溶出度测定及其过程评价 总后姜雄平上海 广州

1、2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,自我介绍,姜雄平,总后卫生部药品仪器检验所,副所长,专业技术大校，主任药师，硕士,第八、九届国家药典委员会委员,国家药品标准物质委员会委员,全军药学专业委员会药物分析分委,会副主任委员,解放军药学学报副主编,药物分析编委,中国药事编委,从事药品检验实验室工作,18,年、药,品检验管理工作,6,年,参编生物芯片第一、二版、,制剂工作手册,近年发表论文,10,余篇,溶出度测定及其过程评价,总后卫生部药品仪器检验所,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,摘要幻灯片,主要内容,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,2.,溶出

2、过程评价,3.,溶出过程应用,4.,2010,版中国药典溶出度判断标准的变化,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,1.1,测定波长的选择,一般应选择被测成分的最大吸收波长,应考察赋形剂、包衣、胶囊壳等对测定产生干扰的情况和程,度，如果干扰程度小于,2%,，则可以忽略。否则应予以排除。排,除方法可以考虑双波长法、导数光谱等方法,参比波长的选择,采用紫外分光光度法测定时，可以使用参比波长来提高信噪,比，参比波长应选择被测成分没有吸收的波长段起始点后,10nm,，,一般选择,550nm,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验

3、所,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,1.2,吸光度范围,FODT-601,吸光度线性范围：,0.05,1.3,建议：吸光度值应在,0.05,1.0,高吸光度样品,最小光程探头，吸光度超过,1.0,时，建议不用,FODT-601,测定,精准度要求不高时,可选择最小吸收峰的峰波长,吸收谷的谷波长,如果必须选择吸收峰坡处波长，则应在峰坡,同侧,选择参比波长，,以免波长漂移引起误差，且峰坡波长的吸光度应不得大于,1.0,；,测定波长与参比波长吸光度差应在,0.05,0.95,之间,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,1.3,探头标定,至

4、少用,5,个,不同浓度的对照品溶液，对每个探头进行标定,标定溶液的温度应与溶出测定,温度一致,可放在溶出度水浴中平衡温度,相关系数应,不小于,0.999,可以尝试用已测定含量的样品来作,自身标定,，可以消除,赋形剂干扰,短光程探头对某些药品可能,不符合朗比定律,不适用于吸收系数法,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,1.4,溶出曲线测定采样间隔,速释制剂：一般选择,15,秒钟,普通固体制剂：一般选择,30,秒钟,缓控释制剂：选择,1,2,分钟,或更长,1.5,介质脱气,介质应新鲜配制，临用前脱气,盐酸溶液应先将水脱气后再加盐酸,缓冲液

5、应先配制再脱气,建议采用减压抽滤脱气：,先加热至约41，再减压抽滤,，,或采用氦气脱气,脱气不好，会在溶出曲线中出现剌峰，产生噪音,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,1.6,探头的吸附,探头会对某些物质有吸附作用，如甲氨喋呤，结果导致,溶出曲线噪音加大,如有吸附，则每测定一批样品后，应使用镜头纸醮无水,乙醇擦拭探头光学表面,1.7,探头中气泡的消除,一旦发现探头光程中有气泡，建议使用弯头长注射针注,射器吸取介质注射将气泡赶走。这种情况通常在短光程探,头中发生,为预防这种情况发生，可在测定前对无水乙醇清洗探头，,去掉探头表面油污,20

6、20,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,1.8,剌峰的消除,建议按下法消除：,将大于后一个数据点的值，用其前后点数据的均值替换,Visual Basic 6.0,程序：,FOR K=1 TO P,FOR I=1 TO M,FOR J=1 TO N,SELECT CASE J,CASE 1,IF D(I,J)(I,J+1) THEN D(I,J)=D(I,J+1),CASE N,IF D(I,J)D(I,J-1) THEN D(I,J)=D(I,J-1),CASE ELSE,IF D(I,J)D(I,J+1) THEN D(I,J)=(D(I,

7、J-,1)+D(I,J+1)/2,END SELECT,NEXT J,NEXT I,NEXT K,P,为消除剌峰的次数，,M,为片（粒）数，,N,为采样点数，,D(I,J),为溶出百分值。,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,1.9,数据平滑,如果溶出曲线噪音较大，应先对数据进行平滑处理，以,免选择的数据点误差过大,建议按下法消除：将每个数据点用其前后点数据的均值,替换,Visual Basic 6.0,程序：,FOR K=1 TO Q,FOR I=1 TO M,FOR J=2 TO N-1,Dt(I,J)=(D(I,J-1)+D(I

