中药成分鉴别常用显色剂及其配制方法

1、中药成分鉴别常用显色剂及其配制方法、通用显色剂(1) 硫酸 浓硫酸与甲醇等体积小心混合，冷却；15%浓硫酸的正丁醇溶液；5%浓硫酸的乙酸酐溶液；5%浓硫酸的乙醇溶液；浓硫酸与乙酸等体积混合。用以上任一试液喷薄层板后，于110C烘烤15min，不同类的成分显不同颜色。(2 )碘 0.5%碘的氯仿溶液；碘蒸气在一密闭的玻璃缸内预先放入少许碘结晶，使缸为碘蒸气饱和。将薄层板放入缸内数分钟即可显色，碘对很多化合物显黄棕色。(3) 高锰酸钾-硫酸 高锰酸钾0.5g溶于15ml 40 %硫酸中。检测易还原性物质。(4) 铬酸 -硫酸 重铬酸钾 5g 溶于 100ml 40%硫酸中。易还原性物质显色。(5)

2、 荧光显色液0.25%的罗丹明B乙醇溶液；0.01%的荧光素乙醇溶液； 0.1%的 桑色素乙醇溶液。用以上任一试液喷薄层板后，在荧光背景下可能显黑色或其他荧光斑点。二、专属性显色剂(一)生物碱及含氮类化合物(1) 改良碘化铋钾( Dragendorff )试剂 碱式硝酸铋 0.85g 溶于 10ml 冰醋酸与 40ml 水 中；碘化钾0.8g溶于20ml水中。试液与试液等量混合置棕色瓶内保存作贮备液。用前将 1ml 贮备液、 2ml 冰醋酸与 10ml 水混合。用于生物碱与某些含氮化合物，显橙红色。(2) 碘-碘化钾(Wagner)碘1g与碘化钾10g溶于50ml水(微温)，加2ml乙酸，加水

3、 至 100ml 。用于生物碱，显棕褐色。(3) 碘铂酸 5ml 15 %氯化铂溶液加 45ml 10 %碘化钾溶液，用水稀释至100ml。用于生物 碱，不同生物碱显不同颜色。(4) 碘铂酸钾10%六氯铂酸溶液 3ml 与 97ml 水混合，加 100ml 6%碘化钾溶液，混匀。 新鲜配制。用于生物碱与其他有机含氮化合物，不同生物碱显不同颜色。(5) Ehrlich 10%对二甲氨基苯甲醛盐酸溶液与丙酮按1:4混合。对二甲氨基苯甲醛1g,溶于100ml 96 %乙醇中。用于吲哚类，有时喷后要加热。(6) 硫酸高铈铵1%本品的 85%磷酸溶液。用于吲哚类，长春花生物碱显各种颜色。( 7)对二甲氨

4、基苯甲醛 -硫酸 65ml 浓硫酸与 35ml 水混合，放冷后加对二甲氨基苯甲醛 125mg,再加入5%三氯化铁溶液0.05ml。本试液可保存一周。用于麦角生物碱。(8) 肉桂醛-盐酸 肉桂醛5ml、乙醇95ml和5ml 36%盐酸混合，新鲜配制。用于吲哚类 衍生物。(9) 呫吨氢醇0.1g本品溶于90ml乙醇中，力口 10ml 36 %的盐酸，用前新鲜配制。用于色 氨酸及其他吲哚类生物碱。(10 )氯化铁 -过氯酸 0.5mol/L 三氯化铁溶液 1ml 与 35过氯酸溶液 50ml 混合。用于吲 哚类生物碱。(11) 三氯化铁-碘 三氯化铁5g、碘2g溶于50ml丙酮与50ml 20%酒石

5、酸的混合液中。 用于黄嘌呤生物碱类，不同生物碱显不同颜色。(12) 硫酸铈-硫酸(改良Sonnenschein试剂)硫酸铈0.1g混悬于4ml水中，加1g三氯 乙酸，加热煮沸，放冷，逐滴加入浓硫酸直至浑浊消失。用于生物碱、含碘有机化合物的显色，喷后110 C烤几分钟，不同生物碱显不同颜色。(13) 硫氰酸钴(H)试液硫氰酸铵3g、氯化钴1g溶于20ml水中。用于生物碱，伯、 仲、叔胺类。(14) 碘化汞钾(Meyer)试剂 1.36g氯化汞和5g碘化钾各溶于 20ml水中，混合后加水 稀释至 100ml 即可。(15) 硅钨酸(Bertrand)试剂5g硅钨酸溶于100ml水中，加盐酸少量调至

