第一章微生物培养技术章末测试(中图版选修1

1、章末检测（时间：45分钟满分：100分）考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难培养基的成分、类型及 配制1、47接种与无困技术2、3、105利用选择培养基分离微 生物& 91112测定微生物的数量613一、选择题（共10小题，每小题5分，共50分）1 不同培养基的具体配方不同，但一般都含有（）A. 碳源、磷酸盐和维生素B. 氮源和维生素C. 水、碳源、氮源和无机盐D. 碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析 培养不同的微生物，其培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳 源、氮源和无机盐。答案 C2.利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌 落,不可能的原因是（）A. 培养

2、基制备过程中被杂菌污染B. 接种过程中，无菌操作不符合要求C. 系列稀释时，无菌操作不符合要求D. 由大肠杆菌的种类不同造成的解析 大肠杆菌培养基中出现了多种菌落，说明污染了杂菌，杂菌可能来自 培养基，也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求。第1页共14页答案 D3防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述 错误的是 ( ) 。 A实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B. 接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C. 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止 被微生物感染D 使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环

3、境解析 对接种环等金属用具进行灼烧灭菌，应放在酒精灯火焰的充分燃烧层 即外焰处。答案 B4下列关于细菌的叙述， 错误的是()。A. 硝化细菌能以NH3作为氮源和能源物质B. 某些细菌可以利用光能固定 CO2合成有机物C. 生长因子是某些细菌生长过程中需要额外补充的营养物质D .含伊红和美蓝试剂的培养基不能用来鉴别牛奶中的大肠杆菌解析 本题考查微生物的相关知识。硝化细菌能够进行化能合成作用，把NH3 转换成硝态氮，并能利用化学反应中释放的化学能，A项正确；红螺菌在没有有机物的情况下，能够利用光能，固定 CO2合成有机物，B项正确；生长 因子是微生物生长不可缺少的微量有机物，因此某些细菌的生长过程

4、中需要 额外提供生长因子， C 项正确；利用含伊红和美蓝试剂的培养基可以鉴别乳 制品和饮水中的大肠杆菌，D项错误。答案 D5.下列操作需要在火焰旁进行的一组是()。土壤取样 称取土壤 稀释土壤溶液 涂布平板 微生物的培 养A. B.C.D .解析 本实验要求无菌操作，因此在实验室中暴露在空气中的操作均需要在 火焰旁进行。土壤的取样是在室外进行的。第 2 页 共 14 页答案 D6 有三位同学，利用稀释涂布平板法来测定同一土壤样品中的细菌数。在对应 稀释106倍的培养基中，得到如下表所示的结果。你认为下列数据中最接近 真实值的是（）同学统计菌落数平均值甲230230乙21、212、256163丙

5、222、 260241A.230B. 163C. 241D. 236解析 甲同学只涂了一个平板，乙同学虽然涂了3个平板，其中一个数据相差太大。答案 C7.下表是关于对四种生物能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，其中正确的一组是（）硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻能源利用化学能分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖类糖类CO2氮源NH3N2N2N03-代谢类型自养需氧型异养厌氧型异养需氧型自养需氧型A.硝化细菌与乳酸菌B.乳酸菌与根瘤菌C.根瘤菌与衣藻D .硝化细菌与衣藻解析 乳酸菌不能直接利用N2,且能量来源为糖类；根瘤菌进行生命活动所需要的能量来自于糖类等有机物分解。答案 D8.通过选择培养基可以从

6、混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在碳源为 纤维素的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素，可以 抑制细菌和放线菌的生长。禾U用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离 出的是（）大肠杆菌霉菌放线菌纤维素分解菌ABCD 解析 本题考查了微生物分离知识。纤维素分解菌可以利用纤维素，大部分 微生物却不能；培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长，但霉菌 能够生长。答案 A9 利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而减 少了对石油资源的依赖，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的 一项是（）纤维质预处理可溶解 原料屜生物复合物发酵加工乙醇微生物B燃料

