第十二章中药制剂分析ppt课件

1、,第十九章,中药及其制剂分析概论,学习内容,1、掌握中药及其制剂中待测成分的提取 分离与纯化方法 2、掌握中药及其制剂的杂质检查 3、熟悉中药制剂的分类与质量分析要点 4、熟悉中药制剂分析的一般程序 5、熟悉中药制剂常用的定量分析方法 6、熟悉中药指纹图谱研究技术,定义 中药：以中医药学理论体系的术语表述其性能、功效和使用规律，并且只有当按中医药学理论指导其临床应用的传统药物，才可称之为中药。 中药制剂（中成药）：用中药为原料，按中医药学理论基础配伍和组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂。 中药分析：以中医药理论为指导，应用现代分析方法，研究中药材和饮片、提取物和中药制剂质量的一门

2、学科，是药物分析学科中一个重要的组成部分。,中药及其制剂在ChP2010中的新特点：,1.中国药典2010版已收载中药品种2165种，新增加1019种，修订634种，饮片标准大幅度增加。附录新增14个，修订47个。 2、中药饮片首次有了明确的定义和地位 ChP2010：饮片系指药材经过炮制后可直接用于中医临床或制剂生产使用的处方药品。 ChP2005仅收载饮片23个，而ChP2010收载饮片822个。,3、中药质量标准更符合中药特色。 （1）专属性鉴别：所有药材、饮片及含生药粉末的中药制剂都建立和修订完善了横切面或粉末显微鉴别项目，除矿物药外基本都建立和修订完善了薄层色谱鉴别项目。 （2）专属

3、性检测：由单一指标成分定性定量转向活性有效成分、多指标成分质量控制。 （3）中药色谱指纹图谱纳入标准。,4、应用现代新技术和方法 ChP2010一部新增了LC-MS、DNA分子鉴定技术和薄层-生物自显影技术等。 5、中药安全性评价更受重视 ChP2010对中药注射剂增加了重金属和有害元素限度标准，对用药时间长、儿童常用的品种增加了重金属和有害元素检查，对易霉变的桃仁和杏仁增加了黄曲霉素的检测。,第一节 概 述,一.中药特色与分析特点 (一)中医指导中药的生产和使用 中药是在中医理论指导下,用于预防,诊断和治疗疾病,并具有康复和保健作用的物质. 整体观和“君臣佐使”的原则 君药起主要治疗作用,是

4、必不可少的药物;臣药具有辅助君药起治疗作用;佐药和使药具有辅佐和调剂作用.,(二)中药及其制剂的质量有多环节多因素的影响 中药质量的影响因素 1.品种 2.不同产地,生长环境条件不同 3.采收季节 4.生长年限 5.用药部位 6.加工炮制 多种因素都会影响中药中有效成分(单个化合物或一类物质),同物异名,同名异物,重楼为百合科Paris polyphylla Smith. 的根茎又名七叶一枝花、蚤休、草河车。 拳参为蓼科Polygonum bistra L.的根茎又名草河车。,（三）中药及其制剂的成分有复杂多变的特点,1、单一植物中含有多类不同结构的多种成分 中药指纹图谱体现了中药化学成分的整

5、体和轮廓信息。,2、不同来源中药中的同一待测成分含量差异显著,（1）不同植物来源中药的相同成分含量差异显著,麻黄基源植物 麻黄碱含量 中麻黄 最低 草麻黄 居中 木贼麻黄 最高,生长环境、采收季节及部位差异,GAP 中药材生产质量管理规范,益母草 水苏碱 营养期含量 最高 益母草碱 营养期含量 最低,（2）不同产地中药的相同成分含量差异显著,（3）不同采收期中药的相同成分含量差异显著,（4）不同生长年限和不同用药部位中药的相同成分含量差异显著,不同部位人参皂苷的含量,部位 重量比(%) 总皂苷含量(%) 周皮 6.9 2.60 韧皮 46.6 3.04 木质部 46.5 0.31,五倍子 鞣质

