革兰氏阳性芽孢杆菌

1、第六章第六章 革兰氏阳性产芽孢杆菌革兰氏阳性产芽孢杆菌 第一节第一节 芽孢杆菌属芽孢杆菌属（bacillusbacillus） 第二节第二节 梭菌属梭菌属（clostridiumclostridium） 第一节第一节 芽胞杆菌属（芽胞杆菌属（bacillusbacillus） 芽胞杆菌属是一群需氧、能形成芽孢的革兰氏阳芽胞杆菌属是一群需氧、能形成芽孢的革兰氏阳 性大杆菌。本属中主要的致病菌为性大杆菌。本属中主要的致病菌为炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌， 是引起动物和人炭疽的病原菌；是引起动物和人炭疽的病原菌；蜡状芽胞杆菌蜡状芽胞杆菌的的 某些菌株可产生肠毒素，引致食物中毒；某些菌株可产生肠毒素，引致

2、食物中毒；其他大其他大 多为腐生菌多为腐生菌，主要存在于土壤、水和灰尘中，如，主要存在于土壤、水和灰尘中，如 枯草芽孢杆菌。枯草芽孢杆菌。 炭疽芽胞杆菌（炭疽芽胞杆菌（b. anthracisb. anthracis） 炭疽芽胞杆菌俗称炭疽炭疽芽胞杆菌俗称炭疽 杆菌，是引起人类、各杆菌，是引起人类、各 种家畜和野生动物炭疽种家畜和野生动物炭疽 （anthraxanthrax）的病原）的病原 。 一、形态及染色特性一、形态及染色特性 革兰氏阳性大杆菌，菌体平直革兰氏阳性大杆菌，菌体平直，两端平截。在组织和血液中，单，两端平截。在组织和血液中，单 在或短链，经培养后形成长链，呈在或短链，经培养后形

3、成长链，呈竹节状竹节状。在组织中或含血液的在组织中或含血液的 培养基中可形成荚膜。芽孢在有氧条件下形成培养基中可形成荚膜。芽孢在有氧条件下形成，位于菌体中央，位于菌体中央， 不膨出菌体。无鞭毛。不膨出菌体。无鞭毛。 二、培养特性二、培养特性 1.1.需氧菌或兼性厌氧，最适生长温度需氧菌或兼性厌氧，最适生长温度30-3730-37，营，营 养要求不高，普通培养基中即能生长良好。养要求不高，普通培养基中即能生长良好。 n 强毒菌株形成灰白色不透强毒菌株形成灰白色不透 明、大而扁平、表面干燥；明、大而扁平、表面干燥； n 无毒或弱毒菌株形成稍小无毒或弱毒菌株形成稍小 而隆起、表面较为光滑湿而隆起、表

4、面较为光滑湿 润、边缘比较整齐的光滑润、边缘比较整齐的光滑 型菌落。型菌落。 强毒株菌落强毒株菌落 2. 2. 在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可轻微溶血。轻微溶血。 3.3.液体培养基中呈絮状沉淀生长液体培养基中呈絮状沉淀生长 4.4.明胶穿刺培养，呈倒松树状，表面液化呈漏斗状明胶穿刺培养，呈倒松树状，表面液化呈漏斗状 5.5.在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应，与其它需在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应，与其它需 氧芽孢杆菌区别。氧芽孢杆菌区别。 串珠反应串珠反应 ：在含青霉素：在含青霉素0.5u/ml的培养基中，幼龄炭疽杆菌的培养基中，幼龄炭疽杆

5、菌 因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串 。 三、抵抗力抵抗力 本菌繁殖体的抵抗力不强本菌繁殖体的抵抗力不强 ，同一般无芽孢杆菌。，同一般无芽孢杆菌。 常用消毒剂均能于短时间内将其杀死。芽孢抵抗常用消毒剂均能于短时间内将其杀死。芽孢抵抗 力较强，在干燥背光处可存活力较强，在干燥背光处可存活4040年以上。煮沸年以上。煮沸1h1h 或干热或干热140 3h140 3h可杀灭芽孢，对碘敏感。可杀灭芽孢，对碘敏感。 五、抗原结构抗原结构 （一）结构抗原（一）结构抗原 1.1.荚膜抗原：荚膜抗原：多肽，仅见于有毒菌株，与毒力和抗吞

6、噬有关多肽，仅见于有毒菌株，与毒力和抗吞噬有关 2.2.菌体抗原：菌体抗原：多糖，与细菌毒力无关。性质稳定，经加热煮沸多糖，与细菌毒力无关。性质稳定，经加热煮沸 甚至高压蒸汽处理，抗原性不被破坏。甚至高压蒸汽处理，抗原性不被破坏。 在病畜皮毛或腐败脏器中经长时间煮沸仍能与特异性抗体发生反在病畜皮毛或腐败脏器中经长时间煮沸仍能与特异性抗体发生反 应形成环状沉淀，称为应形成环状沉淀，称为ascoli 反应。反应。 3. 3. 芽胞抗原芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮质组成，具有免疫原性。是芽胞的外膜和皮质组成，具有免疫原性。 （二）保护性抗原（二）保护性抗原（pa） 炭疽毒素（炭疽毒素（papa、lfl

