气相色谱法测定食用酒中乙醇含量

1、实,验,一,气相色谱法测定食用酒中乙醇含量,一,实验目的,1,了解气相色谱仪的基本结构,2,学习和掌握使用氢火焰离子化检测器的基本,操作,3,掌握以内标法进行色谱定量分析的方法及特,点,4,学习气相色谱法测定乙醇含量的分析方法,二、实验原理,气相色谱法是一种高效、快速而灵敏的分离分,析技术,当液体样品由进样口注入后立即被汽化，并被,载气带入色谱柱，经过多次分配而得以分离的各,个组分逐一流出色谱柱进入检测器，随时间变化,而产生的电信号由记录仪得到气相色谱图。对气,相色谱图进行数学分析，即可对样品进行定性定,量分析,三、仪器与试剂,1,仪器：气相色谱仪、氢火焰检测器,FID,色谱柱、微量注射器、容

2、量瓶,10cm,3,色谱工作站、吸量管,2,5cm,3,2,试剂：无水乙醇,A.R,无水,n-C,3,H,7,OH(A.R,丙酮、食用酒,四、实验步骤,1,色谱操作条件,柱温,90,汽化室温度,150,检测器温度,130,N,2,载气）流速,40cm,3,min,H,2,流速,35cm,3,min,空气流速,400cm,3,min,2,标准溶液的测定,用吸量管准确吸取,0.50cm,3,无水乙醇和,0.50cm,3,无,水,n-C,3,H,7,OH,于,10cm,3,的容量瓶中，用丙酮定容,至刻度，摇匀。用微量注射器吸取,0.5L,标准溶,液，注入色谱仪内，记录各色谱峰的保留时间,t,R,和色

3、谱峰面积，求出以无水,n-C,3,H,7,OH,为标准物,的相对校正因子,3,样品溶液的测定,用吸管吸取,1.00cm,3,的食用酒样品和,0.50cm,3,的,内标物（无水,n-C,3,H,7,OH,于,10cm,3,容量瓶中,用丙酮定容至刻度，摇匀。用微量注射器吸取,0.5L,样品溶液，注入色谱仪内，记录各色谱,峰的保留时间,t,R,对照比较标准溶液与样品溶,液的,t,R,以确定样品中的醇，记录,C,2,H,5,OH,和,n-C,3,H,7,OH,色谱峰面积，求出样品中,C,2,H,5,OH,的,含量,实,验,二,气相色谱法测定生物柴油中脂肪酸甲酯,一、实验目的,1,了解气相色谱仪的基本构

4、造与一般使用方法,2,掌握气相色谱检测器的原理和操作,3,了解程序升温色谱法的操作特点,4,学会用气相色谱仪进行归一化法定量分析,二、实验原理,程序升温是指色谱柱的温度按照适宜的程序连续地随,时间呈线性或非线性升高。在程序升温中，采用较低,的初始温度，使低沸点的组分得到良好分离，然后随,着温度不断升高，沸点较高的组分逐一“推出”。由,于高沸点组分较快地流出，因而峰形尖锐，与低沸点,组分类似,在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定的保留时,间，而响应值与进样量成线性关系。当样品中所有组,分都能流出色谱柱，并能给出可以测定的信号时，可,以采用采用归一化法进行定量分析,归一化法只适用于样品中所有组分

5、都从色谱柱流出并,被检测器检出、且都在线性范围内、同时又能测定或,查出所有组分相对校正因子的样品,三、仪器与试剂,1,仪器,6890,型气相色谱仪；色谱柱,HP,innowax,毛细管色谱柱,30,0.25,0.25,；氢火焰离子化检,测器；微量注射器,2,试剂：生物柴油；正己烷,四、实验步骤,1,色谱操作条件：汽化室温度,280,检测器温,度,280,柱温采用程序升温：初始温度,170,保持,0.5min,以,5,min,的升温速率升至,200,然后以,15,min,的升温速率升至,240,保持,时间,5min,载气,N2,柱头压,60kPa,氢气,32mL,min,空气,320mL,min

6、,进样量,1,L,2,取一定量的生物柴油样品于,1mL,的容量瓶中,用正己烷定容后，在上述色谱条件下进行气相,色谱分析，记录下各色谱峰的保留时间和峰面,积,100,i,i,i,i,i,f,A,X,f,A,根据公式,1,计算各脂肪酸甲酯的百分含量,实,验,三,高效液相色谱法测定萘,一、实验目的,1,认识高效液相色谱仪,掌握高效液相色谱仪的,基本操作,2,掌握高效液相色谱法进行定性和定量分析的,原理,3,掌握外标法进行定量分析的方法,二、实验原理,在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定,的保留时间，而响应值与进样量成线性关系,外标法也叫标准曲线法,三、仪器与试剂,1,仪器,Shimadzu LC-

