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文档简介
3、选择现代生命科学主题2.2细胞工程,2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体。通过选择“西红柿-土豆”(理想图),长期的实验,科学家们利用植物细胞杂交技术获得了“西红柿-土豆”植物。杂交植物,融合原生质体AB,细胞壁再生,去分化,愈伤组织,再分化,过程,植物细胞a,原生质体b,原生质体a,杂交细胞AB,去壁,去壁,人工诱导,植物细胞b,植物体细胞杂交技术,纤维素酶,果胶酶等,物理方法:离心,振动,电击等化学方法:聚乙二醇等试剂和筛选,如果把奶牛细胞与植物细胞杂交,得到绿色的小奶牛,难道不能晒太阳挤牛奶吗?动物细胞也能融合吗?异想天开,动物细胞的全能性随着动物细胞的分化程度逐渐被抑制,分化潜力逐渐减弱。动物细胞培养技术,动物细胞融合技术,单克隆抗体技术的准备,动物细胞核移植技术,动物细胞工程中常用的技术,考试问题,1 .植物目标细胞杂交时,首先用什么方法去除细胞壁?酶解,如纤维素酶或果胶酶,2 .动物细胞融合时需要脱壁处理吗?怎么了?因为动物细胞没有细胞壁,所以不需要。3.植物细胞杂交诱导原生质体融合的一般方法是什么?离心、振动、电击等物理方法;聚乙二醇等化学方法,4 .动物细胞融合可以使用上述两种方法吗?还有其他方法吗?5.植物体细胞杂交原生质体融合后,需要经过组织培养形成完整的杂交个体,动物细胞融合后能否形成杂交动物个体?不能只形成杂交细胞,分散胰蛋白酶可用的细胞。一、动物细胞融合技术,一。概念:动物细胞融合(cellfusion),也称为细胞杂交,是指两个或更多动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后具有两个或多个细胞遗传物质的单核细胞,称为混合细胞。结果: ,两个以上的动物细胞一个杂交单核细胞,2,诱导方法,物理方法:离心,振动,电击,化学方法:聚乙二醇(PEG),生物法:惰性病毒,病毒表面包含的糖蛋白和一些酶与细胞膜的糖蛋白起作用,使细胞相互结合,细胞膜的蛋白质分子和一些酶仙台病毒,感染性丧失,维持融合活性,(诱导细胞融合),用惰性病毒诱导动物细胞融合过程,用惰性病毒颗粒粘附在细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿透,细胞膜连接,细胞融合形成单核杂交细胞,原则:细胞膜具有一定流动性,有丝分裂,4,过程:注意:动物细胞,3,原则:细胞膜流动性,6,应用:已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤及新生物品种培育等的重要手段。特别是单克隆抗体是使用杂交瘤技术制造的。5,意义:突破性杂交方法的限制,实现了远距离杂交(种间,属,科,动植物之间)。,植物体细胞杂交和动物细胞融合比较,细胞膜流动性,细胞全能,细胞膜流动性,去除细胞壁后原生质体融合,在细胞分散的情况下诱导细胞融合,物理(离心,振动,电刺激)化学(peg),物理,化学惰性病毒,新品种.1、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,准确地说,诱导a .融合的方法完全相同。b .使用的技术手段完全相同。c .使用的原理完全相同。d .能形成杂交细胞。d,2,关于动物细胞融合。a .动物细胞融合后,原有两个以上动物细胞遗传信息的双核或多核细胞称为杂交细胞b。原理是打破细胞的可塑性c .生殖障碍,使之成为遥不可及的现实。D .一般诱导因素包括聚乙二醇、惰性病毒、离心等,3 .克服动物细胞融合目的中最重要的是a .远杂交不相容B .单克隆抗体制造c .新品种D .杂交细胞生产,D,B,1 .抗体是什么?2.主要分布在哪里?3.抗体由某种细胞产生,抗体由抗原刺激而产生,是一种具有免疫功能的球蛋白,可以与该抗原特定地结合。第二,主要分布在血清中,分布在组织液及外部分泌液中的单克隆抗体技术的制备。每个血浆细胞只有一种抗体,4 .