7、乙醇A. 要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样B图中过程常用的微生物 B是酵母菌C.微生物A和微生物B可利用的碳源相同D 可用纤维素酶制剂代替微生物 A起作用解析 微生物A所用碳源为纤维素，微生物 B所用碳源为纤维素降解物。 答案 C10.下列操作属于灭菌的是（）A 接种前用火焰灼烧接种环B. 接种前用酒精擦试双手C. 将平板倒置，放入培养箱中培养D. 接种在酒精灯的火焰旁完成解析 要正确区分灭菌、消毒和防止杂菌污染。A属于灭菌；B属于消毒；C、D都是实验操作过程中防止杂菌污染的措施，与灭菌无关。答案 A二、非选择题（共3小题，共50分）11. （16分）（济南模拟）白僵菌高抱粉是

8、国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一, 应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生抱子在寄主表皮、气孔或 消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几 丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄 主体内的养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和抱子，布满虫体全身。 请根据上述材料回答下面的问题。(1) 从自然菌样中筛选较理想的生产用菌种的一般步骤是：采集菌样一富集培养T 性能测定。白僵菌的菌样应从 中米集。(2) 分离白僵菌菌种的培养基属于养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于 营养物质)。(3) 白僵菌纯化培养常用的接种方

9、法是 和。(4) 分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行 理，利用高温可以使微生物的 等物质发生变性。解析(1)富集培养后，需进行纯种分离。(2) 筛选目的菌株需制备选择培养基。(3) 进行纯化培养的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法。(4) 培养基和接种工具需进行灭菌处理；高温可导致蛋白质和核酸变性。答案(1)纯种分离感病昆虫(2)选择碳源(3)平板划线法稀释涂布平板法(4)灭菌 蛋白质和核酸12. (14分)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某 研究小组依照下列实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1上壤悬浮液 I号培养基IT号培养基D【

10、号培养基表1培养基的组成液体锂伞甘 培养基蛋白 胨/g牛肉 膏/g氯苯/mg氯化钠/g硝酸铵g无机盐(无碳)蒸馏 水/LI号10555一一1U号一一5053适量1川号一一20 8053适量1请分析回答下列问题:配制U号固体培养基时，除添加U号液体培养基成分外，还应添加1%的(2) 培养基配制时，灭菌与调 pH的先后顺序是 。(3) 从用途上来说，1号培养基和U号培养基分别属于 养基和 养基。 在U号培养基中，为 SP1菌提供氮源的成分是 (4) 在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为。*菌体数厂80嗣I飆苯5020 m对L氯苯培养时间/h(5) 将SP1菌接

11、种在含不同浓度氯苯的川号 培养液中培养，得到生长曲线如右图。由右 图可知，SP1菌在养条件下最早停止生长，其原因是 。解析 固体培养基中除添加营养成分外，还需要加入一定量的凝固剂，如琼 脂；细菌培养的基本过程：配制培养基(称量f溶化f调pHf分装f加棉塞 包扎)f灭菌f搁置斜面f接种f培养(25 C下57 d或37 C下24 h)。根 据培养基的用途可分为基础培养基、选择培养基和鉴别培 养基等, 题中I号培养基属于基础培养基，由于U号培养基中的碳源仅是氯苯，因此，培养基 属于选择培养基。U号培养基中仅硝酸铵含有氮元素，因此，它是该培养基 中的氮源。细菌的休眠体是芽抱。根据曲线图可知，氯苯浓度为

12、20 mg/L时, 菌体数量最先减少，最可能是由于氯苯(碳源)被耗尽。答案琼脂(2)先调pH，后灭菌基础选择硝酸铵芽抱(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗尽13. (20分)急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致 的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措 施，请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1) 检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同 稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为 如图所示的四种菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是。ABCD(2) 用该方法统计样本菌落数时是否需

13、要设置对照组？ 。为什么?(3) 如分别取0.1 mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为。(4) 已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨 培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？解析纯化大肠杆菌的方法一一稀释涂布平板法和平板划线法。删除偏差太 大的数据，对剩下的多个培养数据进行平均处理就可以得到水样中的大肠杆 菌数。大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，通过密圭寸培养，大肠杆菌可以进行 无氧呼吸产生气体，以气泡的形式释放出来。答案(1)稀释涂布平板法 D

