临床症状不同颈椎病患者颈椎间盘白细胞介素1β及白细胞介素6和环氧化酶2的表达

1、临床症状不同颈椎病患者颈椎间盘白细胞介素1及白细胞介素6和环氧化酶2的表达胡 炜1，马信龙2，袁建军1，张仁赞1，彭 兵1，张学利1(1天津市人民医院脊柱外科，天津市 ；2天津医院骨科，天津市 )引用本文：胡炜，马信龙，袁建军，张仁赞，彭兵，张学利. 临床症状不同颈椎病患者颈椎间盘白细胞介素1及白细胞介素6和环氧化酶2的表达J.中国组织工程研究，2016，20(35):5270-5276.DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.35.015 ORCID: 0000-0002-8250-5103(胡炜)文章快速阅读：白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2在颈脊髓压迫

2、不同临床症状患者中的表达及意义胡炜，男，1980年生，河北省涿州市人，回族，2015年天津医科大学毕业，博士，副主任医师，主要从事脊柱外科基础与临床研究中图分类号:R318文献标识码:B文章编号:2095-4344(2016)35-05270-07稿件接受：2016-07-12苏木精-伊红染色免疫组织化学染色颈椎外伤组比较3组间盘白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2的表达的差异观察颈椎间盘炎性细胞因子表达髓性症状组分组结果说明，突出的颈椎间盘可发生白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2细胞因子表达，并在颈椎间盘早期退变中发挥作用，不同临床症状的颈脊髓压迫患者这些炎症因子表达具有明显差异根性症

3、状组文题释义：白细胞介素：是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。由于最初是白细胞产生又在白细胞间发挥作用，所以由此得名，现仍一直沿用。白细胞介素interleukin 缩写为IL。关于免疫反应的表达和调节，有来源于淋巴细胞或巨噬细胞等许多因子参与。来源于淋巴细胞的有淋巴细胞活素，来源于巨噬细胞的总称为monokine，其中的各个因子的生物活性各有不同。现在是指一类分子结构和生物学功能已基本明确，具有重要调节作用而统一命名的细胞因子，它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调，相互作用，共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分

4、化及在炎症反应中起重要作用。环氧化酶：又称前列腺素内氧化酶还原酶，是一种双功能酶，具有环氧化酶和过氧化氢酶活性，是催化花生四烯酸转化为前列腺素的关键酶。目前发现环氧化酶有两种环氧化酶1和环氧化酶2同工酶，前者为结构型，主要存在于血管、胃、肾等组织中，参与血管舒缩、血小板聚集、胃黏膜血流、胃黏液分泌及肾功能等的调节，其功能与保护胃肠黏膜、调节血小板聚集、调节外周血管的阻力和调节肾血流量分布有；后者为诱导型，各种损伤性化学、物理和生物因子激活磷脂酶A2水解细胞膜磷脂，生成花生四烯酸，后者经环氧化酶2催化加氧生成前列腺素。摘要背景：在颈椎的退变过程中，椎间盘细胞发生生物化学变化，此过程产生各种炎性细

5、胞因子可能导致椎间盘突出。间盘突出后，反过来刺激周围毗邻组织产生各种炎性因子。 目的：探讨白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2在不同临床症状的颈脊髓压迫患者中的表达及意义。方法：颈前路间盘切除内固定患者的突出间盘或责任间盘，依据临床症状分为3组：髓型症状组，根性症状组，颈椎外伤组，对间盘进行苏木精-伊红染色及免疫组织化学染色进行形态学观察，对间盘免疫组织化学染色结果进行阳性细胞计数。结果与结论：髓型症状组和根性症状组苏木精-伊红染色在突出颈椎间盘周围的炎性肉芽组织中可见炎细胞浸润以及新生血管形成；颈椎外伤组未见明显炎细胞浸润以及新生血管形成；免疫组织化学染色髓型症状组可见白细胞介素1、白细胞

6、介素6表达阳性的细胞，其胞浆为棕黄色着色为主，环氧化酶2表达阳性的细胞稀少；根性症状组中可见白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2表达阳性的细胞，数量明显多于髓型症状组；颈椎外伤组中免疫组织化学染色白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2表达阳性细胞表达稀少；髓型症状组及根性症状组中白细胞介素1阳性表达率和IA值，白细胞介素6阳性表达率和IA值均显著高于颈椎外伤组(P 0.05)；根性症状组中环氧化酶2阳性表达率及IA值均显著高于颈椎外伤组。结果说明，突出的颈椎间盘可发生白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2细胞因子表达，并在颈椎间盘早期退变中发挥作用，不同临床症状的颈脊髓压迫患者这些炎症因子表