6、 pH = 2左右。(16) 苦味酸试剂1g 苦味酸溶于 100ml 水中。(17) 鞣酸试剂鞣酸 1g 加乙醇 1ml 溶解后再加水至 10ml。(18) 4-甲基伞形酮0.02g本品溶于35ml乙醇，加水至100ml。用于含氮杂环化合物。(19) 硫酸铜-联苯胺 0.3g硫酸铜溶于100ml水-乙醇(5: 4)的混合液中；0.1%联苯 胺的50%乙醇溶液。用时先喷试液，于60C干燥后再喷试液。用于吡啶单羧酸的显色。(20) 氯化铜 0.5%氯化铜溶液。用于肟类。(21) 硝普钠 -铁氰化物 10%氢氧化钠溶液、 10%硝普钠溶液、10%铁氰化钾溶液和水按(1： 1： 1： 3)混合，冰箱内

7、保存(可保存数周)，使用前取适量与等体积丙酮混合。用于氯基氰、胍、肌酸、肌酸酐、脲和硫脲及其衍生物的显色。(22) 硝普钠 -过氧化氢 5%硝普钠溶液 2ml、 10%氢氧化钠 1ml 与 5ml 3%过氧化氢溶液 混合后，加 15ml 水。冰箱可保存数日。用于胍、尿素、硫脲及其衍生物、肌酸和肌酸酐的 检测。(23) 三氯化锑试剂25g 三氯化锑溶于 75g 氯仿中成饱和溶液。用于秋水仙生物碱类。二)黄酮类黄酮类化合物在紫外灯或日光下多显不同颜色，用氨薰、喷三氯化铝或氢氧化钠溶液等皆会使颜色加深或变色。1 )三氯化铝 -乙醇试液2)氢氧化钾(钠)试剂10%氢氧化钾或氢氧化钠水溶液。三氯化铝1g

8、,加100ml乙醇溶解，即得。用于含氧杂环化合物。3)氨气。(4) 三氯化锑试液10%三氯化锑的氯仿溶液。喷后110C烤5min，用于黄酮类。( 5)碱式(或中性)醋酸铅试剂1 碱式醋酸铅(或饱和中性醋酸铅)水溶液。用于黄酮类。(6) 硫酸铜-枸椽酸钠 硫酸铜(CuSQ 5fC) 1.73g、柠檬酸钠17.3g与无水碳酸钠10g 溶于水并稀释至100ml。用于含邻二羟基的黄酮类与香豆精类。(7) 硼氢化钾试剂1 %2%硼氢化钾异丙醇溶液，必须新鲜配制；浓盐酸。先喷溶液， 5min 后放入盐酸蒸气缸内。用于双氢黄酮类化合物，显红、橙红色。( 8 )盐酸镁粉试剂浓盐酸和镁粉。( 9)醋酸镁试剂 2

9、 %醋酸镁甲醇溶液。(三)糖类(1) 茴香醛 -硫酸试剂 茴香醛 0.5ml 加入 50ml 乙酸，混匀后加 1ml 硫酸，用前新鲜配制。改良试液。0.5ml茴香醛、9ml乙醇、0.5ml浓硫酸与0.1ml乙酸混合后立即使用。 用于糖类、甾族、萜类。喷后将薄层板置100105C烤，不同糖显不同颜色。(2) a -萘酚-硫酸15 %的a -萘酚-乙醇溶液10.5ml、浓硫酸6.5ml、乙醇40.5ml与水4ml的混合液。喷后100C烤几分钟，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色。用于糖类的显色。(3) 苯胺 -二苯胺 -磷酸 4g 二苯胺、 4ml 苯胺与 20ml 85 %磷酸共溶于 200ml 丙酮中

