中图版选修3第1单元第2章第3节细胞融合技术教案

1、第三节细胞融合技术1 举例说出细胞融合技术。2.简述单克隆抗体的制备过程。一、细胞融合技术1 .杂父细胞当两个细胞紧密接触时，在适当条件下，其细胞膜可能融合在一起,产生具有原 来两个细胞遗传信息的细胞，称为杂交细胞。2. 细胞融合两个或两个以上的同种或异种细胞融合成一个细胞的过程，叫做细胞融合。(1) 原理：膜的流动性。(2) 过程：不同动物的两个体细胞杂交细胞。(3) 诱导细胞融合的方法：聚乙二醇诱导、灭活的病毒诱导、电融合法等。二、细胞融合与单克隆抗体1. 单克隆抗体源自一个B淋巴细胞的克隆所产生的抗体只会特异性地作用于一种抗原决定簇,我们将这种抗体称为单克隆抗体。2. 单克隆抗体的制备过

2、程效应B淋巴细胞骨髓瘤细胞筛选分泌特定抗体的杂交瘤细胞仝小鼠体内培养 体外培养单克隆抗体口(2) 杂交瘤细胞的特点：既能在体外培养条件下快速生长和无限增殖，又能产生和分 泌特异性抗体。(3) 单克隆抗体的特点：理化性质单一、与抗原结合的特异性 _思考 治疗癌症时，能否让治疗癌症的药物只杀死癌细胞，而不损伤正常细胞？ 提示：把抗癌细胞的单克隆抗体与药物相结合，制成“生物导弹”，注入体内， 借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。三、细胞融合与作物育种1. 植物体细胞杂交植物体细胞杂交是指将两个来自不同种植物的体细胞在一定条件下融合成一个杂交细 胞，并且把杂交细胞

3、培养成新的植物体的方法。2. 获得原生质体的常用方法一一酶解法在温和的条件下用纤维素酶、果胶酶等分解植物细胞的细胞壁。3. 诱导原生质体融合原生质体融合包括细胞膜融合T细胞质融合T细胞核融合。m4. 细胞融合技术的意义细胞融合技术可以避免受精过程,在亲缘关系较远的物种间实现基因转移，创造出自然界没有的新物种。1 植物体细胞杂交技术的原理、过程及应用（1）原理：依据细胞融合的生物学原理，即细胞膜的流动性组织培养（2）过程及分析。原生质体在融合过程中可能出现多种融合方式，进而形成不同的杂交细胞，因此应进行筛选。资杂交细胞形成的标志是细胞壁的再生，此过程与高尔基体等细胞器有关。 植物体细胞杂交的结果

4、是获得杂种植株，整个过程包括细胞融合和植物组织培养两个阶段。 杂种植物之所以具有两个亲本性状的根本原因在于其体内含有两个亲本的遗传物质。（3）应用：可突破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，实现不同物种间遗传物质 的重组，从而获得异源多倍体。.-aaiuMMiaiBiaiEiuuuiai转别提噩r/ 杂种植株的染色体组数是用于杂交的两种植物细胞染色体组数之和。 获得的杂种植株是否可育， 与杂种植株所含染色体组数有关。若为偶数倍染色体组数，理论上是可育的；若为奇数倍染色体组数，理论上是不可育的。若杂种植株是可育的，则已形成新的物种。2 植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别细胞融合原理细胞融合方法诱

5、导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性除去细胞壁后诱 导原生质体融合离心、电刺激、聚 乙二醇等试剂诱导避免受精过程，在 亲缘关系较远的物 种间实现基因转 移，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后，诱 导细胞融合离心、电刺激、聚 乙二醇、灭活的仙 台病毒等诱导制备单克隆抗体等3.植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备的比较植物体细胞杂交（培育马铃署杂种植株）动物细胞融合（制备单克隆抗体）第步原生质体的 制备（酶解 法）切01 1癌变小fcl |宣二、抗康注射 亠专正常小鼠f*正常小鼠 的免疫处理过程第步原生质体的 融合细胞A乙馮i淋巴细胞动物细胞第杂交细胞的）杂左瘤细胞的融合步筛选和培养

6、丙杂交 U细胞I （A-B）I饰选第杂种植株的1 F杂交瘤细四鉴定（分析( 1胞的筛选步染色体有无和培养丢失）提纯单克 隆抗体原理（理 论基 础）细胞膜的流动性、细胞增殖细胞膜的流动性、细胞的全能性融合刖 的处理酶解法除去细胞壁。所用的酶是纤维素酶、果胶酶注射特定抗原法免疫处理正常小鼠促融 方法 物理方法：电刺激、离心、振动等； 化学方法：用聚乙二醇（PEG等诱导物理方法：电剌激、离心、振动等； 化学方法：用聚乙二醇等诱导；生物方法：用灭活的仙台病毒诱导资*源刃汇猱由于B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合方式有多种，因此第一次 筛选的目的是选出杂交瘤细胞，淘汰掉未融合的或同种细胞融合的细胞。由于从小鼠

7、体内提取的 B淋巴细胞可能有多种，因此第一次筛选出的杂交瘤细胞可能有多种，通过克隆化培养和抗体检测进行第二次筛选，以选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。颌悟XING LI TI LING WU题型一隆抗体的制备【例1】制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（）细胞培养 细胞融合胚胎移植 细胞核移植A.B . C . D .解析：单克隆抗体的制备属于细胞工程范畴，主要包括细胞融合和细胞培养两大技术。答案：A反思领悟：动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖，又能产生和分泌特异性抗体；单克隆抗体的特点是特异性强、理化性质单一。题型二 单克隆抗体的应用【例2】单克隆抗体技术在疾

8、病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列 关于单克隆抗体的叙述，错误的是（）A. 单克隆抗体的特异性强、理化性质单一B. 单克隆抗体与抗癌药物结合可制成“生物导弹”C. 体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D. 单克隆抗体是由效应 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌的解析：单克隆抗体具有特异性强、理化性质单一等特点。可以与抗癌药物结合制成“生 物导弹”。答案：C题型三植物体细胞杂交【例3】植物体细胞杂交的过程是（）A. 用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体B. 以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合C. 用植物组织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株D. 通过以

9、上三者来完成解析：植物体细胞杂交的过程实际上是不同植物体细胞原生质体融合的过程，融合后形成的杂交瘤细胞进一步经组织培养形成杂种植株。答案：D反思领悟：首先用纤维素酶、 果胶酶去掉植物体细胞的细胞壁，获得原生质体，然后利用物理或化学方法诱导原生质体融合，形成杂交细胞，最后通过植物组织培养获得杂种植株。1植物细胞工程中，当原生质体融合成一个细胞后，需要诱导出细胞壁，参与这一过 程的细胞器是（）A. 叶绿体、内质网B .线粒体、叶绿体C.线粒体、内质网D .线粒体、高尔基体 解析：细胞壁的形成与线粒体、高尔基体有关。答案：D2要获得一个杂种植株需要下列哪些步骤（）A分离原生质体t诱导原生质体融合t组织培养t得到杂种植株B. 分离原生质体t原生质体t杂种植株C. 获取细胞T原生质融合T组织培养T杂种植株D. 获取细胞T原生质融合T组织培养解析：获得一个杂种植株首先要分离得到原生质体，再诱导原生质体融合， 最后通过组织培养获得杂种植株。答案：A3科学家用小鼠骨髓瘤细胞与 B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量 的单克隆抗体，所用的 B淋巴细胞来自（）A. 骨髓的B淋巴细胞B. 脾脏的能产生抗体的 B淋巴细胞C. 胸