溶血实验和有机磷中毒

第八次实验,红细胞渗透性和化学性溶血实验有机磷酸酯类中毒及其抢救,实验目的实验原理实验步骤实验后处理注意事项,溶血实验,红细胞渗透脆性：红细胞在低渗溶液中可发生破裂、解体的特性。,红细胞渗透抵抗力：红细胞耐受一定浓度的低渗溶液而不发生破裂、解体的能力。,最小抵抗力（RBC渗透脆性）：开始出现溶血的溶液浓度。,最大抵抗力：完全溶血的溶液浓度。,实验原理,红细胞的化学性溶血：,有机溶剂、酸、碱破坏红细胞膜的疏水键和膜蛋白上的次级键，溶解膜脂质，使膜蛋白质变性，造成红细胞溶解。,1.制备红细胞悬液,取抗凝动脉血2ml,混匀离心弃上清夜（配平、对称放置、5min、1500r/min）加NS洗涤2次（离心弃上清夜）NS配成30%和3%红细胞悬液,实验步骤,2.渗透性溶血试验,标记1-10号试管依次加入不同浓度的NaCl溶液滴入30%混悬液1-2滴，轻轻混匀静置30min后判断各试管溶血现象,3.化学性溶血试验,标记11-14号试管依次加入不同试剂1ml11-NS12-氯仿13-HCl14-NaOH滴入3%混悬液2ml，轻轻混匀静置30min后判断各试管溶血现象,4.结果判断,不溶血：上层浅黄色或白色透明下层红色不透明,部分溶血：上层红色透明下层红色不透明,完全溶血：管内液体完全红色透明,不溶血,部分溶血,完全溶血,1.完成表610、11,2.分析各处理因素对红细胞膜的影响及其原理，写出实验报告。,实验后处理,1.红细胞渗透脆性实验为定量指标，氯化钠浓度的配制要求准确。2.向试管中滴加红细胞混悬液时要靠近液面，轻轻滴入，以免冲击力太大使红细胞破损，造成溶血假象。3.滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀，切勿剧烈震荡。静置一段时间后在光线明亮处观察。,注意事项,有机磷中毒,实验目的实验原理实验步骤实验后处理注意事项,中毒的原理和症状,中毒的原理:,外周作用（M、N样作用）中枢作用（先兴奋后抑制）,有机磷酸酯类为难逆性抗胆碱酯酶药,中毒的症状:,实验原理,解毒药作用原理,阿托品:,小剂量阻断M受体，大剂量阻断N1受体，可兴奋呼吸中枢,碘解磷定:,复活胆碱酯酶与游离的有机磷酸酯类结合,1.家兔，称重，观察并记录其正常体症（R、瞳孔大小、唾液分泌、肌张力、肌震颤等）。2.造模：耳缘静脉注射3.5%敌百虫(3ml/kg)，观察并记录各种指标的变化。3.1.3.5排先静脉注射阿托品(1ml/kg)，记录各指标的变化；10min后再静脉注射碘解磷定(2ml/kg)，记录各指标的变化。4.2.4.6排给药相反。,实验步骤,观察指标,瞳孔大小：尺测量其直径（mm）唾液分泌：-（无）、+（少）、+（较多）、+（很多）大小便：同上骨骼肌活动：-（无）、+（局部）、+（全身）+（全身并站立不稳或瘫卧桌上）,1.完成表7-9。,2.比较不同给药顺序解救效果的差异，分析原因，写出实验报告。,实验后处理,1.测量瞳孔时应注意光线强弱对瞳孔大小的影响。实验前后光源的一致性。2.敌百虫溶液有较强的刺激性，静脉注射时要避免药物外漏。3.事先准备好抢救工作，中毒症状明显后立即解救。,注意事项,红细胞渗透脆性的临床意义,小结,红细胞脆性增加：遗传性球形红细胞增多症，自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多者。,红细胞脆性减低：见于各型海洋性贫血，包括轻型，重型海洋性贫血及血红蛋白增多病。缺铁性贫血，镰状红细胞贫血以及其它红细胞面积/体积比例增大情况，如肝病等。,机体胆碱能神经纤维及其受体分布,1.全部交感神经和副交感神经的节前纤维（N1-R）,2.运动神经（N2-R）,3.全部副交感神经的节后纤维（M-R）,4.极少数交感神经节后纤维（M-R）,体内乙酰胆碱(Ach)神经递质的生理作用,M样作用：心率减慢，血压下降支气管、胃肠道平滑肌收缩瞳孔括约肌、睫状肌收缩（瞳孔缩小）腺体分泌增加,N样作用：神经节兴奋肾上腺髓质分泌增加骨骼肌兴奋(收缩),Ach作用的消失,N样症状：肌束颤动，重者呼吸肌麻痹,中枢症状：兴奋、不安、谵语等,优点：能迅速消除M样症状，也能解除一部分CNS中毒症状，大剂量还可阻断神经节作用,解毒药效果比较,阿托品:,缺点：对N2受体无效，不能制止骨骼肌震颤，也无复活胆碱酯酶作用，疗效不易巩固。,优点：能迅速制止肌束颤动，对植物神经系统功能的恢复较差，对CNS中毒症状似有疗效,碘解磷定:,缺点：不能直接对抗体内积聚的Ach作用，消除M样症状，不能单用，应与阿托品合用。,治疗措施,常规治疗措施清洗、洗胃、导泻特效