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文档简介
1、课后知能检测 1、选择题1下列关于生物技术手段的操作水平的叙述,错误的是A杂交育种个体水平B多倍体育种细胞水平C基因工程原子水平D诱变育种分子水平【解析】基因工程又称DNA重组技术,即操作水平为分子水平。答案】 C2. 下面是4种限制性核酸内切酶所识别的DNA分子序列和剪切位点(J表示剪切位点,切出的断面为粘性末端):限制性核酸内切酶1:J GAT限制性核酸内切酶2:catG 限制性核酸内切酶3: GJ GATCC限制性核酸内切酶4: CCGCJ GG下列表达正确的是()A.限制性核酸内切酶1和 3 剪出的粘性末端相同B.在使用限制性核酸内切酶的同时还需要解旋酶C.限制性核酸内切酶1、2、4
2、识别的序列都是由 4个脱氧核苷酸组成的D.限制性核酸内切酶1和2切出的DNA片段可通过T4DNA连接酶拼接【解析】 使用限制性核酸内切酶时不需要解旋酶解旋, 一般用加热解旋; 限制性核酸 内切酶 4 识别的序列是由 6个 脱氧核苷酸组成的;限制性核酸内切酶 1和 2 切出的 DNA 片段不互补,不能连接。【答案】 A3. 下列对基因工程的理解错误的是()A. 基因工程又叫转基因技术或重组DNA技术B. 基因工程可以将一种生物的 DNA片段转移到另一种生物细胞内并让其表达C. 基因工程的出现受到技术发展的推动D. 基因工程技术已经比较成熟,每次转基因都可以成功,并且达到满意的结果【解析】 基因工
3、程技术尚不是很完善, 每次转基因时都需要转移大量的片段, 然后再 进行筛选,不能精确转移,也不能让目的基因百分之百表达。【答案】 D4基因工程中所用到的工具酶包括 ()DNA解旋酶 限制性核酸内切酶DNA连接酶质粒A. B.C.D.【解析】 DNA军旋酶用于DNA复制过程中,不用于基因工程;质粒是基因工程的载体, 但不是酶。因此 C项正确。【答案】C5.已知某种限制性核酸内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性 DNA分子,若每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该
4、酶切 断,则从理论上讲,经该酶切割后,这些线性DNA分子最多能产生的不同长度 DNA片段的种类数是()ah cd线性DNA分子的酶切示意图A. 1B. 2C. 4D. 9【解析】若每个DNA分子上至少有1个酶切位点被酶切断,则多个线性DNA可以切得的种类有:a、b、c、d、ab、be、cd、abc、bcd 九种。【答案】D6作为基因的运输工具一一载体,必须具备的条件之一及理由是()A. 能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因B. 具有多个限制性核酸内切酶切点,以便于目的基因的表达C. 具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件D. 能够在宿主细胞中复制并稳定保存,
5、以便于进行筛选【解析】 作为载体要携带目的基因进入受体细胞并使之表达,必须能够在宿主细胞内稳定地保存并大量复制,以便通过复制提供大量的目的基因。同时要具有某些标记基因,是 为了通过标记基因是否表达来判断目的基因是否进入了受体细胞,从而进行筛选受体细胞。载体要具有多个限制性核酸内切酶切点,则是为了便于与外源基因连接。综上所述,正确答 案应为Ao【答案】 A7.限制性核酸内切酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制性核酸内切酶BarH I、EccR I、Hi nd川以及Bgl n的辨识序列。箭头表示每一种限制性核酸内切酶的特定切割部位,其中哪两种限制性核酸内切酶
6、所切割出来的 DNA片段末端可以互补,其正确的末端互补序列是怎样的()Aamil 1EeoH. I*4-GCATCC - -CAATTC -CCTAGG - -CTTAACHind 111 + -AAcerr - -TTC(;AA - t鬥IIACATCT -TGTAGA 一A. BarH I 和EccR I;末端互补序列为一AAT一B. BariH I 和Hi nd川;末端互补序列为一GATC. EcoR I 和Hi ndm;末端互补序列为一AATT-D. BartH I 和Bgl n;末端互补序列为一GAT【解析】分析每种限制性内切酶切割位点可知,BarH I和Bgl n切割核苷酸序列后,
7、能产生互补的粘性末端。【答案】 D&下面是四种不同质粒的示意图,其中ori为复制必需的序列,amp为氨苄青霉素抗性基因,tet为四环素抗性基因,箭头表示某种限制性核酸内切酶的酶切位点。下列质粒中【解析】质粒作为基因工程的载体,有两个作用:一是通过标记基因对重组 DNA分子是否进入受体细胞进行鉴定;二是在受体细胞中通过自我复制完成目的基因的扩增。图中 ori为复制必需序列,该序列不能被破坏,否则重组质粒就无法在受体细胞中进行自我复制; 图中的amp tet均为标记基因,只需保留 1个即可。【答案】C9. 质粒是基因工程中最常用的载体,它存在于许多细菌体内。 质粒上有标记基因如图所示,通过标记基因
8、可以推知外源基因(目的基因)是否转入成功。外源基因插入的位置不同,细菌在培养基上的生长情况也不同,下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c),请根据表中提供的细菌生长情况,推测三种重组后细菌的外源基因插入点,正确的一组是( )抗靈节冑霉盍革闵细菌在含氨苄青霉素的培养基上的生长状况细菌在含四环素的培养基上的生长状况能生长能生长能生长不能生长不能生长能生长A.是c;是b;是aB. 是a和b;是a;是bC. 是a和b;是b;是aD. 是c;是a;是b【解析】对细菌来说,能在含氨苄青霉素的培养基上生长,也能在含四环素的培养基上生长,说明抗氨苄青霉素基因和抗四环素基因都没有被破坏,插入点是c;对细菌来
