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文档简介

1、G试验和GM试验检测的方法及临床意义GM试验检测的是半乳甘露聚糖,主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。曲霉菌特有的细胞壁多糖成分是(1-5)呋喃半乳糖残基,菌丝生长时,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原。曲霉菌检测广泛使用Bio-Rad曲霉菌抗原检测试剂盒(PlateliaTM Aspergillus Ag)。1GM释放量与菌量成正比,可以反映感染程度。连续检测GM可作为治疗疗效的监测。在造血干细胞移植患者中的诊断敏感性高。值得注意的是,以下情况可出现假阳性:(1)使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;(2)新生儿和儿童;(3)血液透析;(4)自身免疫性肝炎等;(5)食

2、用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情况可出现假阴性:(1)释放入血循环中的曲霉GM(包括甘露聚糖)并不持续存在而是会很快清除;(2)以前使用了抗真菌药物;(3)病情不严重;(4)非粒细胞缺乏的患者。侵袭性真菌病即是以往所说的深部真菌病,是指致病性真菌侵犯皮下组织、粘膜、肌肉和内脏器官等所引起的真菌感染性疾病。引起侵袭性真菌病的病原菌有270余种,常见病原菌有念珠菌(占70%-90%)和曲霉菌(占10%-20%)。医学教|育网搜集整理常引起侵袭性真菌病的高危因素有严重粒细胞缺乏、免疫功能低下、移植、糖尿病、肾衰、血透、慢阻肺、实体器官移植、长期激素治疗以及入住ICU等。GM试验

3、是检测半乳甘露聚糖抗原的试验,采用的方法是酶免法。半乳甘露聚糖(GM)是曲霉细胞壁的一种成分,GM从薄弱的菌丝顶端释放,曲霉菌感染的患者血液内存在GM.曲霉菌不入血,主要是侵袭血管壁,沿血管壁进行侵袭,进入血液。GM试验是曲霉菌病早期诊断的筛查指标。GM常于临床症状前5-8天和影像学出现异常之前7.2天出现。GM释放量与菌量呈正比,可以反映感染的程度,若两次检测阳性即可以诊断侵袭性曲霉菌感染,GM试验也可作为疗效判断的重要指标。GM实验检测值0.85 ug/l时定义为阳性,建议结合临床症状诊断治疗。GM试验的临床应用近10年来,临床侵袭性真菌感染的患者数量呈明显增长趋势,构成住院病人死亡的主要

4、原因之一。其中侵袭性曲霉菌感染是构成真菌感染的最严重形式,曲霉菌感染主要发生在中性粒细胞减少症病人(抗癌治疗引起)和免疫抑制剂治疗的病人(器官移植,特别是骨髓移植)以及使用皮质激素治疗的病人中。通常开始于吸入环境中的曲霉菌孢子之后。由于曲霉菌几乎不能从血培养基中分离出来,其诊断通常建立在非特异性诊断或放射影像学检查结果上(临床症状,CT扫描,胸部X-光检查等),很难实现早期诊断。血清曲霉菌半乳甘露聚糖抗原检测的出现,为实现曲霉菌感染的早期诊断带来了巨大的临床价值,获得国内外医生的广泛认可,已成为侵袭性曲霉菌感染诊断的重要检测方法。目前,该检测已被全球权威组织EORTC/MSG推荐使用并定义为侵

5、袭性曲霉菌感染早期诊断金标准;国内的中国侵袭性真菌感染工作组中华医学会重症医学分会也对该检测为临床带来的价值做了透彻的解读。侵袭性真菌病是临床常见的感染类型,其发病率在器官移植受体、恶性肿瘤等免疫受抑制患者中高达 20% 40%,也日益成为此类患者的重要死亡原因。侵袭性肺真菌病临床表现不典型易被基础疾病所掩盖,确诊通常需要侵入性的组织标本,而侵入性的操作过程常因患者的病情所限难以实施。因此有较高的漏诊率。目前国内大多数医院都在开展非侵袭性实验室技术如G试验和GM试验,成为真菌感染的诊断标准之一,以提高真菌感染的阳性率检测的是半乳甘露聚糖(glactomannan,GM),半乳甘露聚糖是广泛存在

6、于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖,菌细胞壁表面菌丝生长时,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原,可以通过酶联免疫吸附试验法进行检测。二、两者在诊断真菌感染中的意义根据侵袭性肺真菌病诊断指南,真菌感染的诊断因素包括宿主因素、临床特征、微生物学检查、组织病理学。确诊疾病必须依赖组织病理等有创检查和操作,培养过程又需要一定时间,从而无形中增加了漏诊率,而新的血清学诊断方法,包括G试验、GM试验以及对于真菌特异DNA的PCR技术,与临床征象、微生物培养,尤其是CT扫描一起,为开始抢先治疗、监测疾病病程、评价治疗反应提供了更多有参考价值的资料。GM试验主要针对于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。曲霉

7、菌感染部位主要集中在肺部,从而引起肺部侵袭性曲霉,诊断曲霉菌在肺部是定植还是侵袭性生长,关键在于其是否合成GM.如果痰液或肺泡灌洗液标本培养到曲霉菌 且GM试验检测结果为阳性,即可诊断为曲霉菌侵袭性感染。GM试验常可在患者临床症状出现前5-8d获得阳性结果,并可对血清、脑脊液、肺泡或支气管灌洗液进行检测,因而往往可以使诊断提前。所以GM试验是诊断侵 袭性曲霉感染的微生物检查证据之一,通过检测GM值也可以作为治疗效 果的参考指标之一。 GM试验对其他真菌检测无效,且敏感性和特异性受诸多因素影响,以下情况可出现假阳性:(1)使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;(2)新生儿和儿童;(3)血液透析;(4)自身免疫性肝炎等;(5)食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情况可出现假阴性:(1)释放入血循环中的曲霉GM(包括甘露聚糖)并不持续存在而是会很快清除;(2)以前使用了抗真菌药物;(3)病情不严重;(4)非粒细胞缺乏的患者。我国的侵袭性真菌病指南把连续2次GM阳性作为微生物感染的标准,临床上经验性治疗早期应用,会

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