10、。喷 后85C烤10min，用于还原糖，不同糖显不同颜色。( 4)对二甲氨基苯甲醛 -乙酰丙酮 a.50 %氢氧化钾溶液 5ml 与 20ml 乙醇混合； b. 乙酰丙酮与正丁醇( 1:100 )的混合液。两种溶液均需新鲜配制，临用前混合。取a.混合液0.5ml，加入10ml b.溶液。 对二甲氨基苯甲醛 1g 溶于 30ml 乙醇中，加 30ml 36%盐酸，需要时用 180ml 正丁醇 稀释。使用时先喷试液，于105 C加热5min，再喷试液，于 90 C干燥5min。用于氨基糖类。(5) 酚-硫酸试剂 酚3g、浓硫酸5ml溶于95ml乙醇中。喷后110C加热几分钟，糖显棕 色。(6) 1

11、,3- 二羟基萘酚 - 磷酸试剂 0.2 %1,3- 二羟基萘酚乙醇溶液 100ml 与 85%磷酸 100ml 混匀。喷后120C加热510min,酮糖显红色，醛糖显淡蓝色。(7) 邻氨基联苯 - 磷酸 邻氨基联苯 0.3g 溶于 5ml 85 %磷酸与 95ml 乙醇，即得。用于糖 类。8)苯胺 -磷酸 2mol/L 苯胺的水饱和正丁醇溶液与 0.67mol/L 磷酸正丁醇溶液,按 1:2(体积)混合。用于糖类。(9)咔唑 -硫酸 0.5g 咔唑、 5ml 硫酸溶于 95ml 乙醇中。用于糖类。(10) 3,5-二氨基苯甲酸-磷酸试剂3,5-二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于25ml 80%磷酸

12、中， 加水稀释到60ml。喷后100 C加热15min , 2-去氧糖在日光下显棕色，在紫外光下显黄绿色 荧光。(11) 苯胺-邻苯二甲酸试剂 0.93g 苯胺、1.66g邻苯二甲酸溶于100ml水饱和的正丁醇溶 液中。喷后105110C加热10min，糖显红棕色。(12) 百里酚-硫酸试剂 百里酚0.5g、硫酸5ml溶于95ml乙醇。喷后120C加热1520min , 多数糖在白色背影上显暗红色，继续加热则变成浅紫色。(13) 萘雷锁辛 -磷酸 0.2 %萘雷锁辛乙醇溶液 100ml 与 85%磷酸溶液 10ml 相混合。用于 糖类。(14) 4-氨基马尿酸 0.3 %的 4-氨基马尿酸乙醇

13、溶液。用于还原糖。(15) 酞酸苯胺 0.93g 苯胺和 1.66g 酞酸溶于 100ml 水饱和的正丁醇中。用于糖类。(16) 硝普钠-偏高碘酸钠2.5 %偏高碘酸钠溶液； 7%硝普钠溶液、水与饱和的哌嗪乙醇溶液按照1: 3: 20比例混合。使用时先喷试液，室温干燥10min，再喷试液。用于脱氧糖。(17) 偏高碘酸钠-联苯胺-硝酸银 0.1 %偏高碘酸钠溶液；联苯胺 2.8g溶于80ml乙 醇、70ml水、30ml丙酮与1.5ml 1mlo/L 盐酸的混合液中； 20ml丙酮加1ml饱和硝酸银 溶液，然后逐滴加水直至沉淀的硝酸银刚刚溶解。使用时先喷试液，干燥，再喷试液，放入含25%氢氧化铵

14、溶液的容器内5min后，取出轻轻喷试液。用于糖和含1,2二羟基多醇类。(18) 联苯胺 -三氯乙酸 0.5g 联苯胺溶于 10ml 乙酸，加 10ml 40%三氯乙酸水溶液，用乙 醇稀释至100ml。用于糖类。(19) 蒽酮 0.3g 蒽酮溶于 10ml 乙酸与 20ml 乙醇中，加入 3ml 85 %磷酸与 1ml 水。置冰 箱内保存。用于酮糖。(20) 氨性硝酸银试剂1g 硝酸银，加 20ml 水溶解，滴加适量的氨水，边加边搅拌，至开 始产生的沉淀将近全溶为止，过滤。用于糖类。(21) 碱性酒石酸铜试剂结晶硫酸铜6.23g，加100ml水；酒石酸钾钠 34.6g、氢氧 化钠10g，加100

