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文档简介
1、影响血液凝固的因素 1 实验目的1. 学习家兔的基本手术操作2. 观察血液凝固现象3. 了解血液凝固的基本过程4. 观察某些因素对血液凝固的影响2 实验材料1. 实验动物 家兔2. 器材与药品 哺乳动物实验动物手术器械一套,清洁小试管6支,水浴装置1套,冰块,棉花、液状石蜡,肝素,草酸钾,肺组织悬液,生理盐水等3 实验方法和步骤1. 动物手术 (1)将家兔称重后,按5ml/kg的剂量自耳缘静脉缓慢注射20%乌拉坦(2) 麻醉完成后将家兔以仰卧位固定于兔手术台上,将颈部被毛用粗剪剪去(3) 在颈部腹面正中从甲状软骨水平至胸骨上缘(约一指)连线正中做一长57cm的纵形切口,依次钝性分离皮下组织、肌
2、肉及气管表面结缔组织直至暴露气管。(4) 分离一侧的颈总动脉,将颈总动脉游离23cm,穿双线备用。用其中一线结扎颈总动脉远心端,近心端用动脉夹夹闭。用眼科剪在颈总动脉靠近远心端结扎线处剪一斜口(约45度)将动脉插管向心脏方向插入动脉内约1cm,用另一线结扎,以备取血。(5) 分离气管,行气管插管术。2. 实验准备 准备好6个试管,并对人员进行分工。编号实验条件凝血所需时间分析讨论1加棉花少许2用液状石蜡润湿试管表面3置于37摄氏度水浴槽中保温4置于水浴槽中5加肝素8U 12滴(加血后摇匀)6加草酸钾1-2ml(加血后摇匀)7加肺组织悬液0.1ml对照不加3. 取血 打开动脉夹,经颈总动脉插管放
3、血入各试管中,每支试管采血约1ml。注意及时记录采血完成时间并将各试管尽快置于其实验条件下,5,6两支试管加入血液后要充分摇匀。4. 理化因素对血液凝固的影响及其结果观察接触面粗糙程度、温度以及试剂对血液凝固的影响 观察各试管内血液凝固所需时间。在每支试管采血完成后开始计时,每隔15s将试管轻轻倾斜1次,观察试管中的血液是否凝固,发现血液呈凝胶状不再流动时停止计时,以此得到各试管血液凝固所需时间。在本实验条件下,超过30min血液未凝可视为“不凝”。4 实验结果不同理化环境中血液凝固的时间编号实验条件凝血时间1234567对照管少许棉花液体石蜡润滑试管内表面37水槽中肝素8U2%草酸钾溶液1.
4、5ml肺组织液0.1ml16min 15s8min 45s23min 11s9min 37s55min 11s不凝6min 47s5 实验讨论注意事项:1. 采血时要一次性将全部试管采血完毕,多次放血可能导致动脉插管内血液发生凝固,阻塞插管。2. 各血管的采血量要大致相等。3. 观察液体石蜡润滑过的试管内的血液是否凝固时,要在倾斜试管的同时,用手指轻弹试管底部,以排除表面张力等因素造成的血液已凝固的假象。4. 草酸钾为结晶固体,加入血液后要充分混匀结果分析:石蜡能使试管表面光滑从而延长凝固时间。肝素主要是主要是通过与抗凝血酶结合引起抗凝血酶构型发生变化,加速凝血酶-凝血酶复合体形成而产生抗凝作用。草酸钾作用原理是溶解后解离的草酸根与血液中的Ca2+形成草酸钙沉淀,使Ca2+失去凝血功能,凝血过
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