7、达具有明显差异。关键词：骨科植入物；脊柱植入物；颈椎；椎间盘；脊髓压迫；炎症因子 主题词：颈椎；椎间盘；炎症因子；组织工程基金资助：天津市卫计委基金资助项目(2014KZ059)Expression of interleukin-1 beta, interleukin-6 and cyclooxygenase 2 in cervical intervertebral disc of cervical spondylosis patients with different clinical symptomsHu Wei1, Ma Xin-long2, Yuan Jian-jun1, Zhang

8、Ren-zan1, Peng Bing1, Zhang Xue-li1 (1Department of Spinal Surgery, Tianjin Peoples Hospital, Tianjin , China; 2Department of Orthopedics, Tianjin Hospital, Tianjin , China)AbstractBACKGROUND: During degeneration of cervical spine, biochemical changes appeared in intervertebral disc cells. During th

9、is process, a variety of inflammatory cytokines may lead to disc herniation, which stimulates the production of a variety of inflammatory factors from surrounding adjacent tissue. OBJECTIVE: To explore the expression and significance of interleukin-1, interleukin-6 and cyclooxygenase 2 in patients w

10、ith different clinical symptoms of cervical spinal cord oppression. METHODS: Protrusion of the intervertebral disc or disc of responsibility among patients with anterior disc resection and internal fixation were divided into three groups according to clinical symptoms: myelopathic symptom group, ner

11、ve root symptom group and cervical spine trauma group. Intervertebral disc received hematoxylin-eosin staining and immunohistochemical staining for morphological observation. Positive cells were counted according to the result of immunohistochemical staining. Hu Wei, M.D., Associate chief physician,

12、 Department of Spinal Surgery, Tianjin Peoples Hospital, Tianjin , ChinaRESULTS AND CONCLUSION: (1) Hematoxylin-eosin staining results showed visible inflammatory cell infiltration and new blood vessel formation in the myelopathic symptom group and nerve root symptom group. No remarkable inflammator

13、y cell infiltration or new blood vessel formation was seen in cervical spine trauma group. (2) Immunohistochemical staining interleukin-1-, interleukin-6-positive cells were seen in the myelopathic symptom group. Cytoplasm was stained tan. Cyclooxygenase 2-positive cells showed a low number. The num

14、bers of interleukin-1-, interleukin-6- and cyclooxygenase 2-positive cells were significantly more in the nerve root symptom group than in the myelopathic symptom group. The numbers of interleukin-1-, interleukin-6- and cyclooxygenase 2-positive cells were small in the cervical spine trauma group. (

15、3) Expression rate and IA value of interleukin-1, expression rate and IA value of interleukin-6 were significantly higher in the myelopathic symptom group and nerve root symptom group than in the cervical spine trauma group (P 0.05性别(男/女，n)11/97/1312/8 0.05年龄(s，岁)53.33.546.62.842.55.6 0.05C3/4(n)342

16、 0.05C4/5(n)867 0.05C5/6(n)788 0.05C6/7(n)223 0.05表2 各组椎间盘组织白细胞介素1表达阳性结果 (n=20) Table 2 Results of interleukin-1 expression in intervertebral discs in each group组别白细胞介素1阳性率(%)IA(s)髓型症状组70 a12.282.54a根性症状组80 a16.425.46a颈椎外伤组101.200.85统计值2=23.04 F=16.79 表注：与颈椎外伤组比较，aP 0.05。表4 各组椎间盘组织环氧化酶2表达阳性结果 (n=20)

17、 Table 4 Results of cyclooxygenase 2 expression in intervertebral discs in each group组别环氧化酶-2阳性(%)IA(s)髓型症状组51.220.32根性症状组60 a12.261.58 a颈椎外伤组50.241.08统计值2=22.55 F=57.08 表注：与颈椎外伤组比较，aP 0.05。表3 各组椎间盘组织白细胞介素6表达阳性结果 (n=20) Table 3 Results of interleukin-6 expression in intervertebral discs in each grou