6、（70%） 槐米 芦丁（20%） 长春花 长春新碱（百万分之一） 美登木 美登木碱（千万分之一）,各种有效成分在中药中含量相差悬殊,中药药效的发挥是多种成分协同作用的结果,成分复杂，而且大多数中药的有效成分尚不十分清楚。,中药制剂中杂质来源具有多途径的特点，应有针对性地进行控制,3、中药在煎煮炮制和制剂过程中化学成分有量和质的变化 中药在煎煮炮制和制剂过程中化学成分可能发生结合、分解而发生质和量的变化。,例,三黄泻心汤干浸膏,有效成分与浓缩干燥方法的关系(%),4.中药不同工艺和不同制剂中同一成分的质量标准有不同的要求,丸、散、片、锭、合、酒、酊、 膏、露、茶、栓、颗粒、糖浆等,剂型繁多，辅料

7、干扰大,蜡丸 蜂蜡 蜜丸 蜂蜜 糊剂 糯米粉、黄米粉 曲剂 发酵 胶剂 豆油、黄酒、冰糖,丸剂 胶剂 膏药 颗粒剂 滴眼剂 散剂 合剂 露剂 糖浆剂 软膏剂 片剂 酒剂 茶剂 滴丸剂 注射剂 锭剂 酊剂 搽剂 胶囊剂 滴鼻剂 栓剂 巴布膏剂 橡胶膏剂 气雾剂喷雾剂 煎膏剂（膏滋） 流浸膏剂与浸膏剂,二.中药制剂分类及分析要点,(一)中药材和饮片 中药材是中药生产的原料,饮片是药材经炮制后可直接用于临床或制剂生产的药品. 显微鉴别是药材和饮片的特色鉴别方法。 含量测定强调专属性，提倡和推广指纹谱和特征谱。,(二)植物油脂和提取物,植物油脂和提取物系指从植物、动物中制得的挥发油、油脂、有效部位和有

8、效成分。大部分用于中药制剂的原料。 分析方法和质量标准应围绕该类或该成分建立，强调方法的专属性，多种提取物均有指纹谱和特征谱标准。,(三)中药成方和单方制剂,指药材细粉或药材提取物加适宜的黏合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等,重(装)量差异,水分 (过多易霉变),微生物限度,检查项目,显微鉴别,显微鉴别（含药材细分）,溶散时限,水 大蜜丸、小蜜丸、浓缩蜜丸 15.0% 水蜜丸、浓缩水蜜丸 12.0% 分 水丸、糊丸、浓缩水丸 9.0%,含量测定：选择君药、贵重药、毒性大等药物中的成分测定，注意蜂蜜等辅料的影响,一种或多种药材混合制成的粉末状制

9、剂，分内服和外用散剂，含量测定：需将有效成分提取出来后再进行，方法可同药材。,粒度 外观均匀度 水分 装量差异 无菌 微生物限度,药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂；含量测定常用HPLC法。,粒度 水分 溶化性 装量差异 微生物限度,合剂系指饮片用水或其他溶剂，采用适宜方法提取制成的口服液体制剂,ChP2010规定： 合剂不得有酸败、异臭、产生 气体或其他变质现象。（常含有糖类、蛋白质等）,酒剂,酊剂,药材用蒸馏酒提取制成的澄清液体制剂,药物用规定浓度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液体制剂,一般检查项目,注射剂,注射剂指药材经提取、纯化后

10、制成的供注入体内的溶液、乳状液及供临用前配制成溶液的粉末或浓溶液的无菌制剂。 一般检查项目：同“注射剂” 需制定中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。 中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南（试行）,药材提取物加药材细粉或药材细粉与适宜辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的制剂，分为浸膏片、半浸膏片和全粉片,硬胶囊剂 软胶囊剂 肠溶胶囊剂,9.0%,气体制剂,气雾剂：药材提取物、药材细粉与适宜的抛射剂共同封装在具有特制阀门装置的耐压容器中，使用时借助抛射剂的压力将内容物喷出呈雾状、泡沫状或其他形态的制剂。,喷雾剂：不含抛射剂，借助手动泵的压力或其他方法将内容物以雾状等形式喷出的制剂。,三、

