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文档简介
1、DNA 的粗提取与鉴定、教学目标1. 知识与技能理解DNAfi提取与鉴定的原理通过尝试对植物或动物组织中的 DNA进行粗提取,了解DNA勺物 理化学性质。初步掌握DNA勺粗提取与鉴定的方法。2. 过程与方法利用DNA性质,通过小组讨论设计实验方案,培养学生的小组合 作意识,训练学生科学设计实验过程 ,通过学生自己动手进行实验 , 发现并纠正方案中的缺点 , 进一步 提升科学思维能力。3. 情感、态度和价值观通过对DNA勺粗提取的实验过程的设计与操作,锻炼科学的思维 方式, 培养学生事实求是的科学态度。二、学情分析以往实验都是老师设计好实验步骤 , 学生按步骤做 , 但是做完后 学生基本没有印象
2、。生物学科考察的是学生获取信息 , 处理信息的能 力。而DNA粗提取与鉴定涉及的试剂种类比较多,步骤繁杂,而我们的 学生自己不设计实验 , 根本不知道这步骤为什么是这样做。为了改变 此现象,也是为了培养学生阅读课本并从中提取信息 ,处理信息的能 力,在这里先进行分组讨论 ,设计实验方案 ,而后进行实验 ,学生分析实验存在问题。这样可以培养学生的动手能力和分析能力 三、重点难点1. 教学重点(1) 实验方案设计 , 理解每一步骤的原理。(2)掌握DNA勺粗提取和鉴定方法2. 教学难点DNA勺粗提取和鉴定方法四、教学过程【复习引入】学生思考问题 :(1) 构成生物体勺遗传物质是什么 ?(生: 生物
3、体勺遗传物质是 DNA 或 RNA)(2) 如何证明他们是遗传物质 ?( 生 : 肺炎双球菌勺转化实验、 噬菌 体侵染细菌勺实验 )问:DNA是遗传物质,那我们怎样才能将细胞内的 DNA分离出来? 这就涉及到DNA和蛋白质技术。这节开始我们就来学习专题 5DNA 和蛋白质技术,首先我们来学习课题1DNA粗提取与鉴定。一、基础知识( 一) 提取方法学生阅读课本并思考 :1. 提取生物大分子勺基本思路是什么 ?2. DNA主要与哪些生物大分子分离?DNA主要与蛋白质分离,那么怎么分离这两者呢?这就要看看他们在不同浓度的 NaCl 的溶解度不同而达到分离目的。请同学们看图5-1DNA在NaCI溶液中
4、的溶解度曲线,思考问题:1、在什么浓度下,DNA的溶解度最小?DNA在NaCI中的溶解度是 如何变化的 ?学生:在NaCI溶液浓度小于0.14mol/L时,DNA的溶解度随NaCI 溶液浓度的增加而逐渐降低;在0.14moI/L时,DNA溶解度最小;当溶 液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大。2、如何通过控制NaCI溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?学生:当NaCI的物质的量浓度为2moI/L时,DNA的溶解度最大, 浓度为0.14moI/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使DNA 在盐溶液中溶解或析出。教师小结 :1、DNA在 0.14moI/LNaCI溶液中溶解度最低
5、而蛋白质此时的溶解度最高的特点,可以使DNA与蛋白质分离,形成沉淀析出,通过过滤, 得到初提取的滤出物 DNA。2、利用DNA不溶于酒精,细胞中的某些蛋白质可溶于酒精的特点, 可以将DNA与蛋白质进一步分离。3、蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不 能忍受60-80 C的高温,而DNA在 80 C以上才会变性(蛋白质变性 后溶解度降低而产生沉淀 )。洗涤剂能够瓦解细胞膜 (脂质), 但对 DNA 没有影响(在植物材料中提取DNA使用)( 二) 检验原理 :1、DNA遇二苯胺(沸水浴)呈蓝色2、甲基绿与DNA吉合,呈绿色二、实验设计( 一 ) 实验材料的选取我们知道了通过一定
6、的方式可以是 DNA和蛋白质分离,那么什么 样的材料适合提取DNA呢?是不是所有的生物细胞都可以呢?生:应该是DNA含量较高的生物组织,提取成功的可能性较大。 思考: 以下的生物材料 , 你会选哪一种 ?为什么 ?鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、猪血红细胞、猕猴桃、洋葱、 菠菜、在液体培养基中培养的大肠杆菌。在学生回答时及时引导学生分析一些细胞不能用的原因。( 二 ) 实验方案老师: 这里准备了鸡血细胞 , 请同学们按小组讨论设计出实验方 案, 每一组派一名代表展示本组实验方案。注意 :1 、理解每一步骤根 据的原理。 2、设计实验时要确定每一步骤需要试剂及用量。学生分组讨论 , 教师巡视 ,
7、发现问题及时纠正、解决 , 特别注意试 剂用量上。学生分组展示实验方案 , 并回答其他组的成员的提问质疑。师:我们知道了从鸡血细胞中提取到 DNA勺实验过程,如果给你 的材料是花椰菜 , 那还能不能用加蒸馏水使细胞破碎来提取 DNA 呢?(生: 不能) 那怎么才能提取到 DNA?学生阅读课本,讨论回答:花椰菜30g+洗涤剂+食盐搅拌研磨-过滤-加入嫩肉粉,反应10-15分钟-加体积分数为95%勺冷酒精问: 洗涤剂和食盐的作用分别是什么 ?生:洗涤剂能够瓦解细胞膜,有利于DNA勺释放。食盐的作用有利 于DNA的溶解。问 : 如果研磨不充分 , 会对实验结果产生怎样勺影响 ?生:研磨不充分核内的D
8、NA释放不完全,提取的DNA量少,会影响 实验结果 , 可能看不到丝状物。讨论: 方案二与方案三的原理有什么不同 ?方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质 分开;方案二利用了酶的专一性;方案三利用的是DNA和蛋白质对高 温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离。方案三利用了 DNA 的稳定性。( 三 ) 课堂小结 :本节课我们学习了 DNA粗提取的原理,根据DNA蛋白质等在不 同浓度的NaCI的溶解度不同,通过控制盐溶液浓度使DNA充分溶解而 杂质沉淀,或者相反,而达到分离目的。利用DNA不溶于酒精,细胞中 的某些蛋白质可溶于酒精的特点,可以将DNA与蛋白质进一步分离
9、。不同的实验材料提取的DNA方法不同,植物细胞可以用洗涤剂加 食盐充分研磨 , 动物细胞则利用细胞吸水涨破原理获得核物质。具体 的实验操作我们下节课在进行。三、板书设计课题1DNA勺粗提取与鉴定、实验原理二、实验步骤1、破碎细胞 , 释放 DNA2、去除滤液中的杂质(1) 溶解细胞核内的 DNA(2)DNA 的析出3. DNA的初步纯化4. DNA的鉴定四、巩固练习 :1、在制备鸡血细胞液的过程中 , 加入柠檬酸钠的目的是 ()A. 防止凝血B.加快DNA析出C.加快DNA溶解D.加速凝血2、DNA的溶解度最低时,NaCI的物质的量浓度为()A.2mol/lB.0.1mol/lC.0.14moI/ID.0.015moI/I3、在向溶解DNA的NaCI溶液中,不断加入蒸馏水的目的是()A. 加快DNA溶解的速度B. 加快溶解杂质的速度C. 减小DNA的溶解度,加快DNA析出D. 减小杂质的
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