18、p表注：与颈椎外伤组比较，aP 0.05。组别白细胞介素6阳性(%)IA(s)髓型症状组60 a14.364.38a根性症状组80 a15.243.25a颈椎外伤组101.421.25统计值2=20.80 F=15.86 阳性细胞计数：将白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2免疫组织化学染色结果显微镜下进行阳性细胞计数，每张切片随机采集20个视野(10物镜)，对每个视野进行分析，可得出阳性目标面密度(即阳性染色面积/统计场总面积，简称面密度)，阳性单位(代表阳性部分的平均染色强度，染色越深，数值越大，上述两指标的乘积(面密度阳性单位)的大小即反映免疫组织化学阳性目标的总强度(IA)。1.5 主

19、要观察指标 椎间盘组织形态学观察。椎间盘组织白细胞介素、白细胞介素6、环氧化酶2阳性细胞计数。1.6 统计学分析 所有资料以 SPSS19.0 统计软件进行分析，应用描述性统计和分析研究变量分布，符合正态分布的测定值以s表示，相关性分析采用直线相关，两组间的比较采用t 检验，多组间的比较采用方差分析；显著性水平设置为P 0.05。2 结果 Results 2.1 参与者数量分析 纳入患者60例，分为3组，试验过程中无脱落，全部进入结果分析。2.2 三组患者基线资料分析 见表1。3组患者性别、年龄、颈髓损伤节段比较差异无显著性意义。2.3 形态学观察结果2.3.1 苏木精-伊红染色 髓型症状组和

20、根性症状组苏木精-伊红染色在突出颈椎间盘周围的炎性肉芽组织中可见炎细胞浸润以及新生血管形成。阳性细胞以成纤维纽胞、软骨细胞及淋巴细胞为主。颈椎外伤组未见明显炎细胞浸润以及新生血管形成。2.3.2 免疫组织化学染色 髓型症状组中切片镜下在突出间盘周围的炎性肉芽组织周围可见白细胞介素1、白细胞介素6表达阳性的细胞，同时于椎间盘髓核及纤维环亦可见散在分布。其胞浆主要呈棕黄色着色，环氧化酶2表达阳性的细胞稀少。根性症状组中可见白细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2表达阳性的细胞，在椎间盘周围的炎性肉芽组织中、椎间盘髓核及纤维环内均可见阳性表达，阳性细胞数量多于髓型症状组。颈椎外伤组中免疫组织化学染色白

21、细胞介素1、白细胞介素6、环氧化酶2表达阳性细胞表达稀。2.3.3 阳性细胞计数 髓型症状组及根性症状组中白细胞介素1阳性表达率及IA值均显著高于颈椎外伤组，髓型症状组及根性症状组中白细胞介素1阳性表达率差异无显著性意义，IA值比较差异有显著性意义(表2)。髓型症状组及根性症状组中白细胞介素6阳性表达率及IA值均显著高于颈椎外伤组，髓型症状组及根性症状组中白细胞介素6阳性表达率差异无显著性意义，IA值比较差异无显著性意义(表3)。根性症状组中环氧化酶2阳性表达率及IA值均显著BACcCbCa图1 女性38岁患者脊髓型颈椎病术前MRI图像及术后组织学观察Figure 1 Preoperative

22、 MRI images and postoperative histological observation in a 38-year-old female patient with cervical spondylosis myelopathy图注：图A为MRI检查T2像可见C3/4水平间盘突出，脊髓受压；B为颈间盘组织标本苏木精-伊红染色可见炎细胞浸润以及新生血管形成(100)；C为椎间盘组织免疫组织化学染色结果(200)；a可见白细胞介素1阳性细胞；b可见白细胞介素6阳性细胞；c可见环氧化酶2阳性细胞。CbCaABCc图2 男性47岁患者神经根型颈椎病术前MRI图像及术后组织学观察Fig

23、ure 2 Preoperative MRI images and postoperative histological observation in a 47-year-old male patient with cervical spondylosis of nerve root type图注：图A 为MRI检查T2像可见C6椎体后缘间盘突出，脊髓受压；B为颈间盘组织标本苏木精-伊红染色可见炎细胞浸润以及新生血管形成(100)；C为椎间盘组织免疫组织化学染色结果(200)；a可见白细胞介素1阳性细胞；b可见白细胞介素6阳性细胞；c可见环氧化酶2阳性细胞。ACcCaCbB图3 男性26岁患者

