基因的功能验证-陈璟.pptx_第1页
基因的功能验证-陈璟.pptx_第2页
基因的功能验证-陈璟.pptx_第3页
基因的功能验证-陈璟.pptx_第4页
基因的功能验证-陈璟.pptx_第5页
已阅读5页，还剩18页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、基因的功能验证,陈璟 2012.09.25,20世纪人类科技史上的三大创举,40年代第一颗原子弹爆炸,60年代人类首次登上月球,90年代人类基因组计划,基因组学包括3个不同的亚领域 结构基因组学(structural genomics) 功能基因组学(functional genomics) 比较基因组学(comparative genomics),基因组学概念,一是通过增强其表达，取得表达产物进行研究， 增强其表达因为不能反映基因产物的真实表达情况，而逐渐被抛弃 基因的异源表达，在近缘物种类表达目的基因。 二是减弱或者终止其表达，观察整体功能的变化，进而推测相应的基因功能,DNA-Bindi

2、ng Domain,Bait Protein,Prey Protein,Transcription Activating Region,Reporter Gene,DNA-Binding Site,酵母双杂交技术,反式作用因子中的两个功能结构域 DNA结合域 转录激活结构域,鉴定新的蛋白与蛋白相互作用 鉴定蛋白级联底物 鉴定突变对蛋白与蛋白结合的影响 在已知的相互作用中鉴定干扰蛋白质 (反向双杂交系统),酵母双杂交系统应用,利用酵母作为真核蛋白相互作用的模型,第一相电泳根据蛋白质的不同等电点分离各种蛋白质，即等电聚焦法(isoelectrie focusing IEF) 第二向电泳根据蛋白质的

3、不同分子量进一步分离等电点相同的蛋白质，即SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),双向凝胶电泳技术是目前蛋白质组研究的主要技术之一, 双向电泳根据等电点和分子量可一次性分离数千种蛋白质，经染色后蛋白质再PAGE上可形成密度不同、分布不均的复杂点图谱。 如何有效的对双向凝胶电泳图像分析，如何对图谱上的蛋白质点进行检测、定量、比较、分析和归类，挖掘有价值的蛋白质点的信息是双向电泳分析软件所要解决的问题。,差异点：,蛋白质的分离与鉴定,蛋白质经双向电泳分离及图像分析后，将蛋白质斑点胶块切下，用蛋白酶通常用胰蛋白酶)对蛋白质样品进行胶内酶解，获得肽片段 上质谱分析蛋白质成分,质谱基础,样品,离子源,质量分析器,离子检测器,固体 液体 蒸汽,形成离子 (带电分子),电离,质量分选(过滤),检测,根据m/z分选离子,数据处理,质谱,检测离子,基本步骤: 1. 样品离子化 2. 根据质量(m/z)不同分离离子 3. 检测每种质量离子的数目 4. 收集、处理数据得到质谱图,组织切片或印片原位质谱分析技术 两级飞行时间串联质谱（MALDI-TOF/TOF） 傅里叶转换回旋共振质

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 规章制度

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论