细菌的营养与生长繁殖

1、细菌 生长,细菌 繁殖,第二节 细菌的营养与生长繁殖第三节 细菌的新陈代谢,第二节 细菌的营养与生长繁殖,1. 细菌细胞的化学组成 2. 细菌所需的营养物质 3. 吸收营养物质的方式 4. 细菌的营养类型 5. 细菌的生长繁殖（掌握） 6. 细菌的人工培养（熟悉,营养物质（nutrient）：细菌生长繁殖、进行生理活动所需的物质，是细菌生存的重要物质基础。 营养（nutrition）：获得和利用营养物质的过程，是细菌维持和延续其生命形式的一种生理过程,一、细菌细胞的化学组成,1.化学元素（chemical elements,mainly elements,trace elements,chem

2、ical elements,C、H、O、N、S、P 结构组成 Na、K、 Ca 渗透压、电势 Mg、Fe、Mn 辅酶,2、化学组分(chemical components,脂类 结核分枝杆菌含量高（） 特有成分 肽聚糖 、磷壁酸、吡啶二羧酸,二、细菌需要的营养物质,营养物质 nutrient,碳源 carbon source,氮源 nitrogen source,无机盐 inorganic salt,生长因子 growth factor,水 water,1.碳源：合成菌体的必需原料，获取能量的来源 无机碳源和有机碳源 各种有机碳源中，容易被细菌吸收的是糖类物质 如：葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖、

3、甘露醇等 2.氮源：合成菌体蛋白（结构、功能）、核酸 无机氮源、有机氮源和氮气分子 大多数利用前两种 固氮菌有固氮作用，可以借助特殊的酶将分子 态的氮转化成氨和其他氮化物,3.无机盐：细胞生长必需的各种金属元素及微量元素 酶或辅酶的组分 调节酶活性 调节胞内渗透压、氧化还原电位 特殊类型细菌的能源 维持生物大分子和细胞结构的稳定性,4.生长因子：菌体自身不能合成或合成量不足,需要外源 加入的、微量即可的营养物质。 如：维生素、 氨基酸等 营养缺陷型细菌 流感嗜血杆菌需 X（高铁血红素）, V因子（辅酶或） ，而金葡可产生， 两者共培养时出现卫星菌落现象 5.水：菌体重要成分 功能 细胞组分、溶

4、媒、参与代谢、适宜反应温度的保障、维持大分子构象稳定,三、吸收营养物质的方式,借助细胞壁和细胞膜的结构和功能完成,营养物质 运输方式,简单扩散,基团转移,促进扩散,主动运输,四、细菌的营养类型,按照碳源、能源及电子供体性质的差异分类,营养 类型,光能营养型,化能营养型,光能自养型,光能异养型,化能自养型,化能异养型,腐生型,寄生型,五、细菌的生长繁殖,一）细菌生长繁殖的条件,主要环境因素：营养物质、温度、pH值、氧气等,1.营养物质：提供原料、能量 2.酸碱度：即pH值 细菌细胞借此调节胞膜的状态 以保证酶促反应的进行 大多数细菌的最适pH值是6.8-7.4 特殊 如：偏酸性的结核杆菌， PH

5、为6.5-6.8 偏碱性的霍乱弧菌，PH值为8.8-9.0,3.温度：对细菌的生长速度影响最大 致病菌 一般 37，过高杀菌，过低抑菌 细菌以此分为： 嗜冷菌：5 -30 最适10 -20 嗜温菌: 10 -50 最适30 -37 嗜热菌： 25 -80 最适50 -60 4.气体： CO2 O2 CO2 : 少数细菌初次分离培养需5-10% CO2 获得方法：烛缸法、 CO2培养箱,O2 : 代谢时对氧分子的需求程度不同分为： 需氧菌 ：有完善的呼吸酶系统，仅在有氧时生长， 如：结核杆菌 微需氧菌：低氧分压时长势良好，过高则抑制， 如: 空肠弯曲菌 耐氧菌：一般不需要O2 ， O2 存在也影

6、响不大 如：乳酸菌,兼性厌氧菌 ： 兼有需氧呼吸和无氧发酵两种功能，有无 O2 的环境下皆可生长，但以有氧时生长态 势较好，大多数病原菌都属此类 专性厌氧菌： O2对其生长有毒害作用，如：破伤风梭菌 专性厌氧菌在有氧条件下不能生长的原因： 缺乏细胞色素和细胞色素氧化酶 不能获得营养物质 缺乏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶超氧阴离子、过氧化 氢的毒害作用 超氧化物歧化酶_生成H2O2 过氧化物酶_分解H2O2,二）细菌的繁殖方式,细菌多无性繁殖 细菌以简单的二分裂方式进行繁殖，繁殖一代所需时间约2030 min；但少数细菌代时较长， 如: 结核分枝杆菌代时为18h-24h,六、细菌的人工培养,一）培

7、养基(medium) 人工配制的满足细菌及其他微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,配制注意事项,培养基的类型 按主要营养物质的来源：天然培养基和合成培养基 按物理状态：固体、液体、半固体培养基 按用途：基础培养基 营养培养基 选择培养基 鉴别培养基 厌氧培养基,二）细菌的培养方法及生长现象 1.固体培养法：细菌的分离、纯化、鉴定、保存、计数 2.液体培养法：收集菌体、获得发酵产物、菌种鉴定 3.半固体培养法：观察运动、保种、测定生化反应 4.厌氧培养法：厌氧菌的培养,细菌在固体培养基中的生长情况,液体培养基中,沉淀生长,混浊生长,表面生长,混浊生长,沿穿刺线生长,无鞭毛细菌,半固体培养基中

