TB工艺规程.doc

文件类型工艺规程版 本 号V3.0文件名称结核抗原（TB）制备工艺规程文件编号KY-STP-005编 写 人审 核 人批 准 人起草日期审核日期批准日期颁发部门质量管理部文件生效日期分发部门科研部颁发份数1份受控编号目 录1名称、组成及用途2生产工艺流程图3液体配制4本产品工艺过程中所需的SOP名称及要求5抗原原料的质量标准和检验方法及贮存注意事项6设备一览表 7综合利用和三废处理结核抗原（TB）生产工艺规程 1产品名称、组成及用途 名称：结核抗原生产工艺规程 组成及用途： 结核P38蛋白，作为胶体金生产的原料。2生产工艺流程图制备工艺流程图化学试剂称 量LB液体培养基培养，诱导接种超声，破碎纯化3.液体配制3.1 LB液体培养基的配制：3.1.1标准配方： 胰化蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g 纯化水定容至1000.0ml3.1.2配制方法： 按照标准配方内容准确称取胰化蛋白胨、酵母提取物、氯化钠并加纯化水800.00ml，搅拌使充分溶解后，使用纯化水定容至1000.00ml，混合均匀高压灭菌后，室温保存备用。3.2 Tris缓冲液的配制：3.2.1标准配方：TRIS碱 6.05 g浓盐酸 适量纯化水定容至1000.00ml3.2.2配制方法：按照标准配方内容准确称取TRIS碱6.05 g，加纯化水800.00ml，搅拌使充分溶解后，加入浓盐酸适量，搅拌均匀，使用数显酸度计测量液体的PH值为8.0左右，使用纯化水定容至1000.00ml，室温保存备用。3.3尿素的配制3.3.1标准配方： 尿素 480gTRIS碱 5g浓盐酸 适量纯化水定容至1000.00ml3.3.2配制方法：按照标准配方内容依次准确称取尿素、TRIS碱，加纯化水200.00ml，搅拌使充分溶解后，加入浓盐酸适量，搅拌均匀，使用数显酸度计测量液体的批PH值为8.0左右，使用纯化水定容至1000.00ml，过滤后液体室温保存备用。3.4碳酸缓冲液的配制：3.4.1标准配方： 碳酸钠 1.59g碳酸氢钠 2.93g纯化水 800.00ml纯化水定容至1000.00ml3.4.2配制方法：按照标准配方内容准确称取各试剂组分，加纯化水800.00ml，搅拌使充分溶解后，使用数显酸度计测量液体的批PH值为9.49.5，定容至1000.00ml，室温保存备用。3.5 硫酸卡那霉素的配制：3.5.1标准配方：硫酸卡那霉素 1g 纯化水定容至100.00ml3.5.2配制方法：按照标准配方内容准确称取硫酸卡那霉素，加入纯化水100.00ml搅拌充分溶解后，用0.22um的滤器过滤除菌，-20保存备用。3.6 磷酸缓冲液的配制：3.6.1标准配方： 氯化钠 80g氯化钾 2 gNa2HPO412H2O 29 gK2HPO4 2 g纯化水定容至1000.00ml3.6.2配制方法：准确称取各组分，加入纯化水900.00ml，搅拌充分溶解后定容至1000ml，测定溶液的PH应为6.97.0，室温保存备用。3.7 IPTG的配制：3.7.1标准配方：IPTG 2.383 g纯化水定容至100.00ml3.7.2配制方法：按照标准配方内容准确称取IPTG，加入纯化水100.00ml搅拌充分溶解后，用0.22um的滤器过滤除菌，-20保存备用。3.8 咪唑的配制：3.8.1标准配方：咪唑 2.72g纯化水定容至 200.00ml3.8.2配制方法：按照标准配方内容准确称取咪唑，加入纯化水150.00ml搅拌充分溶解后，用纯化水定容至200.00ml，室温保存备用。4本产品工艺过程中所需的SOP名称名 称名称LB液体培养基配制的标准操作规程BS210S型电子分析天平仪的标准操作规程硫酸卡那霉素溶液配制的标准操作规程81-2型电子恒温磁力搅拌器的标准操作规程100mmol/L IPTG溶液配制的标准操作规程HC-TP11B-5型托盘天平的标准操作规程0.05mol/l Tris-HCl缓冲液配制的标准操作规程RC5C型高速离心机的标准操作规程8mol/l尿素溶液配制的标准操作规程GL20A型大容量离心机的标准操作规程0.2 mol/L咪唑溶液配制的标准操作规程JY92II型超声波细胞粉碎机的标准操作规程0.05mol/l碳酸缓冲液配制的标准操作规程TZ-2EH台式恒温振荡培养箱的标准操作规程0.01 mol/l 磷酸缓冲液配制的标准操作规程JJT-7B型洁净工作台的操作规程结核（TB）抗原制备的标准操作规程DYY-5型稳压稳流电泳仪的标准操作规程8823A型紫外检测仪的标准操作规程5抗原原料的质量标准和检验方法及贮存注意事项 5. 1 原辅料质量标准和检验方法原辅料质量标准和检验方法如下列文件： 名 称结核P38质量标准 5.2产品贮存方法及有效期产品的储存条件：-20。5.3主要化学试剂 液体名称物料名称来源规格或纯度LB培养基（1000ml）胰化蛋白胨OXOID LTD500g/瓶AR酵母提取物OXOID LTD500g/瓶AR氯化钠北京精求化工有限责任公司500g/瓶ARTris缓冲液（1000ml）TRIS碱北京欣经科生物技术有限责任公司5kg/瓶AR浓盐酸北京化学试剂公司500 ml /瓶AR8M尿素（1000ml）尿素北京刘李店化工厂500g/瓶 ARTris北京欣经科生物技术有限责任公司500ml/瓶 AR浓盐酸北京化学试剂公司500 ml /瓶AR碳酸缓冲液(1000ml)碳酸钠国药集团化学试剂有限公司500g/瓶AR碳酸氢钠国药集团化学试剂有限公司500ml/瓶 AR硫酸卡那霉素(100ml)硫酸卡那霉素北京欣经科生物技术有限责任公司25g/瓶AR磷酸缓冲液(1000ml)氯化钠北京精求化工有限责任公司500g/瓶AR氯化钾北京精求化工有限责任公司500g/瓶AR十二水磷酸氢二钠北京化学试剂公司500g/瓶AR磷酸二氢钾北京化学试剂公司500g/瓶ARIPTG(100ml)IPTG北京欣经科生物技术有限责任公司10g/瓶AR咪唑(200ml)咪唑北京市昌平石鹰化工厂100g/瓶AR6 设备一览表： 设备名称型号规格洁净工作台JJT-7B型台式恒温振荡培养箱TZ-2EH型 大容量离心机GL20A型高速离心机RC5C型超声波细胞粉碎机JY92II型电子分析天平仪BS210S型电子恒温磁力搅拌器81-2型托盘天平HC-TP11B-5型紫外检测仪8823A型稳压稳流电泳仪DYY-5型7技术安全及劳动保护 7.1 技术安全7.1.2 各工序在操作前应检查电源、机器部件，加油润滑，试运转，正常后方能使用。如发现异常情况，应停止操作。7.1.3 操作设备必须严格遵守该设备的操作规程。7.1.4 机械电器设备均应根据不