7、10ATvp,高效液相色谱仪,紫外吸收检测器,254mm,C,18,柱,25cm,4.6mm,微量注射器；超声波清,洗器,1,台；溶剂过滤器,1,套,2,试剂,甲醇：色谱纯；二次蒸馏水；萘,AR,级,四、实验步骤,1,色谱操作条件,色谱柱,C,18,柱,流动相：甲醇：水,80,20,流速,1mL/min,检测波长,254nm,柱温,40,进样量,20,L,2,标准溶液配制,3,样品溶液的配制,4,进样并记录色谱图,五、数据处理与分析,100,s,s,i,i,m,A,A,P,实,验,四,内标法测定联苯,一、实验目的,1,进一步熟悉高效液相色谱仪的基本构造与一,般使用方法,2,理解内标法的测定原理

8、和优点,3,初步学会设计色谱法进行样品测定的实验步,骤，并以萘为内标物测定样品中联苯的含量,二、实验原理,在一定的色谱操作条件下，每种物质有一定,的保留时间，而响应值与进样量成线性关系,内标法也叫内标标准曲线法,三、仪器与试剂,1,仪器,Shimadzu LC-10ATvp,高效液相色谱仪,紫外吸收检测器,254mm,C,18,柱,25cm,4.6mm,微量注射器；超声波清,洗器,1,台；溶剂过滤器,1,套,2,试剂,甲醇：色谱纯；二次蒸馏水；萘、联,苯,AR,级,四、实验步骤,1,色谱操作条件,色谱柱,C,18,柱,流动相：甲醇：水,90,10,流速,1mL/min,检测波长,254nm,柱

9、温,40,进样量,20,L,2,标准溶液配制,3,样品溶液的配制,4,进样并记录色谱图,五、数据处理与分析,100,i,is,is,i,is,is,i,i,A,A,m,m,m,m,A,A,P,实,验,五,常见阴离子色谱分析,一、实验目的,1,了解离子色谱仪的基本构造与一般使用方,法,2,能用于测定样品中常见阴离子的含量,二、实验原理,离子色谱法是以为离子交换树脂为固定相,电解质溶液为流动相的液相色谱方法，常以,电导检测器作为通用的检测器,常见阴离子经过阴离子柱分离后，利用保,留时间进行定性分析，利用峰面积进行定量,分析,三、仪器与试剂,1,仪器,ICS-90,型离子色谱仪；电导检测器；阴,离子

10、分析系统，微量注射器,2,试剂,Na,2,SO,4,NaNO,3,NaCl,均为分析,纯,9 mmol/L Na,2,CO,3,溶液,四、实验步骤,1,色谱操作条件的设置,2,标准溶液配制,3,样品溶液的配制,4,进样并记录色谱图,五、数据处理与分析,100,s,s,i,i,m,A,A,P,实,验,六,分子荧光光谱分析法测定维生素,B,2,一、实验目的,1,了解荧光光谱分析基本原理,2,掌握荧光法的定量分析方法,3,了解日立,F-2500,型荧光分光光度计的构造及,其使用方法,二、实验原理,维生素,B,2,核黄素）在一定波长的激发光照,射下会发射出绿色荧光，根据荧光强度在一,定浓度范围内与荧光

11、物质浓度成正比，用标,准曲线法对样品进行定量分析,三、仪器与试剂,1,仪器：日立,F-2500,型荧光分光光度计，液体,样品架,50mL,容量瓶,8,个,100mL,烧,杯,2,个，洗瓶一个，玻璃棒二根，蒸馏,水,2,试剂,1,的醋酸溶液,维生素,B,2,标准溶液：称出,10.0mg,维生,素,B,2,先溶于少量的,1,的醋酸溶液，然,后转移到,1000mL,容量瓶中，用,1,的醋,酸溶液定容至刻度，摇匀，至阴暗处,保存。此液含维生素,B,2,10.0g/mL,四、实验步骤,1,按照日立,F-2500,型荧光分光光度计的使用方,法开好仪器,2,配制系列标准溶液：取,5,个,50mL,容量瓶，分