14、 (2)需要因为需要判断培养基是否被杂菌 污染(培养基灭菌是否合格)(3)5.6X 108 (4)通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌 的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37 T恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌(时间：45分钟满分：100分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难培养基的成分、类型及配制2、36、 9、 11接种与无困技术1、10利用选择培养基分离微生 物5、7813测定微生物的数量412一、选择题（共10小题，每小题5分，共50分）1 .下列常用的无菌操作中，错误的是（）A. 无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌B

15、. 用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒C. 实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D. 玻璃器皿（吸管、培养皿）可用酒精擦拭解析 本题考查微生物培养过程中的无菌操作，应从无菌操作的概念和基本 方法入手解答，对于不同的对象要用不同的消毒或灭菌方法。无菌技术是用 来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，而不是杀死培养基中的一切 细菌。对操作者应用较温和的方法进行消毒。实验操作过程应在酒精灯火焰 附近进行，防止瓶口的微生物污染培养基。对无菌操作用到的玻璃器皿要用 干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。答案 D2. 下列有关培养基配制原则表述正确的是（）A. 任何培养基都必须加

16、入碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子B. 碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素C. 微生物的生长除受营养因素影响外，还受 pH、氧、渗透压的影响D. 固体培养基一定需要加入琼脂解析 有些微生物能利用无机环境中的碳源、氮源，有些能自己合成生长因 子，所以培养这些微生物时培养基中可不加入碳源、氮源、生长因子等，如 培养自养型微生物的培养基中可不加碳源。培养基中的碳源、氮源需要有一 定的比例，碳源一般是微生物需求量最大的营养成分，但有些培养基可不含 碳源或氮源。固体培养基是在液体培养基中加入凝固剂而制成的，但琼脂不 是唯一的凝固剂。答案 C3. 下表为某种培养基的配方，根据表格

17、可以判断出（）成分含量/g成分含量/gK2HPO42(NH4)2SO41.4MgS04 7H2O0.3CaCl20.3纤维素粉20琼脂20蒸馏水1 000 mLpH5.5A. 此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种B. 此培 养基 因原料来源广泛，可用于工业生产C. 此培养基可以用来筛选自生固氮菌D. 此培 养基 中含有微生物所必需的五类营养要素解析 此培养基中以纤维素粉为唯一碳源，所以可以用来筛选生产纤维素酶 的菌种，培养基含有铵盐，不能用来筛选自生固氮菌；培养基中含有水、无 机盐、碳源、氮源四类营养要素。工业生产一般用天然培养基。答案 A4. 用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目， 其结

18、果与实际值相比（）。A. 比实际值高B.比实际值低C.和实际值一致D .比实际值可能高也可能低解析培养基上的一个菌落也可能由相连的两个或多个菌体繁殖而来，因此统计的活菌数要少于菌体实际数目。答案 B5. 从土壤中分离获得某种微生物的步骤是（）。土壤取样梯度稀释选择培养涂布培养筛选菌株A. B.C.D .解析 从土壤中分离获得某种微生物的步骤为：土壤取样 一选择培养一梯度 稀释f涂布培养f筛选菌株。答案 B6. 对纤维素分解菌进行选择培养时，用液体培养基的原因是（）。A. 用液体培养基可获得大量菌体B. 纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C. 在液体培养基中纤维素分解菌繁殖速度更快D. 用液体培

19、养基可获得高纯度的纤维素分解菌第11页共14页解析 纤维素分解菌在固体培养基上也能大量繁殖，也能获得大量菌体。液 体培养基中各种菌株混杂在一起，很难得到高纯度的纤维素分解菌。在对纤 维素分解菌进行选择培养时，用液体培养基的目的是在液体培养基中纤维素 分解菌繁殖速度更快。答案 C7分离土壤中纤维素分解菌用到的方法是( )稀释倒平板法 涂布平板法 单细胞挑取法 选择培养基分离A B.C D 解析 分离土壤中纤维素分解菌时，先进行选择培养，增大纤维素分解菌的 浓度，即富集培养，梯度稀释后涂布平板培养，最后单细胞挑取以获得纯培 养。答案 B8. 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的

