兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书

1、德信诚培训网 兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书 制订日期 2003 年 08 月 23 日 修订日期 2021 年 5 月 22 日 实施日期 2021 年 5 月 22 日 批 准 总经理 审 核制 定 工程部生产管理部pe 部qa 部开发技术部iqc 检查部 tqm 部 管理小组 德信诚培训网 兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书 更改记录更改记录 发行日期版次更改内容 2003/08/23 2006/04/17 2007/05/14 2009/04/10 2021/5/22 1 2 3 5 6 初版发行 根据公司组织架构

2、图 1）取消 qm 推进部，新设制品保证部和部材保证部 （原制品保证课变更为制品保证部，原部材保证课变更为部材保证部）。 2）追加品质技术推进室和特化物对应推进室。 1. 公司组织结构图变更，取消报关物流部，报关课与物流课纳入生产管理部。 2. 根据公司组织结构图，品质技术推进室变更为制造企画室。 1. 根据公司组织图，对文中的部门进行了修订。文中的部门长变更为部长、责任 者变更为管理职； 2.根据实际的业务内容，对 2. 新产品生产、出货前实施项目进行了修订。(p4) 更多免费资料下载请进：http:/ 德信诚培训网 兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书 目目

3、 录录 项目、标题项目、标题 页页 次次 更改记录更改记录 .2 2 目目 录录 .3 3 1.1.总则总则 .4 4 1.1 适用范围.4 1.2 起草、更改、作废.4 1.3 目的.4 1.4 权责.4 1.5.定义 .4 2.2. 作业内容作业内容 .5 5 3 3相关文件相关文件 .8 8 4.4.相关表单相关表单 .8 8 5.5.流程图流程图 .9 9 总页数总页数 ：6 6 页页 德信诚培训网 兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书兽医实验室口蹄疫监测诊断作业指导书 一、口蹄疫病毒一、口蹄疫病毒 vp1vp1 结构蛋白抗体检测酶联免疫吸附试验结构蛋白抗体检测酶联免疫吸附试验 1.1.

4、适用范围适用范围 用于检测猪、牛、羊血清中的口蹄疫病毒 vpi 结构蛋白抗体，与猪、牛、 羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒联合使用，可区分 口蹄疫病毒感染动物及疫苗免疫动物。检测猪血清应用猪口蹄疫病毒 vp1 结构 蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒；检测牛、羊血清应用牛、羊口蹄疫病 毒 vp1 结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒。 2.2.检测试剂检测试剂 口蹄疫病毒 vp1 抗原包被板、样品稀释液、酶结合物、阴性对照、vp1 阳 性对照、酶结合物稀释液、tmb 底物 a 液、tmb 底物 b 液、终止液 （l.omhzso。）、浓缩洗涤液、稀释板、一次性封板膜、微孔

5、定位标签。 3.3.检测步骤检测步骤 3.1 使用前将试剂盒恢复到室温，避免阳光直射或放置在 30 以上的环 境中。 3.2 取出试剂盒中的样品稀释液。a1、b1 两孔作为阴性对照，cl、d1 两 孔作为阳性对照孔，其余孔作检测孔，每孔一个样品。 3.3 在稀释板的各孔中加 200 样品稀释液。在相应各孔中分别加入 10 此 对照血清或被检血清样品。用加样器重复吹吸数次。稀释每个样品时必须使用 不同的吸头。 3.4 取出抗原包被板。 德信诚培训网 3.5 分别从稀释板上取稀释后的对照血清和被检血清各 100 此，加至抗原 包被板的相应孔中，加益或封膜后，置 37 士 2 下孵育 60 士 5

6、分钟。 3.6 洗涤工作液配制：按需要量，用去产离子水或双蒸水将洗涤液作 25 倍稀释。 3.7 用洗涤工作液洗涤抗原包被板，每孔 300 吨，洗涤 6 次，拍干。 3.8 酶结合物工作液配制：用酶结合物稀释液将酶结合物作 100 倍稀释， 现配现用。 3.9 每孔加入 100 此酶结合物工作液，加盖或封膜后，置 372 下孵 育 302 分钟。 3.10 重复 3.7。 3.11tmb 底物工作液配制：将 tmb 底物 b 液和 tmb 底物 a 液等量混合，现 配现用。 3.12 每孔加入 100 此底物工作液，加盖或封膜后，置 372 下孵育 151 分钟。 3.13 每孔加入 100

7、此终止液，并轻轻振荡混匀。 3.14 在 15 分钟内，用酶联读数仪测定在 450nln 波长下的 od 值。 结果判定 4.1 猪口蹄疫病毒 vpi 结构蛋白抗体检测结果判定： 4.1.1 阴性对照孔平均 0d 值应续 0.15，每个阳性对照孔 0d 值应妻 0.5， 且簇 2.0。否则，试验无效。临界值0.23x 阳性对照孔平均 od 值。 4.1.2 被检样品孔 od 值临界值，判为阳性。 德信诚培训网 4.1.4 对判定结果为阳性的样品，应用 2 个孔进行重复检测。重复检测后， 若至少有一个孔为阳性，则判为口蹄疫病毒 vpi 结构蛋白抗体阳性，若两孔均 为阴性，则判为口蹄疫病毒 vpi

8、 结构蛋白抗体阴性。 4.1.5 当猪口蹄疫病毒 vpi 结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒与 猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒联合使用时，按下 列标准进行最终判定 4.2 牛、羊口蹄疫病毒 vpi 结构蛋白抗体检测结果判定： 4.2.1 阴性对照孔平均 od 值应0.2，每个阳性对照孔 od 值应0.5，且 2.0。否则，试验无效。 临界值=0.23x 阳性对照孔平均 od 值。 4.2.2 被检样品孔 od 值临界值时，判为阴性，即为抗口蹄疫病毒 vp1 结构蛋白抗体阴性。 4.2.3 被检样品孔 od 值临界值，判为阳性。 4.2.4 对判定结果为阳性的样品，应用 2 个孔进行重复检测。重复检测后， 若至少有一个孔为阳性，则判为口蹄疫病毒 vpi 结