24、颈椎外伤术前MRI图像及术后组织学观察Figure 3 Preoperative MRI images and postoperative histological observation in a 26-year-old male patient with cervical spine trauma图注：图A为MRI检查T2像可见C6椎体高信号；B为颈间盘组织标本苏木精-伊红染色未见炎细胞浸润以及新生血管形成(100)；C为椎间盘组织免疫组织化学染色结果(200)；a可见白细胞介素1阳性细胞；b可见白细胞介素6阳性细胞；c可见环氧化酶2阳性细胞。高于髓型症状组及颈椎外伤组，髓型症状组及颈椎外

25、伤组中环氧化酶2阳性表达率差异无显著性意义，IA值比较差异有显著性意义(表4)。2.4 典型病例介绍 例1，患者女，38岁，主因“四肢麻木无力2年，加重伴双手精细动作减退，行走不稳2个月”入院，入院诊断为颈椎病(脊髓型)，术前MRI检查T2像可见C3/4水平间盘突出，脊髓受压(图1A)，完善术前准备，行颈前路C4椎体次全切除，C3-5钛网植入内固定术。颈间盘组织苏木精-伊红染色可见炎细胞浸润以及新生血管形成(图1B)；椎间盘免疫组织化学染色切片镜下可见白细胞介素1(图1Ca)、白细胞介素6(图1Cb)表达阳性的细胞，主要集中在突出间盘周围的炎性肉芽组织中，椎间盘髓核及纤维环中亦可见散在分布。其

26、胞浆为棕黄色着色为主，环氧化酶2表达阳性的细胞稀少(图1Cc)。例2，患者男，47岁，主因“左上肢放射痛伴麻木无力1年加重3个月”入院。入院诊断为颈椎病(神经根型)，术前MRI检查T2像可见C6椎体后缘间盘突出，脊髓受压(图2A)，完善术前准备，行颈前路C6椎体次全切除，C5-7钛网植入内固定术。颈间盘组织标本苏木精-伊红染色可见炎细胞浸润以及新生血管形成(图2B)；颈间盘组织行免疫组织化学染色，椎间盘切片镜下可见白细胞介素1(图2Ca)、白细胞介素6(图2Cb)、环氧化酶2(图2Cc)表达阳性的细胞，在间盘周围的炎性肉芽组织、椎间盘髓核及纤维环中均可见阳性表达。例3，患者男，26岁，主因外伤

27、致颈部活动受限3h入院，入院诊断颈椎外伤，无骨折脱位。术前MRI检查T2像可见C6椎体高信号(图3A)，完善术前检查，行C6椎体次全切除，C5-7钛网植入内固定术。颈间盘组织标本苏木精-伊红染色未见炎细胞浸润以及新生血管形成(图3B)；颈间盘组织标本免疫组织化学染色，椎间盘切片镜下可见白细胞介素1(图3Ca)、白细胞介素6(图3Cb)、环氧化酶2(图3Cc)表达阳性细胞表达稀少。3 讨论 Discussion3.1 椎间盘退变炎症反应发生机制 椎间盘是脊柱退行性变病程中首先发生改变的结构，其由软骨板、纤维环、髓核3部分组成，随着年龄的增长，椎间盘内部水分丢失，合成细胞基质的原料逐渐减少。这些生

28、物化学改变导致对应力的承受逐渐减弱，并且失去缓冲震荡的作用，研究认为脊柱作为机体的重要承重组织，其在轴向上承受大部分向下传导的力学负荷，这会使椎间盘的形状和容积发生变化，同时引起终板以及终板下骨质的骨小梁发生微小变形，但是当力学负荷过大或者长期慢性劳损发生时，骨小梁的变形难以代偿性恢复，这就导致微骨折出现，造成不可逆损伤。同时，当微骨折出现后，椎体终板出现裂隙，髓核作为一种特殊的抗原组织，便拥有通过此新生裂隙通道的可能性，若进入终板以及终板下骨质，就会与血液系统接触，破裂的椎间盘会释放出炎性因子，导致受累的脊髓、神经根或脊神经节发生炎性反应。此次研究中部分患者表现髓性或根性症状可能与炎性因子刺