传统抗体的生产方法和缺陷?反复注入抗原,不能无限增殖,低纯度抗体特异性下降,1,设计:b淋巴细胞分泌特定抗体的小鼠骨髓瘤细胞可以无限增殖,milstein和corer,杂交细胞,2,制备过程:继承双亲细胞的遗传物质:(a)单克隆抗体的制备,可以无限增殖,免疫后b淋巴细胞,杂交细胞,单克隆抗体。将抗原(绵羊红细胞)注入鼠标,产生免疫的b淋巴细胞、鼠标骨髓瘤细胞、融合、惰性病毒、peg、多种杂交细胞、选择性培养基、杂交细胞、抗体阳性检查、足够的量、特定抗体的杂交细胞群、培养液,在制造单克隆抗体中,两种筛选第一种筛选是通过选择培养基去除未融合的b淋巴细胞、骨髓瘤细胞和BB融合、肿瘤融合细胞,筛选杂交瘤细胞。二次筛选是通过细胞培养检测出产生特定抗体的异种杂交瘤细胞作为相应抗原的方法。从身体上提取免疫的b淋巴细胞时,产生了很多种,杂交细胞形成很多种,需要筛选出产生特定抗体的异种杂交瘤细胞。骨髓瘤细胞,免疫小鼠,(培养基选择),(抗体检查),优点:特异性,高灵敏度,高产。作为诊断试剂:正确识别各种抗原物质,与特异性结合,使用,携带药物:“生物导弹”,疾病治疗:主要用于癌症治疗,(2)单克隆抗体,在不损伤细胞的情况下减少药物剂量,功效高、毒性低的新药,优点:准确、高效、简单、毒性小,动物细胞融合技术,单克隆抗体技术的制备,过程:其他动物细胞,杂交细胞,原理:应用:主要用于准备。准备:细胞和骨髓瘤细胞融合,筛选细胞动物细胞培养提取单克隆抗体,应用:疾病治疗或药物运输。、诱导剂、细胞膜流动性、单克隆抗体、b淋巴、杂交、生物导弹、教室总结:1,单克隆抗体是()a .单骨髓瘤细胞增殖引起的抗体b .单b淋巴细胞增殖引起的抗体c .单杂交细胞增殖引起的非常单抗体d .单抗体通过克隆产生很多抗体,c,2,“生物导弹”是()a .单克隆抗体b .杂交瘤细胞c .在单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,用特定培养基筛选杂交瘤细胞,在该培养基中无法存活和增殖的细胞()淋巴细胞B淋巴细胞自身融合细胞,小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交细胞a .B .c .d .c .4 .生产单克隆抗体时,将筛选杂交细胞的试剂放入培养基中,试剂的作用是:选择性抑制a .骨髓瘤细胞的DNA克隆b .淋巴细胞的protooncogene能抑制活性c .淋巴细胞的DNA克隆d .杂交瘤细胞的核糖体中所有蛋白质的合成,a .5 .在现代生物技术的应用中,需要检查和审查的是(双选择)a .在植物的体外组织培养,大规模培养优良品种b .将老鼠的骨髓瘤细胞与b淋巴细胞融合,制造单克隆抗体c .利用人的皮肤细胞进行体外培养,解决自体移植皮肤的不足问题d .将抗昆虫基因移植到植物细胞,培养具有抗昆虫特性的新植物,植物组织培养技术,动物细胞融合技术,以下照片是一位同学根据杂交技术生产破伤风菌抗体的实验计划,单克隆抗体,b淋巴细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,第一,系,10。因为在没有将抗原注入鼠标的情况下,无法获得产生这种抗体的效果b细胞。任务:创新设计 P30至34,A,b细胞为动物细胞,A细胞,b细胞,c细胞,d细胞,(1) a细胞为骨髓瘤细胞,b细胞为淋巴细胞的话,d细胞称为细胞,d细胞连续分裂为d细胞,产生很多细胞的过程称为“。杂交,克隆,练习,(2)D细胞中产生的抗体的化学性质是该物质的制造地点通过控制合成,合成过程中有两个重要阶段:球蛋白,核糖体,基因,转录,翻译,(3)D细胞产生的抗体起作用。比血清抗体优越的是高的,免疫,特异性,敏感性。(4)如果a是人类细胞,则b是老鼠细胞,细胞膜的蛋白质标记为同位素,b没有标记,c细胞时的检查结果表明整个细胞中有一半具有放射性,另一半没有。如果d细胞时的检查结果表明整个细胞都有放射性,请说明原因。
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