8、,有鞭毛细菌,三）细菌的生长繁殖规律 生长曲线,生长曲线（growth curve） 描述细菌群体在整个培养期间的菌数变化规律 的曲线。典型的生长曲线可分为延迟期、对数期、 稳定期和衰亡期,2、细菌群体的生长繁殖 迟缓期 (lag phase): 适应、活化期 对数期 (log phase)：迅速生长期，典型性 稳定期 (stationary phase)：新生、死亡平衡特征产物积累期 衰亡期 (decline phase)：营养少，代谢物蓄积，菌体死亡,细菌群体的生长曲线（growth curve） 以此指导对细菌的研究和生产实践,四）细菌生长量的测定,测定依据：细菌的数目、重量及生理指标

9、1.计数法：直接计数、间接计数、比浊法 2.重量法：湿重法、干重法 3.生理指标法：呼吸强度、耗氧量、酶活性等,复习题目,1.营养； 营养物质； 培养基； 生长曲线 2.专性厌氧菌在有氧环境下不能生长的原因。 3.试述细菌群体生长繁殖的规律。 4.细菌生长量的测定方法有哪些,第三节 细菌的新陈代谢,细菌的新陈代谢(metabolism)是指菌体细胞内分解代谢与合成代谢的总和，其显著特点是 代谢旺盛和代谢类型的多样化 比表面积（表面积/体积）： 人0.024 细菌5000 名词： 分解代谢 (catabolism) 合成代谢 (anabolism,细菌的酶,存在部位 产生方式 专一性 限制与修饰

10、系统,1、能量的代谢 主要以糖类为底物，通过氧化或酵解释放 能量，并以高能磷酸键的形式（ADP、 ATP）储存起来。 具体的产能方式及其途径如下,1）糖分解 A、EMP（糖酵解） 1G2丙酮酸2（NADH+H+）+ 2ATP B、磷酸戊糖途径（一磷酸己糖途径） 1己糖1甘油醛- 6（ NADPH+H+ ）+ 3CO2,P,2）需氧呼吸： EMP三羧循环电子传递链（呼吸 酶系） 1G CO2 + H2O + 38ATP （3）发酵 1G 乳酸2ATP,2、细菌的代谢产物： 分解产物与合成产物 （1）分解代谢产物和细菌的生化反应 细菌的生化反应实验： 酶系不同 对底物分解能力不同 最终代谢产物不同

11、,对糖的分解： 需氧 TCAC：CO2、H2O 多糖 胞外酶 单糖 丙酮酸 厌氧 酸、醛、醇等,对蛋白质的分解： 脱氨基酶 NH3 +酸 Pr.胞外酶 短肽、AA 脱羧基酶 胺+CO2,常见的生化反应,对 糖 的 发 酵,对 蛋白质的发酵,枸橼酸盐利用试验,尿素酶试验,甲基红试验,吲哚试验,硫化氢试验,单糖发酵试验,VP试验,其他试验,糖发酵： 单糖 甲酸 CO2 + H2O,硫化氢试验： 胱氨酸 醋酸铅 硫化铅 硫化氢 甲硫氨酸 硫酸亚铁 硫化亚铁,尿素酶试验： 尿素尿素酶 氨 （酚红指示剂变红,吲哚试验（霍乱红反应） ： 色氨酸 靛基质 + 对二甲基氨 玫瑰靛基质 （吲哚） 基苯甲醛 （红

12、色,糖发酵试验,不同细菌分解 糖类的能力和 代谢产物不同。 乳糖：大肠 埃希菌可分 解，而致病 性肠道杆菌 则不能,糖VP试验,大肠杆菌：- 产气杆菌：,二分子丙酮酸 + 乙酰甲基甲醇 二乙酰 胍基化合物 （红色沉淀,大肠杆菌：+ 产气杆菌,产气 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基 甲醇中性 PH5.4,甲基红试验,枸橼酸利用试验,大肠杆菌： 产气杆菌：,枸唯一碳源， 铵N源，生氨，碱性，为阳,吲哚试验,大肠杆菌：+ 产气杆菌,H2S试 验,乙型副伤寒沙门 氏菌和变形杆菌,含硫氨基酸,硫化氢,遇铁或铅,硫化物,尿素酶试验,变形杆菌 （尿素酶,尿素,氨（碱性,辅助鉴定细菌、诊断传染病 1、分解糖产物 (1

13、) 糖发酵试验：此类菌具有脱氢酶，可分解 多糖、单糖产生多种酸和气体 (2)甲基红试验： （3）VP试验,2、 分解蛋白： 吲哚试验、硫化氢试验 3、枸橼酸盐利用试验 吲哚（I）、甲基红（M） 、VP （V） 、 枸掾酸盐利用（C）四种实验常用于鉴定 肠道杆菌，合称为IMViC实验。 以上示例中可知： 大肠杆菌： “ ” 产气肠杆菌：“ ” 4、尿素酶试验,I M Vi C试验 大肠埃希菌 + + - - 产气杆菌 - - +,2）合成代谢产物,A 、具致病作用 1 、热原质(pyrogen) G的内毒素（脂多糖）；G的外毒素 致热性 发热 耐热性 180 4h 250 30min 去除方法：干烤、过滤吸附,2、侵袭性酶：透明质酸酶、血浆凝固酶 卵磷脂酶、链激酶、 DNA酶 3、毒素 G是内毒素（脂多糖）；G是外 毒素 如破伤风痉挛毒素，肉毒毒素,1.合成产物：