15、ml水。用时将试液与试液等量混合。用于糖类。(22) 呫吨氢醇冰醋酸( Xanthydrol )试剂 10mg 呫吨氢醇溶于 100ml 冰醋酸(含 1%的盐 酸)中。用于a -去氧糖。四)强心苷(1) 3,5-二硝基苯甲酸(Kedde)试剂2 % 3,5-二硝基苯甲酸的甲醇液与 2mol/L氢氧化 钾甲醇溶液或 5氢氧化钠乙醇液，用前等量混合。强心苷显紫红色，几分钟后褪色。(2) 三氯乙酸25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液。三氯乙酸3.3g溶于10ml氯仿，加30%过氧化氢溶液12滴。喷后110C加热710min，紫外灯下观察荧光。用于甾族、洋 地黄苷与藜芦碱。(3) 碱性三硝基苯试剂间三硝基苯

16、 100ml 溶于 40ml 二甲基甲酰胺溶液，加浓盐酸 3 4滴，加水至100ml :5%碳酸钠溶液。使用时先喷试液，再喷试液，于90100C加热45min。用于强心苷，在浅橙色背景上显橙红色。(4) 硫酸-次氯酸盐10ml 1mol/L硫酸与3ml次氯酸钠溶液(10%活性氯)混合。用于洋 地黄苷。(5) 三氯化锑试剂 25 %或饱和的三氯化锑氯仿溶液。喷后100C加热5min,在紫外灯或 日光下观察。(五) 蒽醌类蒽醌类化合物本身在日光下显黄色或橙黄色, 在紫外光下则显黄、 红、橙色荧光。 薄层 展开后用氨熏或喷氢氧化钾(钠)碱溶液,则颜色变深或变色。( 1 )氢氧化钾试剂 10 %氢氧化

17、钾甲醇溶液。( 2)氨气。(3) 醋酸镁试剂 0.5 %醋酸镁甲醇溶液，喷后 100C加热5min。(4) 乙酸铝溶液 0.5 %乙酸铝水溶液,喷后紫外灯下看荧光。(5) 硼酸试剂 1 %硼酸水溶液。( 6)碱式醋酸铅试剂 1 %碱式醋酸铅水溶液。(六) 香豆素与酯类香豆素母体本身无荧光, 但羟基香豆素在紫外光下常显亮蓝色荧光。 层析法检识常用以 下显色剂。(1)羟胺-氯化铁 a.盐酸羟胺20g溶于50ml水，用乙醇稀释至 200ml，冷凉处保存；b.氢氧化钾50g溶于少许水中，力口 500ml乙醇。氯化铁(FeCb 6H2O) 10g溶于20ml 36 % 盐酸溶液中，加乙醚 200ml摇匀

18、，置密闭容器内保存。使用时将试液a.与b.按1: 2混合，滤去沉淀，滤液放冰箱保存。先喷此试液，稍干，再喷试液。用于内酯类、酯类、酰 胺与羧酸酐类。香豆素类显红色。(2) 三氯化铁试剂 5 三氯化铁的水溶液或甲醇溶液。检识含有酚羟基的香豆素。(3) 重氮化试剂对硝基苯胺0.35g ,溶于浓盐酸5ml中，加水至50ml;亚硝酸钠5g, 加水50ml。取、液等量在冰水浴中混合后使用。香豆素显黄、橙、红、棕、紫等颜色。(4) 4-氨基安替比林-铁氰化钾 2% 4-氨基安替比林乙醇溶液； 8%铁氰化钾溶液。 使用时先喷试液，后喷试液，最后用氨熏。香豆素和酚类显橙红至深红色，Emerson反 应。(5)