8、,J+1)/2,NEXT J,NEXT I,NEXT K,Q,为平滑的次数，,M,为片（粒）数，,N,为采样点数，,Dt(I,J),为平滑后,溶出百分值,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,1.,溶出过程测定指导原则与注意事项,1.10,数据提取,光纤原位实时测定数据采集是依次对,6,个探头扫描，因此每个溶出杯,测定时间不一致，在释放速度较快时间段，对数据有较大的影响，为,将来进行溶出曲线的比较，建议提取规定时间点数据时，按下法计算：,式中：,T,为规定时间点，,T1,、,T2,为规定时间,T,前后数据点的时间；,D,为,规定时间点的溶出值，,D1,、,D2,为,T1,、

9、,T2,时间测得的溶出度,D,D2,D1,T1,T,T2,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.1,溶出过程评价方法应考,虑的内容,应使用每片（粒）各时间点,的溶出值进行分析，不能只用,均值来分析,应考虑每组制剂溶出曲线的,均一性,应考虑取样时间点设计的合,理性,方法计算简单,曲线比较？散点比较？,不均一,时间点,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.1,溶出过程评价方法应考虑的内容,应考虑溶出值与时间的相,关性，溶出速率与时间密,切相关,0上升高峰下降0,应考虑判断两组溶出曲线,相似的置信度,很遗憾：目前还没有理想,的分析方

10、法,2.,溶出过程评价,90,50,拐点,微分线：溶,出速率曲线,积分线：溶,出曲线,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.2,评价和比较溶出度过程的方法,模型信赖法,Weibull,模型,经验模型,Logistic,模型,Gompertz,模型,Sigmoid,或,Probit,模型,Higuchi,模型,Hixson-Crowell,模型,Kormeyer-Peppas,模型,0,0.2,0.4,0.6,0.8,1,0,2,4,6,8,10,12,Slow,Medium,Fast,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶

11、出过程评价,2.2,评价和比较溶出度过程的方法,模型信赖法存在的问题,众多模型，该选择何种模型来进行分析？,选择模型的各参数的物理意义是什么？,受试制剂与参比制剂是否适用相同的模型？,模型信赖法作为法定标准并不适用,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.2,评价和比较溶出度过程的方法,非模型信赖法,方差分析、协方差分析、裂区设计分析,未考虑溶出值与时,间的相关性，将溶出值作为独立的参量，,不适用,多变异法（,HotellingpsT,2,）,考虑到了溶出度均值间变异和,与时间的相关性，但当超过,2,个时间点时，溶出值的置信区间不可实,现,嵌套模型,+

12、,协方差分析,仅适用于时间对溶出速率影响显著时,数据点的分析,相似因子法：,f,2,因子,相似等效限法,Chow,（周贤忠）,& Ki,方法：基于时间序列分析,*,Chow & Shao,（邵军）方法：基于多项式回归,目前广为接受，,USP,采用,f,2,法、,JP,采用,f,2,法和相似等效限法,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.3,评价和比较溶出度过程,的步骤,测定溶出曲线,检验单个制剂溶出曲线的均,一性,f,2,因子法：相对标准差法,相似等效限法：不需要,比较两个制剂溶出曲线的一,致性,f,2,因子法,相似等效限法,勿需均一,性判断,测定溶

13、出曲线,f2,因子法：相对,标准差法,溶出均一性判断,是否均一,溶出不一致,或不相似,f,2,因子法,相似等效限法,溶出一致或相似,结束,否,是,是,是,否,否,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.4,检验制剂一组溶出曲线的均一性,相对标准差法（,f,2,因子采用）,85,以下点的溶出值,RSD,小于,20,85,以上点的溶出值,RSD,小于,10,符合上述两条,溶出均一,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.5,相似因子法,Rt,t,时间参比制剂累积释药百分率,Tt,t,时间受试制剂累积释药百分率,n,

14、取点数目,Wt,权重系数（通常为,1,）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.5,相似因子法,f,2,：,0,100,f,2,：, 50,，溶出过程不相,似或不等同，此时体内生,物等效性评价更重要,f,2,：,50,100,表明两种,制剂的溶出过程相似或等,同,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.5,相似因子法,优点,便于计算,可用于正交设计或均匀设计的数据分析,可直接对溶出数据进行分析,无需模型拟合,缺点,缺乏统计学依据,只使用各时间点均值，未考虑溶出值,变异性,未考虑溶出值与时间的相关性,f,2,易

