高效液相HPLC常见故障分析及其排除方法

1、2021/4/13,整理课件,高效液相色谱（HPLC） 常见故障分析及其排除方法,2021/4/13,整理课件,宗 旨,集三十余年使用与维护仪器之经验 汇各国仪器常见故障之点滴 -奉献给祖国的栋梁,1,2021/4/13,整理课件,HPLC流程结构有机结合紧密相关,2,流动相,输液泵,7725i,色谱柱,检测器,色谱工作站,在线过滤器,保护柱,溶剂滤头,2021/4/13,整理课件,相对检测器本底低 UV与检测条件相呼应 190nm-220nm近紫外区注意事项 样品浓度与检测器灵敏度 PH值对色谱柱影响 机械杂质、有机杂质 脱气-脱气装置质量,3,流动相,2021/4/13,整理课件,有关流动

2、相常见故障现象,泵前输液管有气泡 脱气 清洗溶剂滤头 检查输液管是否破损 过滤膜用错- 保留时间变化-挥发-吸收,4,2021/4/13,整理课件,5,输液泵,输液泵,出口单向伐,入口单向伐,柱 塞 杆,压力波动 压力很低,漏液 压力很低,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,6,故障分析排除判断法,实用 快速 经济 可靠,2021/4/13,整理课件,7,流动相,输液泵,7725i,色谱柱,检测器,色谱工作站,10MPa,9.9MPa,0.5MPa,0.0MPa,压差,0.1,9.4,0.5,MPa,压力从何处产生?,2021/4/13,整

3、理课件,进样伐-7725i,进样模式 1 部分充满定量管而不浪费样品 2 完全充满定量管 MBB（Make-Before-Break) 断流前之动作 带（i）后缀意味着有内置式触发开关 不推荐用户长时间最高压力下工作 定量管体积 0.1微升-10毫升 最高压力 35-49MPa,8,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/1

4、3,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,色谱柱,如何选择色谱柱? 1 柱效 塔板数/米 总塔板数 250毫米 70000 17000 200毫米 70000 14000 150毫米 70000 10500 2 柱填料 C18 C8 C6 NH CN 3 ,9,2021/4/13,整理课件,色谱柱维护,色谱柱安装 保护柱安装 平衡色谱柱 反向柱（C18）用甲醇 乙腈10-20倍 柱体积平衡 2504.6柱体积约4毫升 注意柱前柱后死体积 连接件 1: SUS 一卡就死 卡过就断 不同柱死体积不同 2:PEEK 承受压力有限 3:SU

5、S-PEEK 优于1 2,10,2021/4/13,整理课件,色谱柱损坏现象,柱效减低 峰型变矮变宽 保护柱失效 分析柱污染 柱前柱后死体积 分析柱头塌陷 色谱峰出现肩峰 何谓肩峰? 柱连接管断在柱头里 色谱柱受震动 您的色谱柱是否在病态运行,11,2021/4/13,整理课件,样品前处理-保护色谱柱,液液萃取 液固萃取 固相萃取 上样 纯化 洗脱 洗柱 固相萃取装置-自动化富集 SPE预处理柱 子弹头式 针管式 12孔 24孔式 氮吹仪 -浓缩样品 12孔 24孔式,12,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,

6、2021/4/13,整理课件,检测器,氘灯损坏 噪声大 检测池污染 噪声大 检测池有气泡 噪声尖大 接地线 噪声大 压力过大 噪声大 参比池污染 噪声大 检测池漏液 噪声大 您的检测器噪声如何?,13,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,消耗品,流动相 国产甲醇7元/瓶 国产乙腈38元/瓶 进口甲醇210元/瓶4L 进口乙腈450元/瓶4L 氘灯 SPD-10AVP 3200元/只/2000小时 SPD-10AVP用国产 1500元/只/2000小时 管接头 SUS-PEEK接头 保护柱 国产550元/套（三柱芯） 分析柱 国产1100元/只,14,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,2021/4/13,整理课件,202