荧光定量PCR原理及操作步骤ppt课件_第1页
荧光定量PCR原理及操作步骤ppt课件_第2页
荧光定量PCR原理及操作步骤ppt课件_第3页
荧光定量PCR原理及操作步骤ppt课件_第4页
荧光定量PCR原理及操作步骤ppt课件_第5页
已阅读5页，还剩17页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、荧光定量PCRreal time-PCR,1,定量PCR反应体系,2,定量与常规PCR的差别,常规PCR技术： 对PCR扩增反应的终产物进行定量及定性分析,定量PCR技术： 通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析,三个关键词： 实时，定量，荧光,3,PCR分四个阶段,4,如何定量？,Ct值的概念 Ct值的定义是PCR扩增过程中，荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的阈值所对应的循环次数。,5,定量原理,确定初始模板的浓度,初始 DNA量越多, 荧光达到某一值（域值）时所需要的循环数越少 Log浓度与循环数呈线性关系，根据样品扩增达到域值的循环数就

2、可计算出样品中所含的模板量,6,7,起点定量与终点定量,8,荧光化学,SYBR Green 1,TaqMan,9,TaqMan,10,SYBR Green I 工作原理,。 SYBR Green 1 结合到双链DNA的小沟部位 SYBR Green 1 染料只有和双链DNA结合后才发荧光,未结合SYBR Green 1 dye,变性: 无荧光信号,11,SYBR Green I 应用范围,起始模板浓度定量 融解曲线分析 -可区分单一产物、变异产物、多种产物和（或）引物二聚体 基因型分析,12,SYBR Green I 优点,SYBR Green I 缺点,13,14,PCR程序指南,15,UNG酶使用原理,16,金牌Tag酶活性,17,参比荧光：管家荧光ROX,18,ROX校正效果

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论