19、 硝普钠 1mol/L氢氧化钠溶液；硝普钠2g溶于100ml 75 %乙醇中。用时先喷试 液，空气中干燥，再喷试液。用于各种硫代内酯。(6) 氢氧化钾 5 %氢氧化钾甲醇溶液。用于香豆素、蒽醌苷及其苷元。(7) 糠醛-硫酸 1 %糠醛丙酮溶液；10%硫酸丙酮溶液。用时先喷试液，再喷试液 。用于氨基甲酸酯。(8) 二苯胺 1 %的二苯胺乙醇溶液。用于硝酸酯。(9) 氯化铁-磺基水杨酸1 %氯化铁的80%乙醇溶液；1%磺基水杨酸的80%乙醇溶液。用时先置于溴蒸气中10min后喷试液，空气干燥15min，再喷试液。用于硫代磷酸酯类。(七) 皂苷类(1) 磷钼酸乙醇液 25 %的磷钼酸乙醇溶液。喷后在

20、140 C加热510min，皂苷元均显深 蓝色。(2) 碘蒸气 薄层展开后置密闭的碘蒸气缸中，皂苷元皆显棕黄色斑点。(3) 三氯乙酸溶液 三氯乙酸或三氯乙酸和乙酸(1: 2)的溶液。喷后在100C加热20min , 皆显黄色。(4) 硫酸甲醇溶液硫酸和甲醇( 1： 1)的溶液。喷后加热，不同的皂苷元可显红褐色、 紫色、黄色或黑色，所显颜色与温度有关。(八) 萜类与甾体化合物(1) 香草醛 -硫酸试剂 浓硫酸 1ml 加到 50ml 冰醋酸中，冷后加 0.5g 香草醛。用于萜类。 喷后105 C加热510min。(2)亚甲蓝溶液 0.025g 亚甲蓝溶于 100ml 0.025mol/L 硫酸溶

21、液中，临用前用等量丙酮 稀释。用于甾族硫酸酯类。(3)肉桂醛-乙酐-硫酸 1 %肉桂醛的乙醇溶液；新鲜配制的浓硫酸与乙酐(1: 12 ,体积比)混合物。先喷试液，90 C干燥5min，后喷试液，室温放置12min后，置烘 箱内90C加热。用于甾体皂苷元。(4) 间二硝基苯2%间二硝基苯乙醇溶液； 2.5mol/L 氢氧化钾甲醇溶液。用前将试液与试液等体积混合。用于17-甾酮类。(5) 氯胺T-三氯乙酸3%氯胺T溶液，新鲜制备；25%三氯乙酸乙醇溶液，使用前 将试液与试液按 1：4 比例混合。用于甾体苷。(6) 氯磺酸 -乙酸 氯磺酸 5ml 在冷却条件下加 10ml 乙酸溶解。用于三萜、甾醇与

22、甾族化 合物。(7) 高氯酸 20 %高氯酸溶液，用于甾族。(8) 乙酸酐 -硫酸 5ml 乙酐与等体积浓硫酸在冷却情况下混合，混合液小心地加入50ml无水乙醇中，冷却，临用前新鲜配制。用于许多甾族与三萜苷。(9) 磷钼酸 5%磷钼酸乙醇溶液。 10%磷钼酸乙醇溶液。 20%磷钼酸乙醇溶液或甲 基溶纤剂溶液。用于甾醇与甾族化合物、还原性化合物、类脂。(10) 磷钨酸 20 %本品乙醇溶液。用于甾醇与甾族化合物、还原性化合物。(11) 三氯化锑25 %或饱和的三氯化锑氯仿溶液。喷后100C加热5min ,在紫外灯或日光下观察。用于甾族皂苷元、甾族糖苷与萜类衍生物、维生素A、D、类胡萝卜素。( 1

23、2)五氯化锑 1 份五氯化锑与 4 份氯仿或四氯化碳混合，用前新鲜配制。用于萜类、甾 族皂苷元、维生素 A维生素D与维生素E、油类与树脂类、苯氧烷羧酸酯类。(13)对二甲氨基苯甲醛 -乙酸-磷酸 0.25g 对二甲氨基苯甲醛溶于 50g 乙酸、 5g 85%磷 酸与 20ml 水的混合液中(置棕色瓶保存) 。用于薁类与原薁类。(九) 醇类( 1 )香草醛 - 硫酸 浓硫酸 1ml 加到 50ml 冰醋酸中， 冷后加 0.5g 香草醛。 用于高级醇、 酚、 甾族化合物与精油。(2) 二苯基苦基偕肼 15mg 二苯基苦基偕肼溶于 25ml 氯仿中。用于醇类、萜烯、羰基、 酯与醚。(3) 硝酸铈铵