15、受溶出度取样时间和点数,的影响,最后一点设计对,f,2,值至关重要,宜取快速释放段，不宜取开始与,释放平台段,单组的溶出数据不适用,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.5,相似因子法,注意事项,适用于两组制剂（参比制剂与受试制剂）溶出数据间,的比较,在,同一条件,下测定,每组至少要做,12,剂量,各组内制剂溶出数据是均一的：各时间点溶出值,RSD,小,于,20,，最后一个时间点溶出值,RSD,小于,10,含量的差异,参比制剂与受试制剂含量应相同，含量,差异,不得超过,5,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,

16、2.5,相似因子法,注意事项,取样点在,3,个以上,，最好,5,7,个点，溶出值达,85,之后,只能一个点,建议以参比制剂的溶出,15%,、,30,、,45,、,60,、,75,、,85,、,90,的时间点作为分析数据,，（,10,？）,一般,15,分钟,点必选,参比制剂与受试制剂都在,15,分钟内溶出达到,85,时，,勿需进行溶出过程比较,此时，体内吸收与溶出速率无关,但：,参比制剂与受试制剂之一,15,分钟内溶出未达到,85,，,则可进行比较,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.5,相似因子法,f,2,因子,EXCEL,计算表,2020,年,4

17、,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.5,相似因子法,举例,例,1,取样时间,(min),%,溶出量,片,A(,参比,),片,B(,受试,),10,87,94,15,96,99,20,99,99,30,100,99,45,101,99,60,101,99,需要计算,f,2,?,否, 85% in15min,f,2,(n=,？,N/A,?),溶出过程相似,例,2,取样时间,(min),%,溶出量,片,A(,参比,),片,B(,受试,),10,17,16,15,31,28,20,48,44,30,66,60,45,87,86,60,90,88,需要计算,f,2,?,是,

18、f,2,( n=,5,?),72 (,溶出过程相似,),2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.5,相似因子法,举例,例,3,取样时间,(min),%,溶出量,片,A(,参比,),片,B(,受试,),10,29,34,15,38,41,20,47,50,30,63,64,45,80,79,60,95,91,需要计算,f,2,?,是,f,2,(n=,6,?),74,，溶出过程相似,例,4,取样时间,(min),%,溶出量,片,A(,参比,),片,B(,受试,),10,87,55,15,96,72,20,99,85,30,100,97,45,101,102

19、,60,101,103,需要计算,f,2,?,是,f,2,( n=,3,?),31 (,溶出过程不相似,),2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,基本思路,t,时间受试制剂,1,与参比制剂,2,溶出值比,Rti,，共有,T(t),个时间,点，做,n(i),片（粒），,y,为溶出值,计算各时间点,95,的置信区间,判断：,如果该时间点的,95,置信区间,L,U,落在相似等效限,L,U,的范围内，即认为该点两个制剂溶出局部相似,如果所有时间点的,95,置信区间,L,U,均落在相似等效限,L,U,的范围内，即认为两个制剂溶出总体过程相似,

20、2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,R,的相似等效限,上限(U),下限(L),Q,为各论中规定的溶出限度值（,75,、,80,等）,为具有科学意义的参比制剂与受试制剂溶出曲线平均差，,一般= 5%,不同,Q,值的相似等效区间,Q,50%,60%,65%,70%,75%,80%,85%,90%,95%,L,0.8182,0.8462,0.8571,0.8667,0.8750,0.8824,0.8889,0.8947,0.9000,U,1.2222,1.1818,1.1667,1.1538,1.1429,1.1333,1.1250,1

21、.1176,1.1111,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,Chow,（周）,& Ki,方法,局部比较：,溶出比,R,的,95,置信区间,其中：,溶出比,均,值,下限,上限,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,Chow,（周）,& Ki,方法,总体比较：,溶出比,R,的,95,置信区间,下限,上限,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,Chow,（周）,& Shao,（邵）方法,用多项式描述溶出比：,R,

22、x,为时间，多项式系数,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,Chow,（周）,& Shao,（邵）方法,用普通最小二乘回归求得多项式系数,局部比较：,溶出比,R,的,95,置信区间,其中,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,Chow,（周）,& Shao,（邵）方法,总体比较：,溶出比,R,的,95,置信区间,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,举例,Q=75,L=87.5%,U=114.3%,f,2,=

23、 64,结论：相似,序号,时间（小时）,产品,1,2,3,4,6,8,10,受试,制剂,1,34,45,61,66,75,85,91,2,36,51,62,67,83,85,93,3,37,48,60,69,76,84,91,4,35,51,63,61,79,82,88,5,36,49,62,68,79,81,89,6,37,52,65,73,82,93,95,7,39,51,61,69,77,85,93,8,38,49,63,66,79,84,90,9,35,51,61,67,80,88,96,10,37,49,61,68,79,91,91,11,37,51,63,71,83,89,94,1

