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文档简介

医院检验中心血管性假血友病因子（vWF）含量测定（ELISA ）1）原理：双抗体夹心法。抗 vWF 与待测血浆中 vWF 结合，加 入酶标抗体形成复合物， 后者与底 物作用呈现色反应。2）标本处理：静脉采血 2 ml 置于含 200 ul 抗凝剂 （ 0.109mol/L 枸橼 酸钠）的塑料试管中 ,3000rpm 离心 10 分钟,取上清液， 28C,保存24小时；-20 C可保存一个月。3）标准制备：1）浓稀释液用蒸馏水稀释到 150ml。2）浓稀涤液用蒸馏水稀释到 500ml。3）酶标抗体用 2ml 稀释应用液溶解。4）底物配制（临用前），每瓶+5ml蒸馏水溶解加入35ulH2Q混匀。5）标准血浆 +2ml 稀释应用液准确复溶 1:20 ；然取500ul 用稀释应用液作 5 次倍比稀释各得 1:40 ； 1:80 ；1:160 ； 1:320 ； 1:640 六个标准点。(4)测定:待测血浆1:40稀释(25ul待测血浆+975ul稀释应用液)孔号12345678稀释应用100液(ul)标准血浆1:21:41:801:161:321:64(ul)00000100待测稀释100血浆(ul)37 C孵育90分钟洗涤三次，甩干酶标抗体100(ul)37 C孵育60分钟洗涤三次，甩干底物液（ul）10037C 15 20分钟终

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