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The apoptosisofcultured endothelialcellswasdetected byTUNEL techniques and flow cytometry.ResultsThe poptosisofcultured endothelial cellswas increasedby serum afterCPB. NAC(0.1,1mmol/L)inhibited the apoptosis ofcultured endothelial cells induced byCPBserum,whileNAC atthe concentration of10,100mmol/L increased the apoptosis.ConclusionProperconcentration ofNAC is important in preventing the endothelial cells from apoptosis induced byCPB serum.体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋Key words:vascular endothelium;cardiopulmonary bypass;N-acetyl-L-cysteine;apoptosis体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋体外循环导致全身炎症反应, N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)可补充细胞内还原型巯基库,对抗氧自由基的细胞损伤作用,从而缓解体外循环后全身炎症反应。既往研究证明,炎症反应时氧化应急可以诱导细胞凋亡,然而NAC对体外循环诱致的血管内皮细胞凋亡的影响尚少见报道。为了更好地保护体外循环后的血管内皮细胞,减轻血管内皮细胞损伤,本实验观察了体外循环血清孵育及NAC干预对培养血管内皮细胞凋亡的影响。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1材料与方法体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 1主要试剂、器材体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋RPMI1640(Gibco,美国),小牛血清、NAC(Sigma,美国),PCD凋亡检测试剂盒(德国宝灵曼公司), 2300型恒温CO2孵箱,流式细胞仪及真彩色医学图像分析仪等。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 2血清来源体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋研究对象为2006年3月在我院接受心脏手术的5例先天性心脏病患儿,体外循环前及体外循环结束时无菌分离血浆,离心,去纤维蛋白原,得血清, -70冷冻贮存备用。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 3人脐静脉血管内皮细胞培养及鉴定体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋采用姚磊等1介绍的胎儿脐静脉内皮细胞培养法。实验用融合后12 d的血管内皮细胞。内皮细胞的鉴定采用辣根过氧化物酶抗辣根过氧化物酶法(PAP法),检测因子抗原。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 4实验分组体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋CPB前血清孵育组;CPB后血清孵育组;含0. 1mmol/LNAC的CPB血清孵育组;含1 mmol/L NAC的CPB体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋血清孵育组;含10 mmol/L NAC的CPB血清孵育组;含100 mmol/LNAC的CPB血清孵育组。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 5内皮细胞凋亡的观察体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 5. 1细胞准备按20%的比例将体外循环血清与无血清的RPMI1640基础培养液混合成人血清培养基;待脐静脉内皮细胞呈现单细胞层,吸出含20%小牛血清的细胞培养液,以无血清的细胞培养液清洗2次,每孔分别加入体外循环前人血清培养液及含100、10、1、0. 1、0 mmol/L NAC体外循环后人血清培养基2. 0 m,l 37, 5% CO2孵育4 h。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 5. 2TdT介导的末端标记(TUNEL)的染色体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋标记采用德国宝灵曼PCD检测试剂盒参照说明书介绍的方法进行,在倒置显微镜下观察结果,每个样本观察5个不相重叠的视野,计数每个高倍镜下TUNEL标记阳性细胞与总细胞数之比(凋亡指数)。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 5. 3流式细胞仪检测细胞凋亡体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋分别收集各组细胞, PBS洗细胞2次,用预冷的70%乙醇固定, 4过夜,离心并将细胞重悬于1 mlPBS调整细胞浓度为5106/m,l加Rnase及PI,避光4染色30 min。流式细胞仪检测凋亡细胞的百分比,用CellQuest软件对结果进行分析。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1. 6统计学处理体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋结果以-xs表示,采用SPSS 10.0统计软件行单因素方差分析。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋2结果体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋2. 1细胞形态观察体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋倒置显微镜下观察可见CPB前血清组细胞紧密贴壁,呈铺路石状生长;CPB后血清孵育组可见较多细胞呈圆形,细胞膜空泡,核浓缩;含0. 1、1 mmol/L NAC的CPB血清孵育组见上述细胞较CPB后血清孵育组明显减少;含10、100 mmol/LNAC的CPB血清孵育组见上述细胞较CPB后血清孵育组有所增加,培养上清液中见较多散在的单个脱落细胞,体积缩小,细胞体致密。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋2. 2NAC对CPB血清致培养血管内皮细胞凋亡的观察体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋TUNEL法及流式细胞仪检测显示:体外循环血清孵育明显导致培养血管内皮细胞凋亡增加(P0. 