7、f、efef）的组成成分之一，具有免疫原性。）的组成成分之一，具有免疫原性。 六、致病性六、致病性 n此菌毒力主要与此菌毒力主要与荚膜和毒素荚膜和毒素有关，荚膜可增强细菌抗吞有关，荚膜可增强细菌抗吞 噬能力，使之易于扩散；炭疽毒素是造成感染、动物致病噬能力，使之易于扩散；炭疽毒素是造成感染、动物致病 和死亡的主要原因，三种成分单独无毒性，只有和死亡的主要原因，三种成分单独无毒性，只有efef或或lflf与与 papa结合时，才有致死或水肿效应结合时，才有致死或水肿效应 。 n本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽，草食动物易本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽，草食动物易 感性最强，此菌主要通过

8、消化道传染，也可经呼吸道及皮感性最强，此菌主要通过消化道传染，也可经呼吸道及皮 肤创伤或通过吸血昆虫传播。肤创伤或通过吸血昆虫传播。 七、微生物学诊断七、微生物学诊断 1.1.细菌学检查细菌学检查 （）镜检：（）镜检：大杆菌，两端平截，竹节状大杆菌，两端平截，竹节状 （）分离培养：（）分离培养：用普通琼脂或血琼脂用普通琼脂或血琼脂 （）纯培养（）纯培养: :镜检、串珠试验、生化试验镜检、串珠试验、生化试验 （）动物试验：（）动物试验：将检验材料制成悬液或纯培养物将检验材料制成悬液或纯培养物 给小鼠注射，给小鼠注射，24-36h,24-36h,小鼠死于败血症小鼠死于败血症。 2.2.血清学检查血

9、清学检查 （）（）ascoliascoli沉淀反应沉淀反应 用加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与已知抗体用加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与已知抗体 进行的沉淀试验。进行的沉淀试验。 （）间接血凝试验（）间接血凝试验 （）协同凝集试验（）协同凝集试验 （）串珠荧光抗体检查（）串珠荧光抗体检查 （）琼脂扩散试验（）琼脂扩散试验 n炭疽痊愈动物可获得坚强的免疫，再次感染者很少炭疽痊愈动物可获得坚强的免疫，再次感染者很少 n第第号炭疽芽胞苗、无毒炭疽芽胞苗预防接种号炭疽芽胞苗、无毒炭疽芽胞苗预防接种 n高免血清进行紧急预防接种高免血清进行紧急预防接种 n青霉素作为首选药物进行治疗青霉素作为首选药物进行治疗

10、八、免疫防治八、免疫防治 第二节第二节 梭菌属（梭菌属（clostridiumclostridium） n该属细菌多数该属细菌多数严格厌氧严格厌氧，革兰氏染色，革兰氏染色阳性阳性 ，能，能形成芽孢形成芽孢， 芽孢直径往往比菌体粗，使菌体膨胀成梭状，但并非梭菌芽孢直径往往比菌体粗，使菌体膨胀成梭状，但并非梭菌 属的细菌均为梭状，如破伤风梭菌，芽孢位于菌体顶端，属的细菌均为梭状，如破伤风梭菌，芽孢位于菌体顶端， 菌体呈鼓槌状。菌体呈鼓槌状。 n该属细菌能产生多种外毒素和侵袭性酶，致病性强。该属细菌能产生多种外毒素和侵袭性酶，致病性强。 n产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌、腐败梭菌、诺维梭菌、肉毒梭菌和、腐

11、败梭菌、诺维梭菌、肉毒梭菌和破伤风破伤风 梭菌梭菌等。等。 产气荚膜梭菌（产气荚膜梭菌（cl. perfringenscl. perfringens） 旧名魏氏梭菌，在自然界分布很广。一定旧名魏氏梭菌，在自然界分布很广。一定 条件下，可引起多种严重疾患，局部组织条件下，可引起多种严重疾患，局部组织 出现坏死、水肿、产气。出现坏死、水肿、产气。 一、形态及染色特征一、形态及染色特征 菌体直杆状菌体直杆状 ，革兰氏染色阳性。一般条件下不形成芽胞，在，革兰氏染色阳性。一般条件下不形成芽胞，在 无糖培养基上可形成。芽胞大而卵圆，位于菌体中央或近端，无糖培养基上可形成。芽胞大而卵圆，位于菌体中央或近端，

12、 使菌体膨胀。多数菌株可形成荚膜，无鞭毛。使菌体膨胀。多数菌株可形成荚膜，无鞭毛。 无芽孢无芽孢 有芽孢有芽孢 有荚膜有荚膜 n 本菌对厌氧程度的要求并不严本菌对厌氧程度的要求并不严 ，在普通培养基上可生，在普通培养基上可生 长，若加葡萄糖、血液，则生长更好。菌落多为圆形、长，若加葡萄糖、血液，则生长更好。菌落多为圆形、 光滑、隆起、灰白色的光滑、隆起、灰白色的圆屋顶样圆屋顶样，也可形成圆盘形、边，也可形成圆盘形、边 缘成锯齿状、表面有辐射状条纹的大菌落。缘成锯齿状、表面有辐射状条纹的大菌落。 n 生长非常迅速生长非常迅速，快速移植法可帮助此菌的分离。，快速移植法可帮助此菌的分离。 n厌氧肉肝