9、说,能在含氨苄青霉素的培养基上生长,说明其抗氨苄青霉素基因正常,不能在含四环素的培养基上生长,说明其抗四环素基因被破坏,插入点应为b;对细菌来说,不能在含氨苄青霉素的培养基上生长,说明其抗氨苄青霉素基因被插入而破坏,故插入点为a。【答案】 A10. 下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。下图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BanH I或EcoR I或Pst I的酶切位点。现用 BanH I和 EcoR I两种酶同时切割该 DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开 )。下列各种酶 切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是( )限
10、制性核酸内切酶BanHlEcoRIPst I识别序列和切割位点GGATCCCCTAGGJGAATTCCTTAAGJCTGCAGGACGTCfI的弟出t I 1 tI 23 4A. 1为BanH I,2 为EccRI,3 为BanH I, 4 为 Pst IB. 1为EcoRI,2 为BarHI,3 为BanHI, 4 为 Pst IC. 1为Pst I,2 为 EcoRI,3 为 EcoRI, 4 为 BanH ID. 1为BanHl,2 为EccRI,3 为Pst I, 4 为 EcoR I【解析】本题建议采用排除法。现用BanHl和EcoRI两种酶同时切割该 DNA片段,若“2为BanHl
11、, 3为BarHI”,则酶切后单个含目的基因的DNA片段(2宀3)自身连接成环状,故B项错误;若“2为EccRI, 3为EcoRI”,则酶切后单个含目的基因的DNA片段(2 3)自身连接成环状,故 C项错误;若“2为EcoRI ,4 为ECORI”,则酶切后单个含目的基 因的DNA片段(2t4)自身连接成环状,故 D项错误。【答案】A二、非选择题11. 如图为DNA分子的切割和连接过程,请据图回答:双金断开rci attq I C T T A |T1 |舟ATTQl| 贮 T T A 為 | pG不同来源的dna片段结合I血A 丁行可EcoRI是一种 酶,其识别序列是 ,切割位点是 与之间的键
12、,切割产生的 DNA片段的末端形式为。(2)不同来源的 DNA片段结合,在这里需要的酶应是 酶,此酶的作用是在与之间形成而起“缝合”作用的。【解析】本题考查限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用。(1)从图中可以看出 EcoRI将DNA片段切割,应为限制性核酸内切酶,其识别序列是 GAATTC切点是G与A之间的磷酸二酯键,切割后产生的DNA片段的末端是粘性末端。(2)DNA连接酶可将不同来源的 DNA 片段连接,从图中可以看出,此酶是通过在G与A之间形成磷酸二酯键的形式连接两个片段, 连接粘性末端的连接酶是 E - coli DNA连接酶。还有一种T4DNA连接酶,既可连接粘性末端, 也可连接平
13、末端。【答案】 (1)限制性核酸内切GAATTC鸟嘌呤脱氧核苷酸(G)腺嘌呤脱氧核苷酸磷酸二酯粘性末端 (2)DNA连接鸟嘌呤脱氧核苷酸(G) 腺嘌呤脱氧核苷酸(A) 磷酸 二酯键12. 图(a)中的三个 DNA片段上依次表示出了 EcoR I、BanH I和Sau3A I三种限制性 核酸内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRI、SaU3AI的切点是唯一的)。GAATTCCTTA GGATCCCCTAGGGATCCTAG图第7页共6页图(b)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)经BamH I酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被 酶切后的产物连接
14、,理由是(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、 乙、丙三种含有目的基因的重组子, 如 图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有,不能表达的原因是(3)DNA连接酶是将两个 DNA片段连接起来的酶,常见的有 和,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 。【解析】由题图可知,BanH I和SaU3A I两种限制性核酸内切酶的共同识别序GAT列是,二者切割可以形成相同的黏性末端,因此经BanH I酶切得到的目的基因可CTAG-以与图(b)所示表达载体被 Sau3A I酶切后的产物连接。(2)在基因表达载体中,启动子应 位于目的基因的首端,终止子应位于目的基因的尾端,这样基因才能顺利地转录,再完成翻译过程,即顺利表达。图中甲所示的目的基因插入在启动子的上游,丙所示目的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转录,因
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