01);含0. 1、1 mmol/LNAC CPB血清孵育组内皮细胞凋亡低于CPB后血清孵育组(P0. 05);含10、100 mmol/L NAC CPB血清孵育组内皮细胞凋亡明显高于CPB后血清孵育组(P0. 01)。表明体外循环可以导致血管内皮细胞凋亡增加,低浓度NAC对体外循环导致的血管内皮细胞凋亡有一定保护作用,高浓度NAC加重血管内皮细胞凋亡的发生。见图1,表1。A:CPB前血清孵育组;B:CPB后血清孵育组;C:含0. 1 mmol/LNAC CPB血清孵育组;D:含1 mmol/LNAC CPB血清孵育组;体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋E:含10 mmol/LNAC CPB血清孵育组;F:含100 mmol/LNAC CPB血清孵育组体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋图1CPB血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响(TUNEL100)体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋表1体外循环血清诱致培养血管内皮细胞凋亡及NAC体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋的影响(n=5,-xs)体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋组别TUNEL凋亡指数(% )细胞凋亡率(% )体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋CPB前血清孵育组4. 60. 3b3. 20. 3b体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋CPB后血清孵育组24. 43. 0 21. 40. 6体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋0. 1 mmol/LNAC血清孵育组17. 54. 1a18. 70. 5a体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1 mmol/LNAC血清孵育组16. 03. 0a15. 40. 6a体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋10 mmol/LNAC血清孵育组33. 91. 9b31. 50. 6b体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋100 mmol/LNAC血清孵育组58. 57. 7b48. 61. 1b体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋a:P0. 05,b:P0. 01,与CPB后血清孵育组比较体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋3讨论体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋本实验结果表明:体外循环后血清孵育的血管内皮细胞凋亡较体外循环前血清孵育明显增高,低浓度NAC在一定程度上减少血管内皮细胞凋亡,但高浓度NAC加重内皮细胞凋亡。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋体外循环中大量炎性介质的释放必然导致体外循环后全身炎症反应,对于婴幼儿患者和经历长时间转流的患者,严重的全身炎症反应容易引起术后多器官1327功能衰竭,危及患者生命2。N-乙酰半胱氨酸(NAC)体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋是含巯基化合物,易于进入细胞内,增加细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量3。NAC可补充细胞内缓冲体系中还原型巯基库,对抗氧自由基的细胞损伤作用。大量的实验的表明,NAC具有缓解全身炎症反应的作用4。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋细胞凋亡是一种具有形态学特点的细胞死亡形式,是细胞发育程序中的一个组成部分,往往是短暂的细胞活动过程中的最终结果,故被称为程序性死亡(PCD)。既往研究证明,氧化应激可以诱导细胞凋亡5。本实验中CPB血清孵育的血管内皮细胞凋亡指数较CPB前血清孵育明显增高,表明体外循环后的炎性因子激活可以导致血管内皮细胞凋亡增加。实验进一步探讨了具有抗炎作用的NAC对体外循环后血管内皮细胞凋亡的保护作用,结果表明NAC对血管内皮细胞凋亡的保护具有一定的剂量范围,低浓度NAC减少血管内皮细胞凋亡,但高浓度NAC加重内皮细胞凋亡。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋综上所述,NAC用于缓解体外循环后全身炎症反应,必须注意对血管内皮细胞的保护。低浓度的NAC既能发挥抗炎作用,又能减轻体外循环后血管内皮细胞凋亡。较高浓度的NAC可加重内皮细胞凋亡的程度,造成血管内皮细胞损伤。体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋参考文献:体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋1姚磊,盛鹏,朱德钟.培养人脐静脉血管内皮细胞的研究J.实用医技杂志, 1999, 6(12): 915-916.体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋2 SchauserK, Larsson L I. Programmed cell death and cell extrusion inratduodenum: a study ofexpression and activation ofcaspase-3 in relation to C-jun phosphorylation, DNA fragmentation and apoptotic morphologyJ. Histochem CellBio,l 2005, 124(3-4): 237-243.体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响体外循环血清孵育及NAC干预对血管内皮细胞凋亡的影响作者:曾祥君,肖颖彬,王学锋,陈林,钟前进单位:第三军医大学新桥医院全军心血管外科中心,重庆400037 提要:目的观察体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)血清对培养血管内皮细胞凋亡的影响及N-乙酰虐叛缨狈悬裹墒砂奋浑收息岁歇吁经急匿楞仑亿剔呸窄臭砸编札狙血国谨泉侍征瓮封咋循盲砚啊纂窜挥锦勇觉弘笔姿腐瞪嚼宛捣彪涸樟蚤祝放邱秋3 Li S, Price R, Phiroz D,et al. Systemic inflammatory response durin

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