11、中药分析用样品制备方法,取样,鉴别,含量测定,检查,提取,纯化,取样原则：代表性，均匀、合理 1.药材：5件，逐件取；5-99件，随机取5件；100-1000件，按5%比例取；超过1000件的超出部分按1%比例取，贵重药材都逐件取。 2.至少在2-3个不同部位取样。 3.药材和制剂所取量至少为所需量的3倍。,1.粉状中药制剂：100g 2.液体中药制剂：200ml 3.固体中成药：200片 4.注射剂：配制后取样；安瓿取样量为200支,（二）样品制备,1.样品提取 （1）超声提取法：利用超声波的助溶作用进行提取简便，省时，提取率高,原理 超声波在液体中以疏密相间的形式向物体辐射，出现“空化”现

12、象（气泡的形成、产生及破裂现象），形成超过1000个大气压的冲击力,样品置有机溶剂中加热回流的提取方法,通过更换溶剂，使提取更完全,样品置有机溶剂中加热，蒸发 的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法,利用溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解度的不同，使物质从一种溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组分提取出来的方法,正丁醇 用于皂苷类,醋酸乙酯 用于黄酮类,氯仿 用于生物碱类,乙醚、石油醚 用于挥发油,萃取溶剂的选择,酸性成分 比其pKa低12个pH单位,碱性成分 比其pKa高12个pH单位,仪器和提取次数,酒剂和酊剂先挥去乙醇,分液漏斗,鉴别1次,含量测定 3 4次,防止和消除乳化,静置； 补加溶剂（乙醚或氯

13、仿） 加乙醇 加无机盐或饱和溶液 调水相pH 离心或抽滤 加热 超声,适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分的测定,麻黄碱、槟榔碱、丹皮酚、挥发油,（SFE法）,当压力和温度超过气体的临 界点时所形成的单一相态,超临界流体 Supercritical Fluid,三相点,临界点,超临界流体,常用的超临界流体 物质 临界温度 临界压力 优点 （） （KPa） CO2 31 7390 较低的临界温 度、惰性、无 毒、纯净、价廉 N2O 36 7290 NH3 132 11300,超临界二氧化碳,CO2临界温度和压力都较低，易于工业化。 CO2不可燃、无毒、化学稳定性好、易分离，不会 产生副反应并且廉

14、价易得 CO2来源于化工副产物，应用过程中易于回收,能够 减少温室气体的排放。 超临界CO2的溶解能力可通过流体的压力来调节。 超临界CO2处理后的产物易纯化、无溶剂残留。 超临界CO2对高聚物有很强的溶胀和扩散能力。 超临界CO2对含氟和硅聚合物具有优良的溶解性。,超临界二氧化碳的应用萃取,萃取原理,超临界流体具有选择性溶解物质的能力，并随着临界条件（T，P）而变化。超临界流体可从混合物中有选择地溶解其中的某些组分，然后通过减压，升温或吸附将其分离析出。,超临界流体萃取的应用,医药工业,化学工业,食品工业,化妆品香料,中草药提取 酶，纤维素精制,金属离子萃取 烃类分离 共沸物分离 高分子化合