13、汤中培养，呈均匀浑浊，并厌氧肉肝汤中培养，呈均匀浑浊，并产生大量气体产生大量气体。 二、培养特性二、培养特性 n血平板上，多数菌株有血平板上，多数菌株有双层溶血环双层溶血环，内环，内环 完全溶血，外环不完全溶血。完全溶血，外环不完全溶血。 三、生化特性生化特性 肉渣汤培养基肉渣汤培养基 牛牛 乳乳 培培 养养 基基 高高 糖糖 琼琼 脂脂 培培 养养 基基 接种产气荚膜杆菌接种产气荚膜杆菌 本菌最突出的生化特性是对牛乳培养基的本菌最突出的生化特性是对牛乳培养基的“暴烈发酵暴烈发酵”。 na型型：人气性坏疽和食物中毒人气性坏疽和食物中毒 nb型型：羔羊痢疾羔羊痢疾 nc型型：绵羊猝狙绵羊猝狙 n

14、d型型：牛肠毒血症牛肠毒血症 ne型型：犊牛、羔羊肠毒血症犊牛、羔羊肠毒血症 四、致病性致病性 1. 直接涂片镜检：直接涂片镜检：g+大杆菌，并有荚膜大杆菌，并有荚膜 2. 分离培养：分离培养：接种血平板，有双层溶血环接种血平板，有双层溶血环 3.3.纯培养：纯培养：引起牛奶暴烈发酵引起牛奶暴烈发酵 4. 动物试验：动物试验：小鼠、家兔或鸽小鼠、家兔或鸽 5. 肠毒素检查肠毒素检查： 取回肠内容物加适量灭菌生理盐水稀释，经离心沉淀后取上清液分取回肠内容物加适量灭菌生理盐水稀释，经离心沉淀后取上清液分 成两份成两份 ，一份不加热，一份加热，分别静脉注射家兔或小鼠。如有，一份不加热，一份加热，分别

15、静脉注射家兔或小鼠。如有 毒素存在，不加热组动物常于数分钟至数小时内死亡，而加热组动毒素存在，不加热组动物常于数分钟至数小时内死亡，而加热组动 物不死亡。物不死亡。 五、微生物学诊断微生物学诊断 破伤风梭菌（破伤风梭菌（cl.tetanicl.tetani） 破伤风梭菌是引起人畜破伤破伤风梭菌是引起人畜破伤 风的病原。具有芽孢，其芽风的病原。具有芽孢，其芽 孢广泛存在于各类土壤中。孢广泛存在于各类土壤中。 本病以骨骼肌发生强直性痉本病以骨骼肌发生强直性痉 挛的症状为特征，此菌也称挛的症状为特征，此菌也称 为强直梭菌。为强直梭菌。 一、形态形态 g+g+，两端钝圆、细长的杆菌，两端钝圆、细长的杆

16、菌 ，无荚膜，多具周鞭毛，无荚膜，多具周鞭毛 而能运动。在动物体内外均能形成圆形芽胞，位于而能运动。在动物体内外均能形成圆形芽胞，位于 菌体一端，呈鼓槌状菌体一端，呈鼓槌状 。 二、培养特性培养特性 严格厌氧菌严格厌氧菌，接触氧后很快死，接触氧后很快死 亡。普通培养基上即能生长，亡。普通培养基上即能生长， 形成不规则菌落，中心紧密、形成不规则菌落，中心紧密、 四周疏松似羽毛。四周疏松似羽毛。不易获得单不易获得单 个菌落个菌落，扩散成薄膜状覆盖整，扩散成薄膜状覆盖整 个平板表面。用高浓度琼脂可个平板表面。用高浓度琼脂可 抑制其扩散生长。抑制其扩散生长。 此菌产生两种毒素此菌产生两种毒素： 1. 破伤风痉挛毒素：破伤风痉挛毒素：引起神经兴奋性的异常增高和骨骼肌痉挛。引起神经兴奋性的异常增高和骨骼肌痉挛。 2. 破伤风溶血素：破伤风溶血素：不耐热，对氧敏感，可溶解马及家兔的红细胞，不耐热，对氧敏感，可溶解马及家兔的红细胞， 与破伤风梭菌的致病性无关。与破伤风梭菌的致病性无关。 三、致病性三、致病性 四、微生物学诊断四、微生物学诊断 一般不需微生物学诊断。如有特殊需一般不需微生物学诊断。如有特殊需 要，可采取创伤部的分泌物或坏死组要，可采取创伤部的分泌物或坏死组 织进行细菌学检查。织进行细菌学检查。 n主动免疫