24、2,37,54,64,70,80,90,93,参比,制剂,1,50,56,68,73,80,86,87,2,43,48,65,71,77,85,92,3,44,54,63,67,74,81,82,4,48,56,64,70,81,84,93,5,45,56,63,69,76,81,83,6,46,57,64,67,76,79,85,7,42,56,62,67,73,81,88,8,44,54,60,65,72,77,83,9,38,46,54,58,66,70,76,10,46,55,63,65,73,80,85,11,47,55,62,67,76,81,85,12,48,55,62,66,7

25、3,78,85,Rt图,0.6,0.7,0.8,0.9,1,1.1,1.2,1.3,0,2,4,6,8,10,12,Xt,R,t,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,举例,结果与结论：有一个时间点超出,L=87.5%,，,U=114.3%,范围，因,此为“,局部相似,”,方,法,时间,（小时）,Xt,1,2,3,4,6,8,10,Rt,均值,Rt,0.81,0.93,1.00,1.02,1.06,1.08,1.08,Chow & Ki,L(xt),Lt,78.2,89.3,95.6,97.3,101.9,103.5,103.6,L

26、t,76.7,87.8,94.1,95.8,100.4,102,102.1,Chow&Shao,L(xt),80,87.9,93.9,98.4,104.2,105.9,102.4,L(xt),77.7,86.1,92.2,96.6,102.1,103.8,99.9,Chow & Ki,U(xt),Ut,86.5,97.7,103.9,105.7,110.2,111.8,111.9,Ut,88,99.2,105.4,107.2,111.7,113.3,113.4,Chow&Shao,U(xt),88.3,94.4,100.1,105.1,111.6,113.3,111.3,U(xt),90.7,

27、96.2,101.8,106.9,113.7,115.4,113.8,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,2.,溶出过程评价,2.6,相似等效限法,优点,有统计学依据,采用上下限的区间方法,考虑了溶出度与时间的相互作用,缺点,依赖于,Q,，,Q,未知时无法判断,为点比较，不是整体比较。逐点按局部和总体比较，方法与,计算复杂,Chow & Ki,方法,时间是单调变量，不是随机变量，用随机设计存在误判,随机设计不能评估总体的相似情况,Chow & Shao,方法,溶出比值对时间的二项式回归没有物理意义,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应

28、用,3.1,药品质量控制,广泛应用,溶出度,释放度,应用现状,单点控制,适用范围：一般制剂,优点：简单、工作量小,缺点：不能反映溶出过程，对溶出曲线有特殊要求的不适用,多点控制,适用范围：缓控释制剂、定位释放制剂、对溶出曲线有特殊要,求的制剂,优点：可以控制溶出过程,缺点：方法烦琐、工作量大,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.2,药品再评价,国家食品药品安全“十一五”规划,“制定实施药品再评价管理办法，制订配套的技术规范,与指南，对已上市药品分期分批开展再评价研究。”,药品再评价的定义,根据上市药品研究资料和不良反应监测，对上市药品进行分,析评价

29、，并依据评价结论采取风险控制措施的过程,口服固体制剂再评价的关键,溶出度,成功案例：日本药品品质再评价工程,摘自药品再评价管理办法（讨论稿）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.2,药品再评价,我国现状,药品注册对溶出度的技术要求低，几乎没有研发单位比较四,种介质溶出行为的,无参比制剂，导致低水平的仿制，质量差的药品好仿！,为做溶出度而做溶出度，不为疗效只为合格,溶出度标准根据照顾大多数企业产品要合格，制定溶出条件,“四不同”,同一产品，不同质量标准，溶出度测定条件不同,同一产品，不同企业，溶出过程不同,同一企业，不同批号，溶出过程不同,同一批号，

30、不同片（粒），溶出过程不同,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.3,应用实例,头孢氨苄片（,4,个不同企业）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.3,应用实例,甲氨蝶呤片（同一厂家不同批号）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.3,应用实例,甲硝唑片（不同企业）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.3,应用实例,诺氟沙星胶囊（不同企业）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.3,应用实例,异烟肼片（不同企业）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.3,应用实例,盐酸二甲双胍片（不同企业）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.3,应用实例,硝苯地平缓释片（,2,个企业）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.3,应用实例,尼莫地平片（不同企业）,2020,年,4,月,10,日,总后卫生部药品仪器检验所,3.,溶出过程应用,3.4,溶出度再研究的目的,对我国当