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1、实验三,过氧化物酶染色（POX） 过碘酸-雪夫反应（PAS）,细胞化学染色Cytochemical Staining,实质是原位显示细胞成分结构，常为不移 动的有机化学物。 细胞化学染色包括三个步骤：,过氧化物酶染色Peroxidase Staining （POX）,1.原理： 传统方法-联苯胺法 过氧化氢 过氧化物酶 新生态氧 联苯胺 联苯胺蓝 亚硝基铁氰化钠 稳定的蓝色化合物,然后,10分钟,操作步骤,新鲜涂片,滴加A液3滴（覆盖标本即可）,滴加等量B液3滴,吹匀,水洗，甩干,甩干，镜检,滴加C液3滴，D液6滴混匀,5分钟,注意事项 （1）标本要新鲜 （2）试剂要室温，用后要盖好，防止挥发

2、 （3）加试剂要充分混匀，使染色均匀,结果判断（100） 胞浆中出现红棕色至蓝黑色颗粒为阳性反应,（）无颗粒沉着 （弱+） 颗粒细小，分布稀疏 （+）颗粒较粗常呈局灶性分布 （+）颗粒粗大分布较密占胞浆1/22/3 （+）颗粒粗大，呈团块状分布 （+）颗粒布满细胞，可覆盖胞核,正常参考值 正常人淋巴细胞、红细胞、巨核细胞、成熟嗜 碱性粒细胞，均无POX； 粒细胞系统：早幼粒以下阶段细胞均为阳性，且逐渐加强，嗜酸粒细胞阳性最强 单核细胞内POX呈弱阳性。,临床意义1.辅助鉴别急性白血病的类型 急性粒细胞白血病 AML （+） 急性淋巴细胞白血病 ALL（-）(阳性率3) 急性单核细胞白血病 AM

3、OL（-/） 2. 辅助鉴别急性早幼粒细胞白血病（APL)、急性 单核细胞白血病（AMOL)、恶性组织细胞病（MH),A: APL B: AMML C: AMOL D: ALL,过碘酸是一种氧化剂，能使细胞内含有乙二醇的糖类氧化产生双醛基，醛基与schiff试剂中的品红结合，形成紫红色化合物，定位于含有多糖成分的部位。,Periodic Acid-Schiff (PAS) reaction,过碘酸雪夫反应（糖原染色),操作步骤,结果 阳性反应：胞质内染红色或紫红色，呈弥 散状、颗粒或块状。胞核染成绿色。,正常血细胞PAS染色特点,临床意义 1.鉴别淋巴系统增生的性质 恶性增生时多呈强阳性-ALL、CLL、淋巴瘤（红色颗粒或块状） 2.鉴别红系增生的性质 红血病、红白血病为强阳性 地中海贫血、IDA 、MDS为阳性 巨幼细胞性贫血、HA 、AA 阴性,3. 急粒大多数阴性/少数阳性（均匀分布颗粒） 4. 巨核系（血小板）阳性，有助于M7的诊断 5. Gaucher 细胞 (+)，Niemman-pick 细胞 (-/),注意事项： 1.试剂要在室温 2.雪夫试剂及时使用 3.结果及时观察，放置1周褪色,CLL,ALL,ALL,ALL中粗粗粒散在分布,A:红白血病 B:巨幼贫,M6 PAS 染色,POX PAS,然后,10分钟,新

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