大肠杆菌检测实验报告

1、国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数实验目的实验原理：国标法操作的原理 实验器材：培养箱， 10 只移液管， 1 只 250ml 锥形瓶， 5 只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，100ml量筒，橡皮手套，超净台实验药品：磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaO,H5%HCI实验步骤：-.10 只移液管， 1 只 250ml 锥形瓶， 5 只大试管， 4 个平皿， 500ml 大 烧杯 1 个， 100ml 量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在 121摄氏度条件下灭菌20min。灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。 用

2、酒精擦拭超净台，紫外消毒 30min.1：用电子天平称取成品 LB 3.1241g 和琼脂 1.8756g 放入 250ml 的洁 净锥形瓶中。2:用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在 121 摄氏度之下灭菌 20min。 4:灭完菌后放入超净台中备用。1取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入 49ml PBS2：将 1ml 样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成 1:50 的细菌溶液。3：取 4 只试管，编号 144：用无菌移液管分别向 4只试管中加入 9ml 的 PBS5：用 1ml 无

3、菌移液管从样品中移取 1ml 菌液加入到 1中. 震荡试管使菌液均匀。6:用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀7:用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取lml细菌溶液，加 入 3 中，摇匀以此类推直至 4 只试管中均加入了细菌溶液。 9:取 4 只平皿，编号 1410:分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取lml的菌液置于 4只平皿中，加入4 5 5 0摄氏度温度下的培养基，约l5mm厚度。缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；待培养基冷凝后倒置。11:将培养基在3 6摄氏度条件下培养12小时。 12:取出培养皿，选择细菌个数在 30 至 300 个之间的平皿

4、数细菌的 个数。四:实验结果（记得在操作过程和得到结果时拍照）1 号， 2 号菌落个数多不可计，舍弃4 号平皿中菌落数目小于 10 cfu ，舍弃3号平皿中菌落分布较均匀， 数3号中的菌落数，一共有 210个 cfu 。计算样品中细菌浓度为：1.05 X 105 Cfu/ml点评超净台中的实验步骤讲述详细， 明确，不错。前面的步骤叙述有点乱， 建议按照如下标题重新调整顺序。实验步骤：1、 仪器清洗将烧杯，培养皿、 试管等仪器用洗衣粉清洗， 超声 5min. 然后用清水清洗，超声5min,最后用三蒸水清洗，放入烘箱中烘干。2、 培养基配制精确称量。放入锥形瓶中，加入。mL蒸馏水，摇匀 3，灭菌包扎、灭菌，烘干备用3、 超净台中的操作（如上） 除了实验步骤和结果，还要有讨论和注意事项 例如： 实验讨论：1、评价该方法（操作简易程度，灵敏度如何，适用性）2、为何选择细菌个数在 30至 300个之间的平皿数细菌的个数？ 注意事项比如各种仪器的使用注意事项，