12、,别加入,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00mL,浓度,为,10.0g/mL,的标准溶液，用水稀释至刻,度，摇匀,3,标准曲线的绘制,把各标准样品置于试样架内，设置好仪器的,工作条件，用蒸馏水做空白，分别扫描空白,和标样的荧光光谱，根据峰高和浓度绘制标,准曲线,4,未知试样的测定,准确称出一定量的未知试样于小烧杯中，用,水溶解并定容至,100mL,容量瓶内，摇匀，用,测定标准曲线相同的条件，测其荧光强度,五、数据处理与分析,根据试液的荧光强度，从标准曲线上查出试液中,维生素,B,2,的浓度，按下列公式计算维生素,B,2,的含,量,维生素,B,2,的含量,C,100/G,g/g,C

13、,试液中维生素,B,2,的浓度（从标准曲线上查,出，单位是,g/mL,C,未知试样的重量，单位是克,g,100,试样被稀释的体积,实,验,七,紫外吸收光谱法测定苯甲酸,一、实验目的,1,了解紫外吸收光谱仪的基本构造与一般使用,方法,2,能用于测定样品中苯甲酸的含量,二、实验原理,苯甲酸在,225nm,处有最大吸收峰，其吸光度与,浓度的关系服从朗伯比尔定律,三、仪器与试剂,1,仪器,UV1600,紫外分光光度计,10mL,容量,瓶,7,个,20 mL,5 mL,吸量管各,1,支,2,试剂,0.1mol,L,1,NaOH,溶液,苯甲酸钠,AR,蒸,馏水,四、实验步骤,1,苯甲酸钠贮备液的配制：称量

14、经过干燥的苯,甲酸钠适量于,1000mL,容量瓶中，用水溶,解，并定容,2,苯甲酸钠工作溶液的配制：取,20.00mL,贮备,液稀释定容至,1000mL,3,苯甲酸钠系列标准溶液的配制：分别取苯甲,酸钠工作溶液,0-5.00 mL,按下表配制,容量瓶编号,1,2,3,4,5,6,7,8,工作液,mL,0,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,4.00,4.00,加入,NaOH,mL,1.00,1.00,1.00,1.00,1.00,1.00,1.00,1.00,定容,mL,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,10.0,C,ppm,0,2.0,4.0

15、,6.0,8.0,10.0,X,1,X,2,五、数据处理与分析,1,标准曲线的绘制：以苯甲酸钠系列标准溶液,的吸光度为纵坐标，相应的浓度为横坐标,绘制作,A-C,标准曲线,2,样品溶液中苯甲酸钠含量计算：从,A-C,标准,曲线上查出,X,值，从而求出样品中苯甲酸的,含量,实,验,八,双波长法同时测定维生素,C,和,E,一、实验目的,1,进一步熟悉紫外吸收光谱仪的基本构造，掌,握其一般使用方法,2,能用双波长法同时测定双组分的含量,二、实验原理,吸光度具有加合性，根据两组分吸收曲线的,性质，选择两个合适的测定波长，通过解联,立方程的可以同时测出样品中双组分的含量,三、仪器与试剂,1,仪器,UV1

16、600,紫外分光光度计,50mL,容量瓶,10,个,20 mL,5 mL,吸量管各,2,支,2,试剂,维生素,C,维生素,E,无水乙醇,四、实验步骤,1,维生素,C,和维生素,E,标准溶液的配制,2,维生素,C,和维生素,E,紫外吸收曲线的绘制，确,定测定波长,3,维生素,C,和维生素,E,标准曲线的绘制,4,未知试样的测定,五、数据处理与分析,1,维生素,C,吸收曲线的绘制,2,维生素,E,吸收曲线的绘制,3,根据吸收曲线测定波长的选定,4,维生素,C,标准曲线的绘制,5,维生素,E,标准曲线的绘制,6,样品溶液中维生素,C,和,E,含量计算,实,验,九,原子吸收光谱法测定,井水、河水中镁,

17、一、实验目的,学会原子吸收光谱法测定金属元素的原理与,方法,了解原子吸收分光光度计的基本构造，初步,熟悉其操作方法,掌握火焰法测镁的条件选择,二、实验原理,将样品试液吸入空气,乙炔火焰中，在火焰的高,温下，镁化合物离解为镁基态原子，基态原子蒸,气对镁空心阴极灯发射的特征谱线产生吸收。将,测得的试样溶液的吸光度扣除试剂空白的吸光度,利用标准曲线法，确定试液中的镁含量,三、仪器与试剂,仪器,TAS-986,型,GGX,型原子吸收分光,光度计,试剂,10,g/ml Mg,标准液,四、实验步骤,配制,Mg,标准系列,取,10,g/ml Mg,标准液,0.50,1.00,0.50,2.00,2.50ml

18、,分别置于,5,个,50ml,容量瓶,中，用蒸馏水稀释至刻度摇匀，得,Mg,标准,系列,样品,井水直接取,4.00ml,稀释至,100ml,河水过滤,后取,10ml,稀释至,100ml,元,素,光,源,灯电,流,波长,通,带,火焰,燃烧器高,度,Mg,Mg,灯,1,mA,285.2,nm,2A,乙炔,空气,mm,仪器检测条件,按照上述条件，根据仪器操作步骤依次从低,到高浓度测定标液和样液,五、数据处理,采用标准曲线法处理，样品稀释倍数,附,一,TAS-986,原子吸收分光光度计火焰法操作规程,正确连接仪器及计算机各连线和插头，确认,仪器电源开关处于“关”位，再开启稳压器,电,源,顺序打开打印机

19、、显示器、计算机电源开,关，等待计算机处于,Windows,界面,装上待测元素空心阴极灯，并记下灯位。打,开,TAS-986,主机电源开关，双击,AAwin,软,自检完成后，设定和选择工作灯和预热灯,下一步,修改或输入正确的灯电流,分光带宽、燃气流量、燃烧器高度和位置,下一步“寻峰,下一步,完,成,在任务栏击“仪器”，选择“燃烧器参数,调,节火焰原子化器的前后、上下及角度位,置，其对准光路,击“仪器”选择“扣背景方式”选择,氘,灯,或“自吸”扣背景，并输入适当的氘灯电流,或,窄脉冲电流，在能量窗口再进行调节和能量,自动平衡。若不进行背景校正，本步可省去,击“参数”按钮在常规界面输入“测量重,复

20、次,数”、“采样间隔”、及“采样延时参数,在显,示界面输入“吸光度显示范围”及“页面更,新时,击“样品”按钮,选择“校正方法”、“曲,线方,程”,浓度单位,下一步,选择,标准系列样品个数”，输入“标准系列,样品,浓度值,下一步,选择“未知样品,个数,完成,顺序打开空压机“风机开关,工作开,关,10,打开乙炔钢瓶总阀，检查并调节出口压力为,0.05 0.09 Mpa,之间（推荐压力,0.06 Mpa,11,击“点火”按钮点火,吸喷蒸馏水,1 2,分钟,吸喷标准系列空白溶液击“校零”按钮自动调,零,12,击“测量”按钮,顺序吸喷标准系列溶液并在,测,13,吸喷未知样品溶液，击“开始”按钮测,量未,

21、知样品。全部未知样品测量完毕后击,终,止”按钮退出测量,吸喷蒸馏水,1 2,分,钟清洗燃烧器,14,击“应用”按钮,选择“实验记录,输入,测量元素”、“样品名称”、“分析,15,在测量表格上击右键,选择“表格设置,选择所需显示和打印的项目,在任务栏击,打印”按钮,选择所需打印的内容,击,确,定”打印相应内容,16,关闭乙炔钢瓶总阀，烧去管路中余气，待,火焰熄灭后按空压机“放水阀”放水,关,闭,17,退出,AAWin,操作软件,关闭,TAS-986,主机,电源,关闭打印机、计算机、稳压器电源,18,整理实验室卫生、检查实验室水、气、电安,全,附二,GGX,型原子吸收分光光度计操作规程,1,开机前准备,将主机各操作钮置于适当位置,安装空心阴极灯,2,开机,依次开稳压器、总电源、调灯电流后预热,15,20,分钟,选择分析线及狭缝宽度后，调灯及燃烧器,的位置，调负高压，用“状态检查（工作,选,择）”检查负高压与,15V,电源是否正常,3,点火,关紧主机上各气体调节针阀，将“空气,笑,气,钮旋至“空气”，开排废气装置,开空压机，调空气输入压为,2,3kg,cm-2,打开助燃气针阀，开大至限压开关被启动,后，调助燃气流量,依次打开乙炔钢瓶总阀、分阀，调节乙炔,输出压力,0.8 kg,cm-2,调燃气流量后点火,4,测定,依次从低到高浓