15、物分离,植物油脂萃取 酒花萃取 植物色素提取,天然香料萃取 化妆品原料提取精制,（1）极性小，分子量小的物质 超临界CO2直接萃取，20-70，8-40MPa （2）极性大，分子量适中的物质 超临界CO2 + 共溶剂（用量在5%以下） （3）极性大，分子量大的亲水化合物 超临界CO2 + 表面活性剂 + 水 （超临界流体包水核的微乳液体系）,超临界流体萃取的方法,SFE 工艺流程,溶剂萃取和超临界萃取的对比,萃取：利用药物与杂质溶解性能的不同进行分离,保留测定组分在柱上，洗去杂质，再用适当溶剂洗下组分,保留杂质于柱上,第二节中药鉴别 一.性状鉴别:形状,大小,色泽,表面特征、质地、折断面特征,

16、气味等. 二.显微鉴别：显微化学反应鉴别法:利用显微镜来观察药材及含药材粉末的中成药的组织结构、细胞形状以及化合物的特征，以鉴别中药的真伪。,1、水牛角浓 缩粉,2、麝 香,3、珍珠,4、朱砂,5、 雄黄,6、黄连,7、栀子,8、郁金,9、黄芩,安宫牛黄丸,三.理化法鉴别 根据中药及其制剂中所含主要化学成分的理化性质，采用物理、化学或物理化学的方法进行鉴别，从而判断其真伪。干扰多，现多被薄层色谱法代替。 1.微量升华 2.化学鉴别法:颜色反应及沉淀反应等,显色、荧光,鉴定有临床疗效的已知成分,黄连 小檗碱（抗菌消炎） 麻黄 麻黄碱（支气管哮喘） 乌头 乌头碱（毒性） 洋地黄 强心苷（强心） 延

17、胡索 延胡索乙素（镇痛）,四.色谱鉴别：薄层色谱法TLC. HPCE、PC、GC、HPLC,TLC法应用最多(Rf、颜色、荧光）,GC法 适用于含挥发性成分的药物,HPLC法常与含量测定同时进行,阳性对照: 将要鉴别的药材按制剂工艺处理， 再按鉴别方法提取的溶液,阴性对照:把制剂中要鉴别的药材除去，用剩下的各味药按制剂工艺处理，再按鉴别方法提取的溶液,O O O O O O O O O O 阴 样 阳 对 品 对,例,大补阴丸:黄柏的TLC法鉴别,例,薄层板的选择,硅胶G板（可加0.3% 0.5% CMC-Na） 多用,氧化铝板 常用于生物碱类药物,聚酰胺板 常用于黄酮类及酚类药物,纤维素板

18、常用于氨基酸类药物,水分 总灰分和酸不溶性灰分 重金属 残留农药 有关杂质,一 .主要项目,杂质来源及检查意义,水分 结块、霉变或有效成分 水解,灰分 控制药物本身及泥土、 沙石等无机杂质,砷盐 剧毒，常由除草剂、杀虫剂或化肥引入,重金属 环境污染和使用农药引入,残留农药 有毒,烘干法（不含或少含挥发性成分） 甲苯法 （含挥发性成分） 减压干燥法（含挥发性成分贵重药） GC法：TCD, 外标法,酸不溶性灰分的测定,总灰分的测定,干法破坏（ChP）,湿法破坏（USP）,GC法,分类: 1)有机氯类: 六六六 ,滴滴涕,五氯硝基苯等 2)有机磷类: 对硫磷,甲基对硫磷,乐果 氧化乐果,甲胺磷 ,敌

19、敌畏 3)拟除虫菊酯类: 氯氰菊酯,氰戊菊酯,溴氰菊酯 其它: 氨基甲酸酯类,二硫代氨基甲酸酯类,无机农药,苯氧羧酸类除草剂,六.有关杂质:即有关物质检查 七.其他 1.黄曲霉素测定:HPLC 2.乙醇测定:GC和蒸馏 3.膨胀度测定 4.酸败度测定,一.含量测定 根据中医药理论，选择相关有效成分或有效成分群，建立含量测定项目和方法，对控制药品质量，保证药材批间差异或制剂的相对稳定性，仍然具有重要的意义。,(一)测定项目的选定原则,1 首选君药及贵重药、剧毒药建立 含量测定方法 其次考虑臣药及其他味药 3 有效成分明确的，可选有效成分 4 成分类别清楚的，可测某一类总 成分的含量,5 检测成分

