乙腈)，检测 波长为195 nm。测定法：取D-盐酸氨基葡萄糖对照品

12、适量，精密称定，加蒸馏水溶解并定量稀释制成每1ml中约含5mg的溶液;摇匀，取20卩l注入液相色谱仪，记录色谱图。 定性、定量测量重复性的检定检定人:日期:日期:复核人:6.4.3紫外检测器性能 643.1 UV检测器波长准确性方法：已知苯在 233.9nm 238.9nm 243.3nm、248.5nm、254.5nm、260.6nm有特征吸收，故配置100mg/ml苯的乙醇溶液运行“ Sample scan ”程序。波长误差均应小于 3nn。 波长准确性规定实测误差规定实测误差233.9nm248.5nm238.9nm254.5nm243.3nm260.6nm结论:检定人:日期:复核人:日

13、期:643.2基线漂移和基线噪声的测定将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min ,纸速为5mm/min吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线3040分钟，计算基线漂移和噪声。基线漂移应W 5XlO-3(AU/h),基线噪声应W 5X 10-4(AU)。 基线漂移和基线噪声的测定旨标 项目、标准结果结论基线噪声(RIU)-4 5X 10基线漂移(RIU/h)-3 5X 10(RIU/h)结论:检定人:日期:复核人:日期:6.4.3.3最小检测浓度检定在静态条件下，用注射器注入 4X 10-7g/ml萘的甲醇溶液，样品峰高应大于

14、或等于两倍基线燥声峰 高，按下式计算最小检测浓度。Ct=2 HN C/H式中：Ct:最小检测浓度(g/ml )HN:噪声峰高(记录仪格数或实测高度 cm)C:样品浓度(g/ml )H:样品峰高(记录仪格数或实测高度 cm)结论:检定人:日期:复核人:日期:7. 验证结果汇总及评价验证条件电压:环境温度:相对湿度认可标准结果泵流量设定值误差Ssv 2%; 流量稳定性误差S R2%疋性测重复性误差（5次疋量管进样）RSDC 1.5%定量测重复性误差（5次定量管进样）RSDC 1.5%基线漂移W 5X 10-3 (RlU/h ); 基线噪声 5X 10( RIU)检测器波长准确性 3nm最小检测浓度4X 10-8g/ml验证项目输液系统UV检测器性能结论日期:日期:检定人: 复核人:8. 验证周期液相色谱仪的验证周期为两年，当更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时验证，并记录验证结果。9. 设备验证总结报告10. 附件11. 方案完成后审核/批准设备验证总结报告设备名称设备编号执行总结：确认项目测试描述通过/失败有无偏差？安装确认文件核实通过 失败有 无主要部件核实通过失败有 无设备的外观检查通过失败有无备件/改换部件核实通过失败有无SOP的核实通过失败有无运行及性能 确认关键仪表校验的核实通过失败有无仪器运行及性能测试的核 实。通过失败有无偏差总结:后续措施和负责人: