(2021年整理)Waters高效液相色谱仪标准操作规程

1、waters高效液相色谱仪标准操作规程1. waters高效液相色谱仪标准操作规程2.3. 4. 编辑整理：5.6.7.8.9. 尊敬的读者朋友们：10. 这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（waters高效液相色谱仪标准操作规程）的内容能够给您的工作和学习带来便利。同时也真诚的希望收到您的建议和反馈，这将是我们进步的源泉，前进的动力。11. 本文可编辑可修改，如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅，最后祝您生活愉快 业绩进步，以下为waters高效液相色谱仪标准操作规程的全部内容。12

2、.13. 目 的描 述 waters 高 效 液 相 色 谱 仪 标 准 操 作 规 程 .14. 适 用 范 围化 验 室 15. 责 任 者化 验 员 应 严 格 遵 照 该 操 作 规 程 ， qc 主 管 负 责 监 督 本 规 程 的 实 施 . 16. 定 义hplc high performance liquid chromatography , 高 效 液 相 色 谱 仪 。17. 安 全 注 意 事 项5.1 有 机 溶 媒 有 害 健 康 ， 各 溶 剂 瓶 口 应 封 严 。 5.2 注 意 检 查 废 液 桶 中 废 液 应 避 光 ， 防 止 废 液 桶 满 外 溢

3、.18. 规 程 6.1. waters hplc的 组 成 : 贮 液 器 输 液 泵 自 动 进 样 器 分 离 柱 （柱 温 箱 ) 紫 外 检 测 器 控 制 及 数 据 处 理 系 统 （millennium 32化 学 工 作 站 ）。6.2. hplc系 统 的 打 开 及 关 闭 顺 序 6.2.1 打 开 顺 序 对 于 分 体 式 : 请 按 泵 、 进 样 器 、 柱 温 箱 、 检 测 器 的 顺 序 打 开 开 关 ， 待 各 部 分 分 别 显 示 初 始 化 完 毕 后 ， 最 后 打 开 millennium 32化 学 工 作 站 。 泵 与 色 谱 工 作

4、站 的 连 接：对 于 510 泵,因 为 此 泵 与 色 谱 工 作 站 是 单 向 联 系 ， 如 要 使 泵 在 remote 状 态 下 由 工 作 站 控 制 ， 首 先 要 在 泵 的 键 盘 上 按 menu 键 ， 待 显 示 屏 切 换 至 mode 状 态 下 , 其 状 态 是 loca ，按 edit/enter 键 ，在 local 的 l 前 有 闪 动 的 光 标 显 示,按 键， local 转 换 成 rem， 再 按 edit/enter 键,此 命 令 已 输 入 进 去， 最 后 按 stop/run 键, 使 泵 处 于run 状 态 这 时 泵 和

5、工 作 站 的 连 接 即 告 成 功。 泵 的 任 何 动 作 都 可 由 工 作 站 来 控 制。还 应 注 意 这 一 步 工 作 在 每 次 开 机 时 都 要 进 行.对 于 alliance 2690 系 统 ： 先 打 开 alliance 2690 主 机 、 检 测 器 电 源 开 关,待 初 始 化 完 毕 后 ，再 进 入 millennium 32 化 学 工 作 站。 对 于 流 动 相 的 要 求:对 于 液 体 试 剂 应 尽 量 采 用 色 谱 纯 试 剂； 对 于 所 用 到 的 固 体 试 剂 应 采 用 分 析 纯 试 剂; 对 于 水，应 采 用 经 纯

6、 水 机 处 理 过 的 超 纯 水； 流 动 相 在 使 用 前 一 定 要 经 0.45mm 的 滤 膜（ 滤 膜 分 为 水 相 膜 与 有 机 相 膜， 确 保使 用 正 确 的 滤 膜， 参 见 附 表 ) 过 滤、超 声 真 空 脱 气 方 可 使 用， 严 禁 含 盐 的 流 动 相 未 经 过 滤 直 接 使 用。应 养 成 良 好 操 作 习 惯: 规 范 操 作 ， 树 立 保 护 hplc 整 套 系 统 的 概 念 ,尤 其 对 于 输 液 泵、色 谱 柱、检 测 器,在 使 用 后 应 及 时 冲 洗，以 免 污 染 而 使 其 寿 命 缩 短 或 损 坏，尤 其 如

7、 操 作 者 使 用 了 含 盐 的 流 动 相， 更 应 注 意 清 洗 的 步 骤： 首 先 用 脱 过 气 的 纯 水 在 流 速 为1ml/min 左 右 冲 洗 3060 分 钟 ， 再 用 含 50 以 上 甲 醇 或 乙 腈 的 水 溶 液 以 相 同 的 流 速 冲 洗 2030 分 钟 左 右。如 要 卸 下 柱 子， 在 经 过 上 述 冲 洗 过 程 之 后，再 经 纯 甲 醇 或 乙 腈 以1ml/min 的 流 速 冲 洗 20 30 分 钟，柱 子 卸 下 后 应 马 上 拧 紧 柱 堵。 流 速 的 变 化 应 采 用 阶 梯 式 递 增 或 递 减 的 方 式，

8、 启 动 泵 时, 应 在 2 分 钟 之 内 由 小 流 速 慢 慢 增 大 到 所 需 的 流 速, 泵 关 闭 时 亦 然（ 流 速 递 减)。 切 忌 流 速 的 骤 变.6.2.2 关 闭 顺 序 首 先 退 出 millennium 32化 学 工 作 站, 再 关 闭 系 统 的 其 他 部 分 。 6.3. millennium 32化 学 工 作 站millennium 32色 谱 管 理 系 统 是 集 数 据 采 集 、 处 理 、 hplc系 统 的 控 制 、 结 果 的 管 理 、 报 告 的 打 印 为 一 体 的 综 合 系 统 。 下 面 就着 重 介 绍 该

9、 系 统 的 基 本 操 作 知 识 。 6.3.1 millennium 32化 学 工 作 站 的 进 入 打 开 化 学 工 作 站 ， 系 统 自 动 进 入 program manager界 面 , 双 击 millennium 肖 像 ， 这 时 进 入millennium界 面 , 双 击 session manager 图 标 , 系 统 将 自 动 初 始 化 ， 以 使 工 作 站 和 hplc整 套 系 统 进 行 联 接 。 初 始 化 后 ， 按 系 统 要 求 键 入 你 的 user name和 password, 这 时 你 已 进 入 该 系 统 。 6.3.

10、2 project的 进 入 和 建 立 project的 进 入： 在 session manager窗 口 下 ， 击 project肖 像（或 从 view中 选 择 projects）, 在 其 中 有 已 建 好 的 project, 双 击 你 所 需 的 project肖 像 ， 再 进 行 你 想 做 的 工 作 。 project的 建 立 从 file中 选 择 new， 即 显 示 new project的 画 面 . 在 project name 中 输 入 你 的 project 名 称 。 在 initiallze project 项 目 中 选 择 copy 中

11、的 filter and fields 或 methods。在 from project 中 选 择 要 拷 贝 的 现 存 project. 选 择 tablespace size. 选 ok, 存 贮 并 退 出 . 当 millennium 软 件 在 建 立 一 个 新 的 project 时 ， 在 屏 幕 上 及 时 显 示 出 完 成 建 立 新 project 的 百 分 比 。 当 达 到 100% 时 ， 在 sessionmanager 画 面 即 出 现 一 个 新 的 project 肖 像 。6.3.3 收 集 数 据 的 一 般 过 程 使 用 millennui

12、um32收 集 数 据 的 一 般 过 程 如 下 ：在 project 窗 口 内 建 立 收 集 数 据 所 需 仪 器 的 仪 器 方 法； 建 立 包 括 此 仪 器 方 法 的 方 法 组 ； 使 用 此 方 法 组 收 集 数 据 。本 部 分 包 括 : 建 立 仪 器 方 法 ， 建 立 方 法 组 ， 收 集 样 品 。 建 立 /修 改 仪 器 方 法 从 sessoin manager窗 口 ， 打 开 所 需 的 project。 选 择 method 按 钮 , 现 存 的 方 法 的 肖 像 即 出 现 在 屏 幕 上 。从 命 令 菜 单 中 选 择 file,

13、然 后 选 择 其 中 的 new instrument method， 即 出 现 system open 对 话 框 . 在 目 录 中 选 择 收 集 数 据 需 要 使 用 的 色 谱 硬 件 系 统 的 名 称 ， 如 ： system_1. 按 ok， 这 时 instrument method 窗 口 即 显 示 出 来 。 窗 口 的 上 部 分 是 该 系 统 的 所 有 仪 器 的 肖 像 。 用 鼠 标 器 将 需 要 设 定 仪 器 参 数 的 仪 器 部 件 激 活 ， 然 后 在 仪 器 肖 像 上 双 击 两 下 , 即 出 现 instrument dialog

14、 box 画 面 。 对 各 个 部 件 设 置 操 作 条 件 ， 或 通 过 输 入 新 的 参 数 来 更 改 以 前 的 参 数 。 例 如 ： 定 义 泵 参 数 ， 先 双 击 sim/pcm 的 肖 像 . 填 写 泵 参 数 ， 按 ok。当 所 有 参 数 设 置 完 成 后 , 按 ok. 即 回 到 instrument method 窗 口 。 选 file 中 的 save as 存 贮 仪 器 方 法 文 件 ， 如 有 需 要 ， 起 一 文 件 名 ， 按 ok。 选 择 file 中 的 exit， 即 回 到 project 窗 口 . 新 的 仪 器 方

15、法 肖 像 即 出 现 在 此 窗 口 下 。 建 立 方 法 组 (method set)仪 器 方 法 编 好 后 ， 必 须 存 于 一 方 法 组 中 ， 才 能 在 quick set control 中 调 用 。 在 project 窗 口 下 选 方 法 肖 像 。 选 file 中 的 new method set, 即 显 示 出 method set 对 话 框 。 在 此 画 面 的 instrument method 一 栏 ， 选 择 已 确 定 的 仪 器 方 法 。 其 他 项 目 可 空 着 不 填 。 然 后 选 file， save as。 输 入 方 法

16、 组 名 后 ， 按 ok。 选 file， exit. 即 退 回 到 project 窗 口 。 新 设 置 的 方 法 组 肖 像 即 出 现 在 此 窗 口 下 。 收 集 样 品 ：完 成 以 上 各 步 骤 后 ， 即 可 收 集 样 品 。 在 project 窗 口 下 选 择 quick set control 肖 像 。 出 现 system open 对 话 框 。选 择 建 立 仪 器 方 法 时 确 定 的 色 谱 硬 件 系 统 , 按 ok。 即 出 现 quick set control 窗 口 。 在 此 窗 口 下 的 sample loading tabl

17、e 中 用 鼠 标 器 按 第 一 行 ， 这 时 millennium 软 件 会 自 动 填 充 各 项 初 始 参 数 。 通 过 输 入 新 值 可 更 改 表 中 的 各 项 参 数 ， 表 中 的 瓶 号(对 于 高 效 液 相 色 谱 仪 的 进 样 表 ，除 另 有 规 定 外 ， 按 括 号 法 安 排 进 样 顺 序 。 即 第 一 针 为 标 准 品 1作 为 系 统 适 用 性 共 进 6针 ， 要 求 rsd不 大 于 2, 随 后 为 标 准 品 2, 进 样 次 数 为 2针 , 然 后 为 样 品 1到 样 品 3， 各 进 2针 。 样 品 3 后 为 标 准

18、 品 1，依 次 类 推 , 直 到 将 所 有 样 品 都 安 排 在 进 样 表 中 ） 进 样 次 数 ， 进 样 体 积 ， 运 行 时 间 等 项 目 对 自 动 进 样 器 有 控 制 作 用 . 在 method set report 一 列 中 选 择 在 前 面 刚 刚 建 立 的 方 法 组 . 在 运 行 方 式 （ mode )中 选 run only. 选 择 进 样 方 式： 菜 单mode 下 选 单 个 样 品 或 样 品 组 进 样。将 sample loading table 中 第 一 行 点 黑 。 击 setup instrument 按 钮 ， 启

19、动 系 统 。 系 统 启 动 后 可 击baseline monitor 图 标, 即 可 观 察 基 线 。 待 基 线 平 稳 后 ， 击 绿 灯 或 样 品 盘 肖 像 准 备 进 样 。 出 现 injector wait 提 示 信 息 ， 随 即 进 样。 在 样 品 测 试 过 程 中, 系 统 会 在 quick set 窗 口 下 显 示 瓶 号 和 进 样 次 数 及 运 行 时 间 。 并 可 在 此 窗 口 下 观 察 检 测 器 的 输 出 情 况 . 屏 幕 上 显 示 的 检 测 器 输 出 是 自 动 满 量 程 方 式 （即 自 动 按 最 大 信 号 满

20、格 输 出 )。 当 收 集 完 色 谱 数 据 后 ， 选 择 file， exit。 退 出 quick set 窗 口 。 样 品 收 集 完 成 后 ， millennuium32会 自 动 存 贮 收 集 的 数 据 . 6.3.4 建 立 数 据 处 理 的 方 法 在 millennuium32中 ， 完 成 不 同 的 任 务 需 编 辑 不 同 的 方 法 ， 如 仪 器 方 法 （收 集 数 据 ）， 处 理 方 法 (定 性 定 量 分 析 )， 报 告 方 法 (打 印 实 验 报 告 ）等 .本 部 分 包 括 ： *重 新 调 出 色 谱 峰 进 行 观 察 。 *

21、谱 图 积 分 及 确 定 积 分 表 中 的 参 数 。 *输 入 组 分 表 资 料 。 *存 贮 数 据 处 理 方 法 。 调 阅 色 谱 图 进 入 在 其 中 收 集 样 品 的 project， 在 此 窗 口 下 选 channel 肖 像 。在 channel view table 中 选 择 欲 进 行 色 谱 分 析 的 文 件 行 并 使 其 变 黑.在 tools 下 选 择 review 肖 像 ， 这 时 在 review data窗 口 下 即 显 示 出 你 调 入 的 色 谱 图 。 选 file, new method。 在 new method 对 话

22、框 中 指 定 数 据 处 理 的 类 型 ， 如 lc， 选 ok。 色 谱 图 的 积 分 选 view， integration table。 在 屏 幕 下 部 即 出 现 integration event table。 在 peak width, minimum area， minimum height 方 框 中 输 入 适 宜 的 数 值 。 按 integration 按 钮 ， 观 察 积 分 情 况 ， 并 适 当 进 行 积 分 参 数 的 调 整 。 输 入 组 分 资 料 选 view， component table。 即 可 见 到 空 的 组 分 表 。 选

23、options， fill table from result， 即 可 自 动 填 充 积 分 完 毕 的 色 谱 图 的 组 分 表 . 也 可 用 手 动 方 式 修 改 表 中 的 参 数 。按 calibration/quantitate 后 , 选 view， result table。 即 可 看 到 积 分 的 结 果 . 存 贮 数 据 处 理 方 法 在review data 窗 口 下,选 file， save method。 在 processing method save as 对 话 框 的 窗 口 下输 入 数 据 处 理 方 法 名 称 。 按 ok， 贮 存

24、processing method. 在 组 分 表 的 上 方 可 看 到 新 的 processing method 的 名 称 .选 file， exit. 即 可 退 出 review data 窗 口 ， 回 到 project 窗 口 。 6.3.5 重 新 观 察 色 谱 结 果 进 入 你 所 需 的project 窗 口 . 击 result view 肖 像 . 在 result view table 中 选 择 你 想 观 察 的 色 谱 数 据 . 击 review 肖 像 ， 你 所 选 择 的 第 一 个 色 谱 数 据 的 谱 图 将 在 review data

25、窗 口 下 ， 其 结 果 将 显 示 在 result table 中 的 第 一 行 。 按 next ch/inj 的 方 框 即 可 看 到 下 一 针 进 样 的 有 关 资 料 。 选 file， exit. 即 可 回 到 project 窗 口 。6.3.6 报 告 方 法 的 编 辑 及 试 验 报 告 的 打 印 启 动 报 告 出 版 系 统进 入“project” 窗 口。在views 下 按 一 下 方 法 肖 像。选 择file,new report method. 这 时 即 可 编 辑 新 的 报 告 方 法。在 报 告 排 版 窗 口 中, 右 边 为 一 张

26、 模 拟 的 白 纸， 左 上 方 的 列 表 为 排 版 时 可 放 置 在 右 边 纸 上 的 项 目。 如 图 谱, 积 分 表, 样 品 信 息， 仪 器 方 法 等， 左 下 方 为 报 告 头 标 和 脚 标（ 如 土。 选 择individual 为 每 个 结 果 有 一 个 报 告， 选summary of result sets all 方 式 为 打 一 个 集 中 的 报 告。 按ok。 设 计 报 告 格 式按 一 下chromatogram groups 肖 像。 在 chromatogram groups 列 表 中 选 择autoscaled chromatog