29、激相关。同时在椎间盘纤维环、后纵韧带、关节囊部位富含神经肽。损伤时神经肽类物质释放，可直接刺激周围的感受器引发疼痛。上述因素可能与退变椎间盘发生炎症反应密切相关6-10。3.2 炎性因子 白细胞介素在间盘的基质降解和细胞的凋亡方面发挥重要作用，其中起主要作用的有白细胞介素1、白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素10等。白细胞介素1主要有3个成员：白细胞介素1、白细胞介素1和白细胞介素1RN，其中白细胞介素1、白细胞介素1是炎症的强力诱导者，部分学者对正常和退变的椎间盘组织研究发现，正常和退变的椎间盘组织都可以产生白细胞介素1受体激动剂、拮抗剂、活性受体和白细胞介素1转换酶，在此过程中同时进行

30、自身调节，间盘组织中炎性因子的表达进而可能进一步增加11-15。在实验过程中，椎间盘细胞加入部分白细胞介素1，打破了椎间盘基质的合成与分解代谢平衡，一些基质降解酶的基因表达表现出明显的增加趋势；基质合成基因的表达同时表现出明显的降低趋势，提示白细胞介素1在参与炎症表达的过程中，有可能会与临床症状相关16-17。研究发现白细胞介素1可以从多个方面加速椎间盘退变的进程，主要通过改变椎间盘的生物化学成分来实现，分别从蛋白多糖含量、基质金属蛋白酶含量，甚至可以通过纤维胶原以及基因方面影响椎间盘退变的进展。另有实验证明椎间盘细胞加入部分白细胞介素1，打破了椎间盘基质的合成与分解代谢平衡18-20。白细胞

31、介素6、前列腺素E2、一氧化氮属于“下游”炎症因子，白细胞介素1等炎性因子可能会诱导“下游”炎症因子的高表达或分泌。在颈脊髓压迫患者的间盘组织中，白细胞介素6可能会促进MMP的表达，使椎间盘中蛋白聚糖、型胶原的失去正常比例，间盘中髓核水分减少，降低了间盘的缓冲理化特性。此外，白细胞介素6的增加通过炎症反应改变椎间盘自身的pH值、电解质、氧饱和度等微环境，增加了不可逆的退变过程21-25。在研究中对表现髓性症状的髓型症状组患者进行免疫组织化学染色，观察显示白细胞介素1及白细胞介素6均可见阳性表达，考虑与患者间盘的退变过程相关。根性症状组的白细胞介素1及白细胞介素6阳性表达高于髓型症状组，作者考虑

32、可能与炎性刺激有关。 环氧化酶2是局部炎症的相对特异性标志，环氧化酶2因子在正常椎间盘中表达很少或者几乎不表达，而在退变的椎间盘内可能有少量表达。在此次研究中根性症状组患者环氧化酶2具有高表达，而髓型症状组和颈椎外伤组患者患者在纤维环及髓核内罕见表达，可能与相对局部炎症反应弱有关，与以往研究结论一致。环氧化酶2主要以结构型的环氧化酶1和诱导型的环氧化酶2两种结构形式存在，是相应基因在炎症期间上调表达过程发生，在花生四烯酸级联反应过程中合成前列腺素E2产物过程中充当限速酶26-28。在研究中，对根性症状组中呈现脱出状态的髓核进行免疫组织化学染色，相较于后纵韧带未破裂的突出的间盘髓型症状组及颈椎外

33、伤组，环氧化酶2的阳性表达差异有显著性意义，可能与纤维环发生破裂后，毗邻组织受刺激，炎性反应较强有关。颈椎病患者临床症状往往来源于机械压迫、炎性因子的刺激等诸多因素，研究成果在患者的手术治疗及术后是否应用抑制炎性因子分泌的药物具有指导意义，通过研究进一步探讨椎间盘疾病病理生理机制，对干预椎间盘退变具有一定意义。患者炎性因子的血清学观察以及炎性因子的转归有待于进一步深入研究。作者贡献：胡炜、马信龙参与本研究设计，胡炜、袁建军、彭兵、张仁赞参与本研究实施，胡炜、马信龙、张学利参与本研究评估。研究为盲法评估。利益冲突：所有作者共同认可文章内容不涉及相关利益冲突。伦理问题：试验方案已经患者/家属知情同

