物流开题报告毕业论文

1、物流开题报告毕业论文研究背景眼科最常见致盲眼病有白内障、青光眼、糖尿 病视网膜病变和黄斑病等，其中青光眼是继白内障后的第二 致盲原因，物流开题报告毕业论文。我国青光眼的发病率为%，患病人数约为 700 万。 xx 年资料显示世界青光眼发病人数到 xx 年将达到 7000 万，双眼盲目人数达到840 万 (quigleyetal. ， xx) 。众多的青光眼患者和青光眼盲者，不仅给患者带 来极大的身心痛苦，而且还造成社会和经济的巨大负担，因 此，预防、控制及治疗青光眼十分重要且迫切 ! 青光眼是一 种由于病理性眼压增高导致的具有特征性视神经结构损伤 和视野缺损为表现的神经性退行性视神经病变，其最

2、终的结 局是视网膜神经节细胞(rgcs)凋亡、视功能逐渐丧失 (buckingham et al.， xx) 。目前已有大量保护 rgcs 的研究结果，主要包括：改善视乳头微循环、谷氨酸途径抑制剂、 神经营养因子， 诱导热休克蛋白表达及抗氧化治疗等。 然而， 青光眼的发病机制至今尚未完全阐明。信号转导、受体通道研究在 rgcs 损伤与保护中的作用 近年来正得到关注。最新的研究方向和靶点之一是关于能感 受压力的受体通道可能参与传递病理刺激造成神经损伤 (quigley et al. ， xx) 。 trpc6(transient receptor potential ，c6) 是一个新发现的、压

3、力敏感、参与神经元存活与凋亡的钙离子通透膜通道蛋白。本人曾参与课题 trpc6 通道在视网膜缺血再灌模型中对视网膜神经节的保护作用 的研究，并获得了有价值的前期研究结果：较为全面而精确 的定位了 trpc6 通道基因和蛋白在 sd 大鼠视网膜、尤其是 rgcs 上的表达和分布， trpc6 在 rgc 层上有选择性的高表达 ; 探 讨 了 trpc6 在 大 鼠 视 网 膜 缺 血 再 灌 (ischemia reperfusion,ir) 损伤过程中的表达变化， trpc6 基因和蛋白 在视网膜缺血损伤中的再灌注后 24 小时，出现一过性的表 达升高 ; 在体的药理学实验结果显示，其激动剂o

4、ag 具有保护视网膜 ir 模型诱导的 rgcs 免受损伤， 而拮抗剂 skf96365 则促进了 rgcs 凋亡的发生，本研究拟进一步探讨 trpc6 的 作用机制。研 究 发 现 ， 脑 源 性 神 经 营 养 因 子 (brain-derived neurotrophic factor,bdnf) 与 trpc 通道在信号转导、调控 细胞存活的过程中有密切的联系。 xx 年 4 月中国科学院上海 神 经 科 学 研 究 所 王 以 政 研 究 员 课 题 组 在 nature neuroscience 上发表论文， 首次证实过表达 trpc6/trpc3 可 保护小脑神经元对抗因血清剥夺

5、而导致的细胞死亡，且发现 bdnf 位于 trpc3/6 介导的细胞保护信号通路的上游 (tai et al. ， xxa;jia et al.，xx) 。本课题拟探讨 bdnf 介导 trpc6 通道蛋白保护视网膜跟 模型诱导的 rgcs 免受损伤的作用机制，对深入阐明青光眼 的发病机制，为临床干预治提供新的思路和药物干预靶点， 具有一定的现实意义。本课题的研究主要分为以下二部分： 第一部分视网膜 ir 模型中调控 trpc 通道时 bdnf 的表达变 化一、研究目的在 sd 大鼠视网膜 ir 模型中检测 bdnf 基因 不同再灌注时间点的表达变化，同时检测抑制 trpc 通道时 bdnf

6、蛋白水平变化、探讨其表达类型对 rgcs 凋亡的影响。 二、研究方法 1、在视网膜 ir 模型中检测 bdnf 基因的表达。 采用视神经血管钳夹法建立视网膜 ir 模型，夹闭视网膜血 供 60 分钟，分别于再灌注后 3 小时、 24 小时、 48 小时、 7 天处死大鼠，摘取眼球，显微镜下剥离视网膜，提取视网膜 总 rna ，利用反转录多聚酶链反应 (rt-pcr) 及实时荧光定量 pcr(real-time pcr) 测定 bdnf 基因表达变化。 2、抑制 trpc 通道时检测 bdnf 蛋白的表达。建立大鼠视网膜 ir 模型，于 视网膜缺血术前 30 分钟，右眼通过玻璃体腔注射 trpc

7、 拮抗 剂 skf96365 为实验组，左眼注射溶剂 pbs 为阴性对照组， 分别于再灌后 3 小时、 6小时、 12 小时、24 小时、 48小时、 72 小时处死大鼠，摘取眼球，显微镜下剥离视网膜，提取视 网膜总蛋白，蛋白质免疫印迹 (western blot) 检测 bdnf 在 视网膜组织中的蛋白表达水平，开题报告物流开题报告毕业论文分享好文 3、抑制trpc通道时检测bdnf基因的表达。将 sd 大鼠分为 4 组，分别进行如下处理：第一组，对 眼球进行假手术， 只行视神经分离术， 不行视网膜缺血手术 ; 第二组，建立视网膜 ir 模型; 第三组于视网膜缺血术前 30 分钟，通过玻璃体腔注射 pbs 溶液，然后再建立视网膜 ir 模型;第四组于视网膜缺血术前 30 分钟，通过玻璃体腔注射 注射 skf96365 ，然后再建立视网膜 ir 模型。所有大鼠于再 灌注后 24 小时处死，摘取眼球，显微镜下剥离视网膜，提 取视网膜总 rna ， real-time pcr测定 bdnf 基因表达变化。三、研究结果 rt-pcr 及