20、菌落数就能 推测出样品中的活菌数。 原因是 ( )A. 平板上的一个菌落就是一个细菌B. 菌落中的细菌数是固定的C. 此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D. 此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同解析 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，平板上的一个菌落一般 来源于样品稀释液中的一个活菌，但偶尔也能来自两个或多个细菌，所以此 方法统计的菌落数可能与活菌的实际数不相同。答案 C9. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是()A. 计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B. 计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C. 计算、称量、溶化、火菌、倒平板D. 计算、称量、灭菌、溶化、倒平板解析 制备牛肉膏

21、蛋白胨固体培养基，应先根据需要计算各成分用量，然后 称量、溶化、灭菌、倒平板。答案 C10下列关于微生物分离和培养的叙述， 错误的是 ()。A. 微生物培养前，需对培养基进行消毒B. 测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C. 分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D. 分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析 微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中 的细菌数目，常用菌落计数法而一般不用活菌计数；分离土壤中不同的微生 物，要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落在30300间的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源。答案 A

22、二、非选择题 (共3小题，共 50分)11(20 分)某学校打算开辟一块食用菌栽培基地， 以丰富学生的劳动技术课内容。 首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料 和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题。(1) 对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料： 、。其中提供氮源的是 ；提供能源的主要物质是 。(2) 微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，故制培养基时各成分要有合适的。在烧杯中加入琼脂后要不停地 ，防止。(3) 将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干个试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入 中灭

23、菌，压力kPa,温度，时间。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到 0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培 养基， 此试管 。(4) 使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入 ，把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5) 从一支试管向另一支试管接种时注意， 接种环要在酒精灯 (“内”或“外” )焰灭菌，并且待接种环 后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近，将接种的试管放入 C冰箱中保藏。答案 (1)牛肉膏 蛋白胨 水 无机盐 琼脂 蛋白胨、牛肉膏 牛肉膏 (2)比例 搅拌 琼脂糊底引起烧杯破裂第 13 页 共 14 页(3) 高压蒸汽灭菌锅100 121 T 1530 min 废弃

24、(4) 适量水外冷却 412. (10分)下图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程，据此回答有关问题。土壤取样梯度稀释将样品接种到鉴别纤维 素分解菌的培养基I：(1) 要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明(2) 在将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基之前，可通过选择培养基增加纤维素分解菌的浓度，某同学根据需要配制了纤维素分解菌的培养基如下表。整个实验过程严格无菌操作，如果将其中的纤维素粉换成 乍为对照组，菌落数，即可说明选择培养基的作用。成分含量/g纤维素粉5NaN031Na2HPO4 7H2O1.2KH 2PO40.9MgS04 7H2O0.5KCI0.

25、5酵母膏、水解酪素0.5蒸馏水1 000 mL(3)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，本实验宜采用 ，原因是0_ 解析 在寻找目的微生物时要根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环 境中去寻找；微生物的选择培养就是根据微生物的不同特点，在培养基中加入某些物质，允许一部分微生物的生存，而抑制另一部分微生物的生长。在 本实验中，由于只有纤维素分解菌才能利用培养基中的纤维素，因此只含有 纤维素粉的培养基为选择培养基，而葡萄糖是许多微生物都能利用的碳源， 因此通常用葡萄糖来配制完全培养基，在选择培养基上生长的微生物种类少，菌落数就少；微生物的分离的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，因 为两种方法都能使菌体分散到培养基的表面，但是平板划线法不能确定接种 量，而稀释涂布平板法可以确定接种量，因此平板划线法不能根据稀释液体 积计算每克样品中的菌株数。答案(1)根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找(2) 葡萄糖明显多于选择培 养