34、意。文章查重：文章出版前已经过CNKI反剽窃文献检测系统进行3次查重。文章外审：文章经国内小同行外审专家双盲外审，符合本刊发稿宗旨。作者声明：第一作者对研究和撰写的论文中出现的不端行为承担责任。论文中涉及的原始图片、数据(包括计算机数据库)记录及样本已按照有关规定保存、分享和销毁，可接受核查。文章版权：文章出版前杂志已与全体作者授权人签署了版权相关协议。4 参考文献 References1 Smith M, Davis MA, Stano M, et al.Aging baby boomers and the rising cost of chronic back pain: Secular

35、trend analysis of longitudinal Medical Expenditures Panel Survey data for years 2000 to 2007.J Manipulative Physiol Ther.2013;36(1):2-11.2 Son S, Kim WK,Lee SG, et al.A comparison of the clinical outcomes of decompression alone and fusion in elderly patients with two-level or more lumbar spinal sten

36、osis. J Korean Neurosurg Soc.2013;53(1): 19-25.3 李强,赵建民,张元智,等.腰椎退变黄韧带中炎性细胞因子的表达J.中国脊柱脊髓杂志,2011,21(1):63-66.4 Takahashi N, Kikuchi S, Shubayev VI, et al. TNF-alpha and phosphorylation of ERK in DRG and spinal cord: insights into mechanisms of sciatica. Spine. 2006;31(5): 523-529.5 梁逸仙,周光辉,赵丽,等.电针联合CO

37、X-2抑制剂治疗腰椎间盘突出症的临床疗效及对IL-6和IL-8表达的影响J. 微循环学杂志,2015,20(2):61-63.6 Kaymaz M,Borcek AO,Emmez H,et al.Effectiveness of single posterior decompressive laminectomy in symptomatic lumbar spinal stenosis: a retrospective study. Turk Neurosurg. 2012;22(4):430-434.7 王靖,史立君,滕红林,等.兔椎间盘生理屏障损伤后髓核组织辅助性T细胞1/辅助性T细胞2

38、平衡漂移状态的研究J.中华实验外科杂志,2016,33(03):727-729.8 杨剑,康建平,冯大雄,等.IL-1和IL-6的表达增强且与盘源性下腰痛改良日本骨科学会(mJOA)评分负相关J.细胞与分子免疫学杂志,2016,32(01):88-91.9 苏世先,刘前前,江美林.脑脊液及血清疼痛物质相关指标与腰椎间盘突出的关系研究J.临床和实验医学杂志,2016, (03):232-234.10 姜世峰,申才良.腰椎Modic改变中炎性细胞因子的效应J.中国组织工程研究,2012,16(17):3213-3217.11 Ozaktay AC, Kallakuri S, Takebayashi

39、 T,et al. Effects of interleukin-1 beta, interleukin-6, and tumor necrosis factor on sensitivity of dorsal root ganglion and peripheral receptive fields in rats. Eur Spine J. 2006; 15(10):1529-1537.12 孙中仪,田纪伟.炎性因子与椎间盘退变的研究进展J.中华医学杂志,2013,93(41):3322-3324.13 张威.多种炎性因子在椎间盘突出的炎症机制中的作用研究进展J.医学综述,2013,19

40、(20):3685-3688.14 宋艳照,邓小柱.腰椎间盘髓核组织中TNF-、IL-1、IL-6的检测及意义J.山东医药,2009,49(50):87-88.15 William CW, Jamie B, Thomas JG, et al. Degenerative lumbar spinal stenosis : an evidence-based clinical guide line for the diagnosis and treatment of degenerative lumbar spinalstenosis. Spine. 2008;2: 305-310.16 钱胜君,张宁,陈维善.炎症因子与椎间盘退变J.国际骨科学杂志,2009,30(4):247-248,265.17 刘继巍,项玉萍.腰椎间盘突出类型与其疼痛程度相关性的临床观察J.中国实用医刊,2016,43(6):126-127.18 张琰,孟阳,赵卫东,等.腰椎管内静脉血清中炎性因子与腰椎管狭窄的关系J.中国组织工程研究,2014,18(26): 4229-4235.19 Nakamura T, Okada T, Endo M, et al. Angio