食品微生物检测基础与常用仪器

1、食品微生物实验室基础与常用仪器,目录,食品微生物实验室概况 食品微生物实验室常用仪器 食品微生物实验室检测项目（举例） 食品微生物实验室基础知识,一、食品微生物实验室概况,食品微生物实验室简介,食品微生物实验室主要负责各类微生物项目的检测，主要检测项目有菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、双歧杆菌、罐头商业无菌、致病菌（如沙门氏菌、志贺氏菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌等,食品微生物实验室的功能分区,食品微生物实验室（图集,培养基制备室,培养室,灭菌室,洗涮间,食品微生物实验室常用仪器,超净工作台 微生物的培养都是在特定培养基中进 行无菌培养，那么无菌培养必然需要 超净工作台提供一个无菌的

2、工作环境。 超净工作台的用途是微生物的接种及 处理时的无菌操作,生物安全柜 微生物实验中涉及的试剂和样品 微生物有些是有毒的，对于操作 人员来说伤害较大。为了防止有 害悬浮微粒、气溶胶的扩散，可 以利用生物安全柜对操作人员、 样品及样品间交叉感染和环境提供 安全保护,培养箱1、电热恒温培养箱：一般控制的温度范围为：室温度。用于一般细菌的培养；2、生化培养箱：一般控制的温度范围为：度。用于细菌、霉菌、微生物的培养；3、厌氧培养箱：用于厌氧微生物的培养,天平 天平用于精确称量各类试剂。 实验室常用的是电子天平， 电子天平按照精度不同有不同的级别。 移液器 用于精密量取各种液体,均质器 用于从固体样

3、品中提取细菌。 用微生物均质器制备微生物检测 样本具有样品无污染、无损伤、不 升温、不需要灭菌处理，不需洗 刷器皿等特点，是微生物实验 中使用较为方便的仪器,摇床/振荡器 在微生物实验操作过程中， 液体培养基培养细菌时需要 在特定温度下振荡使用,高压蒸汽灭菌器 用途：培养基、生理盐水、废弃物、 采样器、纱布、衣物的灭菌。 恒温干燥箱 恒温干燥箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干。 烘箱有不同的控温范围，用户可以根据实验需求 进行选择,恒温水浴槽用于培养基等的冷却保温以及某些细菌（如大肠杆菌）的水浴保温培养。 电炉 用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化,显微镜 生物显微镜用于微生物和微小物品

4、结构， 形态等的观察。 pH计/酸度计 用于配置试剂时精确测量PH值， 从而保证配置的溶液的精确性。 有时也需要利用pH计测定样品溶液的酸碱度,菌落计数器 可协助操作者计数菌落数量。 红外线灭菌器 用于接种环、接种针、剪刀等的灭菌,纯水机 实验中用于试剂、培养基等的配置。 冰箱 用于实验室保存试剂和样品。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。具体来说，不同温度下保存的物品如下,1、4适合储存某些溶液、试剂、药品等。 2、-20适用于某些试剂、药品、配好的抗生素等。 3、-80适合某些长期低温保存的样品、 大

5、肠杆菌菌种、感受态等的保存,常见玻璃仪器及用具,1、量器类： 移液管：1ml，2ml，5ml，10ml，25ml 容量瓶：50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml 量筒：容量（ml）10、25、50、10、25、500、1000、2000 2、其他常用玻璃器皿 培养皿：3.5cm,7cm，9cm，15cm 烧杯：容量（ml）： 30、50、100、150、250、400、 600、1000、2000、3000 三角瓶：150ml，200ml， 250ml，500ml，1L，2L，3L 试管,食品微生物实验室检测项目（举例,食品微生物学检验 大肠菌群计数： 仪器配置： 天平：感

6、量0.1g； 均质器； 振荡器； 电热恒温培养箱； 恒温水浴箱； pH计或pH比色管或精密pH 试纸； 菌落计数器； 冰箱：25； 超净工作台，灭菌器，电炉,食品微生物实验室基础知识,1、食品微生物实验室的分级： 根据实验室所处理感染性食品致病微生物的生物危险程度，可把食品微生物实验室分为与致病微生物的生物危险程度相对应的食品微生物实验室。其中，一级对生物安全隔离的要求最低，四级最高。食品微生物实验室所检测微生物的生物危害等级大部分为生物安全二级，少数为生物安全三级和四级（如霍乱弧菌、鼠疫耶尔森氏菌等）。 一级感染性微生物：细菌总数、大肠菌群、粪大肠菌群等； 二级感染性微生物：沙门氏菌、副溶血

7、性弧菌、金黄色葡萄球菌、产毒真菌等； 三级感染性微生物：肉毒梭菌、炭疽芽胞杆菌、肝炎病毒等； 四级感染性微生物：鼠疫耶尔森氏菌、埃尔托生物型霍乱弧菌等,2、生物安全柜和超净工作台的区别？ a）生物安全柜是基于层流原理，在操作区内通过高效过滤器送出垂直向下流动的洁净空气，在操作区前后形成负压区，以防止柜内气溶胶外逸。按其对人员、环境和受试样本的保护程度可将其分为 、 级。正面开放的级和级生物安全柜，与规范的微生物学技术一起使用时，可以为实验室人员及临近环境提供相当水平的防扩散作用；级生物安全柜还能提供防护，以免柜内的微生物扩散至外界环境；级生物安全柜可以为实验室人员、公众和环境提供最大程度的保护

8、,b）超净工作台亦是基于层流原理设计，通过高效过滤器可在操作台的局部空间形成无尘无菌状态，它对操作者没有保护作用，但所形成的局部净化环境可避免操作过程污染杂菌的可能，故其只能应用于非危险性微生物的操作，如用于药品、微生物制剂、组织细胞等的无菌操作,3、菌落总数： 食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。 卫生学意义： 1、作为判定样品被污染程度的标志； 2、用作观察样品中细菌的性质和繁殖动态； 3、对样品进行卫生学综合评价时提供科学依据,4、大肠菌群： 定义：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。 卫生学意义： 1、是评价卫生质量的重要指标，作为食品中粪便污染指标： 2、食品中检出大肠菌群，表明该食品有粪便污染，即可能有肠道致病菌的存在，因而也就有可能通过污染的食品引起肠道传染病的流行。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映对人体健康危害性的大小,5、革兰氏染色 细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌紫色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G）。为观察方便