27、ram . 并 在 报 告 页 面 上 按 一 下， 用 鼠 标 器 将 此 图 形 放 在 画 面 合 适 的 位 置 上。用 鼠 标 器 将 箭 头 放 在 画 面 的 边 缘， 当 箭 头 变 成 双 箭 头 时 将 图 形 放 大 或 缩 小。选 择format,landscape。 可 将 图 谱 垂 直 放 置。按 一 下method group 肖 像， 从method group 的 列 表 中 选 择instrument method, 并 在 报 告 页 面 上 的 合 适 处 按 一 下。 这 时 instrument method 方 框 将 出 现 在 报 告 页 面

28、 上。按 一 下table groups 肖 像， 在 table groups ， 并 在 报 告 格 式 上 的 合 适 位 置 上 按 一 下.选 择format，page size. 可 改 变 报 告 尺 寸 的 大 小。选 择customize，header。 即 出 现header 窗 口. 在 此 窗 口 下 选 择general information 肖 像。在 general information field 列 表 中 按 一 下date。 这 时 在field name 的 方 框 中 即 出 现date 方 框。 可 用 鼠 标 器 将 此 方 框 移 动 到 合

29、 适 的 位 置。 可 用 文 字， 箭 头, 方 框 等 工 具 在header 窗 口 下 增 加 你 感 兴 趣 的 内 容。选file，save。 输 入 header 的 名 称 （如：my_header， 按 ok， 返 回 到header 窗 口.选file，exit. 即 回 到report publisher 窗 口。在 customize，footer。 即 出 现 footer 窗 口。按 一 下 general information 肖 像， 在general information field 列 表 中 按 一 下page number 的 方 框. 将 此 方

30、框 放 在 报 告 页 面 的 注 脚 位 置 上。选file,save。 输 入footer 的 名 称 ( 如：my_ footer ）， 按ok， 返 回 到footer 窗 口。选file，exit。 回 到report publish 窗 口。在footer 列 表 中 选 刚 编 好 的 脚 标。 存 储 报 告 方 法选file，save。 输 入 此 报 告 的 方 法 名 （ 如：my_ report ) , 按 ok， 返 回 到 report publisher 窗 口。选file,exit。 即 回 到project 窗 口。 在 此 窗 口 下 即 可 看 到 my_

31、 report 报 告 方 法 的 肖 像。 报 告 格 式 预 览： 报 告 格 式 设 计 好 后, 在 打 印 之 前， 可 在 此 预 先 看 到 打 印 效 果， 如 需 修 改 可 随 时 切 换 到 报 告 出 版 窗 口, 边 看 边 修 改, 直 到 满 意 为 止。在project 窗 口 下， 选result 肖 像， 即 出 现result view table 表.在 此 表 上 选 择 需 要 报 告 的 结 果 文 件， 使 其 变 黑.按 一 下preview 肖 像， 即 出 现report method selection 窗 口.从 目 录 上 选 择 刚

32、 才 已 建 立 好 的 报 告 方 法， 按 ok。 这 时 即 出 现 刚 才 所 选 结 果 的 报 告。在 上 画 面 上 按nextpage 或prevpage 即 可 看 到 报 告 的 下 一 页 或 上 一 页。按 方 法 编 辑 肖 像 即 可 对 当 前 方 法 进 行 编 辑。按 打 印 肖 像， 即 可 将 此 报 告 打 印 出 来。选 择file,exit. 即 可 退 出 报 告 画 面， 回 到“project” 窗 口.6.3.7 批 量 进 样 结 果 的 处 理 及 打 印 报 告 当 已 有 确 定 的 处 理 方 法 后 ， 可 用 此 方 法 处 理

33、 数 据 。 在 channel view table 表 中 选 择 你 要 的 样 品 行 并 将 其 按 黑 。 在 tools 下 击process and report 肖 像 . 这 时 即 出 现 process and report options 对 话 框 。在 处 理 方 法 一 栏 中 选 择 use specified prosessing method 并 指 定 处 理 方 法 ， 把 print 选 择 框 的 叉 扇 掉 。 按 ok. 这 时 开 始 处 理 你 所 选 的 数 据 , 在 屏 幕 下 方 显 示 出 result generator 肖 像 。