24、5g本品溶于100ml 4mol/L硝酸溶液。105C加热5min，醇类在黄色背景显 棕色。(4) 碘化铋钾 碱式硝酸铋1.7g溶于20ml乙酸中，力口 80ml水；碘化钾40g溶于100ml 水与200ml乙酸的混合液中，将后一溶液加入前一溶液中，再加水至1000ml。20%氯化 钡溶液。用前试液与试液按 2： 1比例混合。用于聚乙二醇及其醚与酯类。(5) 乙酸铅 1g 本品溶于 100ml 苯，即得。用于 1,2- 二羟基化合物。十)酚类 (1)三氯化铁试剂 5 三氯化铁的水溶液或甲醇溶液。(2) 重氮化试剂对硝基苯胺0.35g ,溶于浓盐酸5ml中，加水至50ml;亚硝酸钠5g, 加水5

25、0ml。取、液等量在冰水浴中混合后使用。(3) 4-氨基安替比林-铁氰化钾 2% 4-氨基安替比林乙醇溶液； 8%铁氰化钾溶液。 使用时先喷试液，后喷试液，最后用氨熏。香豆素和酚类显橙红至深红色，Emerson反 应。(4) 对氨基苯磺酸 4.5g 对氨基苯磺酸溶于 45ml 温热的 12mol/L 盐酸中，用水稀释至 500ml，取10ml于冰中冷却，加 10ml 4.5 %亚硝酸钠冷溶液，于 0C放15min。临用前加等 体积 10%碳酸钠水溶液。用于酚类、胺类和能偶合的杂环化合物。(5) 坚牢蓝B盐试剂 0.5 %本品水溶液；0.1mol/L氢氧化钠溶液。用时先喷试液， 再喷试液。用于能

26、偶合的酚与胺，喷后可见光下显棕、紫或绿色。(6 )铁氰化钾-氯化铁1 %铁氰化钾溶液。2%氯化铁溶液。使用前将两者等量混合。用于酚类、胺类、硫代硫酸盐与异硫代氰酸盐。(7) Pauly 试剂 0.5g 对氨基苯磺酸和 0.5g 亚硝酸钾溶于 100ml 1mol/L 盐酸溶液中，即 得。喷雾后再喷 1mol/L 氢氧化钠溶液。用于酚类和能偶合的芳胺。(8) 重氮化联苯胺 联苯胺5g加36%盐酸14ml，用水稀释至1000ml ，10%亚硝酸钠 溶液，用前新鲜配制。用时将和在0C下等体积混合，并不断搅拌。本试剂仅能保存2 3 小时。(十一)醛和酮(1) 2,4- 二硝基苯肼试液 1.5g 2,4

27、- 二硝基苯肼，加 20ml 50 %的硫酸溶液，溶解后，加 水至100ml，过滤，即得。用于醛基、酮基与酮糖。醛和酮化合物显黄色。(2) 二硝基苯肼乙醇溶液1g 2,4- 二硝基苯肼溶于 1000ml 乙醇，再缓缓加入 10ml 盐酸， 摇匀，即得。用于醛基、酮基与酮糖。3)双甲酮 - 磷酸 0.3g 双甲酮(5,5- 二甲基环己烷 -1,3- 二酮)溶于 90ml 乙醇与 10ml 85%磷酸的混合液中。用于酮糖。4)邻联茴香胺 邻联茴香胺的乙酸饱和溶液。(十二)氨基酸、肽与胺类(1)茚三酮试剂 茚三酮0.3g溶于100ml正丁醇中，加冰3ml。或0.2g茚三酮溶于100ml 乙醇中。用于氨基酸、胺与氨基糖类，喷后110 C加热到显色。(2) 双缩脲(Biuret )试剂 1 %硫酸铜溶液；40%氢氧化钠溶液。使用前等体积混合。(3) 靛红-乙酸锌 靛红1g、醋酸锌1g溶于100ml 95 %的异丙醇中，加热至 80C，冷却 后加 1ml 冰乙酸，置冰箱