20、应归属某单一药味 6 检测成分应与中医用药的功能主 治相近 7 确无法含量测定的，可测定总固体量,RP - HPLC,IPC,反离子: 氢氧化四丁基铵,反离子: 烷基磺酸盐,外标法和内标法,离子对色谱法（IPC） 极性流动相中加入离子对试剂， 与被分析离子生成中性离子对，从而 增加在非极性固定相中的溶解度，使 分配系数增大 检测器:UVD,PDAD,ELSD等,2. 气相色谱法 GC；GC-MS,可测定挥发油和挥发性成分。 如冰片、桉叶素、樟脑、厚朴酚、丁香酚、龙脑等。,测定薄层板上斑点对单色光的吸 收或反射的强度而进行定量的方法,特点 A、分离效果好 B、适用于无法用UV、HPLC 法测定的

21、组分 C、准确度、精密度低于HPLC,（1）薄层色谱条件,分离好 不拖尾,（2）检测方法,吸收测定法 荧光测定法,反射法 透射法,（3）扫描方式,单波长 双波长,线性扫描法 锯齿扫描法,外标法 内标法,（4）散射参数SX,薄层板的散射使,（1）薄层板 : 均匀、平整,（2）点样量 : 准确,（4）显色剂: 均匀、适当,（5）保护斑点: 用相同大小洁净玻璃 盖住薄层板，并用透明胶纸封住边缘， 以起固定和隔绝空气作用,（3）斑点: 应完全分离，不拖尾,（三）中药及其制剂的多指标成分的含量测定,中药及其制剂中含有众多成分，仅以单一成分作为质量控制指标不能全面反映药材质量，因此，目前大都选择多指标成分

22、进行含测。,（四）中药一测多评的含量测定方法,适用于对照品难得、制备成本高或不稳定的情况下的同类多成分的同时测定。 中药中常含同一类别的多种成分，可考虑在大量实验基础上，计算出各成分吸收系数间稳定的相关数值，仅测定1个有对照品的目标成分，通过计算得出其他待测有效成分的含量，这种质量控制方法称为“一测多评” 法。,二 中药指纹图谱(traditional Chinese medicine fingerprint),1.定义： 中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标定该中药材或中药制剂特性的共有峰的图谱,2. 指纹图谱的基本属性,整体性: 将指纹图谱作为一个整体来分析和比较

23、它的综合特征以达到鉴别的目的。 模糊性: 强调分析、比较指纹图谱的相似性，而不是完全相同。 不需要清楚每一个组分的化学结构； 不需要对每一个组分都进行定量； 只要求不同批号的同一种药品的指纹图谱保持一致。,3.类别:化学,光谱,色谱,DNA等 一个“系统”的指纹图谱所反映的化学成分应包括中药有效部位所含大部分成分的种类，或指标成分的全部。 如：高良姜中的有效成分是黄酮类和挥发油，则其指纹图谱应针对这两类成分分别分析，以达到系统、全面的目的。,德国公司对于治疗抑郁症药物连翘一直采用指纹图谱控制质量。,美国FDA最近几年制定的植物草药指南中已经明确把指纹图谱作为这类混合物质群的质量控制方法。,美国FDA：允许草药保健品申报资料可以提供色谱指纹图谱 WHO：1996年草药评价指导原则中规定，如果草药的活性成分不明，可以提供色谱指纹图谱以证明产品质量的一致。 欧盟：在草药质量指南中称，单靠测定某有效成分考察质量的稳定性是不够的，因为草药及其制剂是以整体为活性物质。在药品申请注册表格中植物药制品的“药物专家报告”要求通过已知的具有治疗作用的活性物质对原料、中间体及成品进行标准化控制。,我国药品监督管理局 2000 年正式发布中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行），