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文档简介

1、版本/状态：A/1第2页共3页生效日期：文件编号:血清丙氨酸氨基转移三级文件一酶测定标准操作程序目的：建立血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程。范围：适用于血清丙氨酸氨基转移酶测定的标准操作。职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。规程：1测定方法：采用连续监测法测定人血清中丙氨酸氨基转移酶（ ALT/GPT ）的活力。 丙氨酸氨基转移酶催化 L-丙氨酸的氨基转移到a -酮戊二酸生成丙酮酸和 L-谷氨 酸。乳酸脱氢酶（LDH ）在催化丙酮酸还原的同时将 NADH氧化成NAD+。通过 测定NADH在340nm处吸光度下降的速度可求得丙氨酸氨基转移酶的活力。ALTL-丙氨酸+ a -酮戊二酸 丙酮

2、酸 + L-谷氨酸LDH丙酮酸 + NADH + H + 孚L酸 + NAD +2仪器设备GS200全自动生化分析仪3试剂3.1血清丙氨酸氨基转移酶试剂盒，包括试剂 1 （R-1）、试剂2（R-2）。试剂成份含量R-1乳酸脱氢酶（LDH ）L-丙氨酸Tris 4000U/L 025g /L 7g /LR-2a酮戊二酸二钠辅酶1二钠盐 （NADH Na2）Tris 12.5g/L 0.6g/L 4g/L3.2分析用人基质质控血清（RANDOX ）、血清3.3试剂稳定性与贮存血清丙氨酸氨基转移酶试剂盒在2-8 C下避光保存可稳定一年；试剂 R-1、R-2开启后在2-8T避光保存可稳定一个月。3.4

3、样本稳定性与贮存3.4.1分析用人基质质控血清：该血清自生产之日起，在2-8 T下保持可稳定4年；该血清一旦复融，在 25C下可稳定24小时，在2-8 C下可稳定7天，在-20C三级文件血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作程序版本/状态：A/1第3页共3页文件编号:生效日期:可稳定1个月。3.4.2待测血清：2-8 T保存可稳定7天；-20E保存可稳定3个月。样本不可反复冻融。不可使用已被污染的样本。4操作步骤 4.1打开全自动生化仪，按照 GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序，完成普通测试流程。4.2检验方法分析方法：速率A ；主波长：340 nm；副波长：405nm；样品量：15.0ul

4、; R-1 ： 400ul，R-2： 100ul;校准方式：K因子；反应方向：下降；测定温度：37C。样品与R-1混匀后反应5分钟，加入R-2混合后延迟60秒，测定240秒。样品15ul R-1400ulR-2100ul测光主波长340nm副波长405nm测光4.3计算ALT (U/L)=K=-444810min A/min x Vt x 10006.22 x Vs x A/mi n =每分钟吸光度变化率Vt =反应液总体积（ml）1000 =U/ml到U/L的转换系数6.22 = NADH的毫摩尔吸光系数Vs =样品体积（ml）d =比色杯光径（cm）5检验结果的解释抗坏血酸w 40mg/dl游离胆红素 684umol/L（ 40mg/dl）、结合胆红素 684umol

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