紫外可见分光光度计的校正

1、实训二紫外可见分光光度计的校正一、实训目的1、了解紫外-可见分光光度的基本构造。2、熟悉紫外可见分光光度计的操作技术。3、熟悉校正波长和测量吸收值精度的原理和方法。二、仪器与试剂1、 仪器：紫外-可见分光光度计，石英吸收池(1cm),容量瓶(1000m1),烧杯。2、试剂:0.0600L 1000ml 的 K2C2O7 的硫酸标准溶液(0.005mol/L) ,Nal 溶液(10g/L), NaNO2 溶液(50g/L)。三、实训原理紫外-可见分光光度计是单光束手工操作仪器，备有钨灯及氢灯两种光源，可用于 可见及紫外光区。它是具有色散能力较高的单色器，狭缝可调，可得到较纯的单色光， 适用于定性

2、鉴别和定量分析。新仪器启用前或仪器修理后或长期使用后均需对仪器的性能进行检定。仪器的性能主要是波长准确度与重现性、单色器的分辨能力、吸光度的准确性和重现性及杂散光等。四、实训操作1、吸收池配对性试验每次测定前，应先用蒸馏水做吸收池配对性试验。两个吸收池透光率T相差应V0.5 %。2、波长准确性与重现性校验波长是否准确，可用谱线校正法。在吸收池中置一白纸挡住光路，转动波长至 486nm附近，遮光观察白纸上蓝色斑。轻微移动波长，至使此蓝色光斑最亮时止。根据 调整的波长范围观察所得到的相应颜色，并进行对比核对，判断波长的准确性。3、吸收度的准确性与透光率重现性在紫外-分光光度计中用作读取透光率的电位

3、器的精度可达到0.2 %，但是，由于其他原因，例如电压变化等，实际测得的透光率误差大于0.2 %。一般要求透光率的精度、稳定性和重现性不超过0.5 %。透光率的准确性可用已知吸光系数的物质核对，常 用的是重铬酸钾。取在120C干燥至恒重的基准K2Cr2O7约60mg，精密称定，用F2SQ 溶液(0.005mol/ L)溶解并稀释至1000ml，摇匀。按下表规定的吸收峰与谷波长处测定。将测得的吸光度，计算出其吸光系数，取平均值与表中规定值核对，如相对偏差在 土 1 %以内，则透光率准确性好。 K2C2O7的F2S04溶液(0.005mol/L)的Ecm1%入nm235 （谷）257 （峰）313

4、 （谷）350 （峰）匚1%tcm124.5144.048.6106.6透光率重现性可结合透光率准确性实验同时进行，即在固定波长、溶液浓度以及狭逢宽度等仪器工作条件下，多次测量透光率，观察各次测量值的差异。4、杂散光（1） 用浓度为10g/L的Nal水溶液，1cm石英吸收池，蒸馏水作参比，于 220nm波 长处测量溶液的透光率。（2）用浓度为50g/LNaNO2水溶液，1cm石英吸收池，蒸馏水作参比，于380nm波长 处测量溶液的透光率。其透光率应符合下表中的规定（注意：检查杂散光应在校正波长 以后进行）。测量杂散光时规定的透光率值试剂nmC (g/ml)入（nm）T (%)NaI0.0122

5、0V 0.8%NaNO20.05380V 0.8%五、数据处理1、吸收池配对透光率T% （空）100%透光率T% （样）(规定 TV0.5 %)2、吸收度的准确性与透光率重现性测量值标准溶液入理（nm）吸收度AEm1%平均值准确性重现性InK2C2O7235257313350（规定准确性误差）.7%，重现性误差 0.3%3、杂散光标准溶液入理（nm）T (%NaI220NaNO2380(规定 TV 0.8 %)六、注意事项1、玻璃吸收池只适用于320nm以上及可见光区；石英吸收池适用于紫外光和可见光区2、石英吸收池毛玻璃面上方有箭头表示方向。每次测定时，样品吸收池与空白吸收池 的方向应保持一致

6、。3、配制K2Cr2O7溶液，应避免还原性杂质及对紫外光有吸收的杂质存在，所用溶剂应 为蒸馏水。七、思考题1、如何正确使用紫外-可见分光光度计？石英吸收池为什么标有箭头？2、石英吸收池使用前应如何处理？使用中应如何保护？出0帀表两汉：诸葛亮先帝创业未半而中道崩殂，今天下三分，益州疲弊，此诚危急存亡之秋也。然侍卫之臣不懈于 内，忠志之士忘身于外者，盖追先帝之殊遇，欲报之于陛下也。诚宜开张圣听，以光先帝遗德，恢 弘志士之气，不宜妄自菲薄，引喻失义，以塞忠谏之路也。宫中府中，俱为一体；陟罚臧否，不宜异同。若有作奸犯科及为忠善者，宜付有司论其刑赏， 以昭陛下平明之理；不宜偏私，使内外异法也。侍中、侍郎

7、郭攸之、费祎、董允等，此皆良实，志虑忠纯，是以先帝简拔以遗陛下：愚以为宫 中之事，事无大小，悉以咨之，然后施行，必能裨补阙漏，有所广益。将军向宠，性行淑均，晓畅军事，试用于昔日，先帝称之曰能”是以众议举宠为督：愚以为营中之事，悉以咨之，必能使行阵和睦，优劣得所。亲贤臣，远小人，此先汉所以兴隆也；亲小人，远贤臣，此后汉所以倾颓也。先帝在时，每与 臣论此事，未尝不叹息痛恨于桓、灵也。侍中、尚书、长史、参军，此悉贞良死节之臣，愿陛下亲 之、信之，则汉室之隆，可计日而待也 臣本布衣，躬耕于南阳，苟全性命于乱世，不求闻达于诸侯。先帝不以臣卑鄙，猥自枉屈，三 顾臣于草庐之中，咨臣以当世之事，由是感激，遂许先帝以驱驰。后值倾覆，受任于败军之际，奉 命于危难之间，尔来二十有一年矣。先帝知臣谨慎，故临崩寄臣以大事也。受命以来，夙夜忧叹，恐托付不效，以伤先帝之明；故 五月渡泸，深入不毛。今南方已定，兵甲已足，当奖率三军，北定中原，庶竭驽钝，攘除奸凶，兴 复汉室，还于旧都。此臣所以报先帝而忠陛下之职分也。至于斟酌损益，进尽