【毕业学位论文】(Word原稿)龙眼微生物保鲜技术的研究与应用项目资金申请报告-生物化学与分子生物学

福建省 产业技术开发 项目 资金申请报告 项 目 名 称： 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 申 报 单 位： 福建省农业科学院农业 生物 资源研究所（盖章） 地 址 ： 福州五四路 247号 邮 政 编 码 ： 350003 联 系 人 ： 联 系 电 话： 传 真 ： 主 持 部 门： 福建省农业科学院 申 报 日 期： 二 一 年 六 月十二日 福建省发展和改革委员会制订 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 目 录 1 项目概要 . 1 目名称 . 1 设地点 . 1 设内容 . 1 金筹措 . 1 设期限 . 1 目效益 . 1 2 研制开发的目的和意义 . 2 3 国内外相关技术发展概况和趋势 . 2 4 前期研制开发情况与技术负责人情况 . 3 期研制开发情况 . 3 眼果实致腐菌的分离与鉴定 . 3 眼果实贮藏过程中的生理生化变化 . 4 眼果实保鲜功能微生物的初步筛选 . 4 术负责人情况 . 5 5 主要研发方案，包括研究开发的内容、目标、技术路线以及技术经济指标 . 6 发内容 . 6 起龙眼采后病害的病原菌分析 . 6 眼果实致腐菌的鉴定 . 6 起龙眼采后腐烂致腐菌的主要作用机理 . 6 鲜功能微生物的筛选、保鲜效能和毒性检测 . 7 鲜功能微生物剂生产工艺技术研究与应用 . 8 生物保鲜剂应用的标准操作规程 . 8 究目标 . 8 6 承担单位与合作单位概况及必要的支撑条件 . 8 目承担单位 福建省农业科学院农业生物资源研究所 . 8 目成果对接企业 福建隆科君农业科技有限公司 . 10 企业的对接协议 . 10 究队伍人员配置 . 11 7 经费概算与资金来源 . 11 费概算 . 11 金来源 . 12 8 起止年限与进度安排 . 12 9 经济社会效益初步分析 . 13 10 项目与工程化、产业化工作的衔接 . 13 11 附件 . 14 技查新报告 . 14 业合作协议：龙眼微生物保鲜技术 . 30 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 1 页 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 1 项目概要 项目名称 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 建设地点 福建省农业科学院农业生物资源研究所 建设内容 微生物是广泛分布于自然界的生物类群，由于种类丰富、代谢途径多样，能产生多种生物活性物质，对各种动植物的生理、生化代谢具有重要的影响，有些微生物对各种病原微生物有着较强的拮抗作用。因此，将微生物应用于水果的保鲜，有着巨大的潜力。 1953 年首次报道了 枯草芽孢杆菌对柑桔果实采后病原菌有拮抗作用，为采后病害的防治和生物保鲜提供了新的思路。 本项目拟探索致腐菌导致龙眼采后腐烂的主要原因，分离引起腐烂的病原菌，筛选具有高效保鲜功能的微生物，研究微生物的保鲜机理、培养技术、生产工艺，研制微生物保鲜剂，以实现龙眼的无公害有效保鲜，解决保鲜剂残留所引发的食品安全问题。 资金筹措 本项目计划总投资 50 万元。其中自筹资金 20 万元，向省发改委申请项目专项资金 30万元。 建设期限 本项目建设期限为 3年。 项目效益 我国是龙眼生产大国，年产量分别达 100 万吨以上，其中产地只能 消费 20%，其余 80%要靠外销或贮藏加工。长期以来我国只重视采前栽培，忽视采后处理，目前我国水果贮藏保鲜技术整体性还比较落后，尤其是热带水果的保鲜技术更为滞后，造成龙眼每年的直接浪费和损失率惊人，贮龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 2 页 存量低，出口量少。因此安全无害、环境友好、能减少化学药剂残留、抑制腐败霉烂和延长保藏期的微生物保鲜技术的产业化前景看好。 与大田作物病害的微生物防治相比，采用微生物方法进行水果采后病害防治、保鲜具有如下优点： 贮藏条件容易控制 ; 处理目标明确，外界微生物干扰少； 无紫外线等的破坏作用； 产品集中，处理费用低廉。微生物技术为优质果品采后病害防治开辟了一条无公害的新途径。 2 研制开发的目的和意义 龙眼是深受我国人民喜爱的优质果品，随着人们生活水平的提高，生活模式与消费观念的改变，人们对水果等食品的要求已不仅仅满足于传统上的色、香、味，而更加关注的是食品的安全与环保。食品的保存、保鲜与防腐一直是人们普遍关注的问题。发达国家非常重视农产品保鲜加工业，农业总投资的 70%用于采后保鲜，以保证农产品附加值的实现和资源的充分利用。 然而，长期以来我国只重视采前栽培，忽视了采后处理，由于相关辅助行业及技术落后，中国的水果贮藏加工业远 没有跟上种植业的发展，龙眼等热带水果的保鲜技术尤其滞后，限制了出口。面对我国加入 切要求我们寻找安全无毒有效的微生物保鲜技术，用于取代化学保鲜，这已引起了专家学者、果蔬生产者及消费者的高度重视，微生物保鲜技术也就成为研究与应用的热点。 3 国内外相关技术发展概况和趋势 自 20世纪 50年代起，国内外广泛开展了微生物保鲜技术方面的研究。目前，用于果蔬生物保鲜的微生物有非致病真菌、木霉、酵母、枯草芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌等。生物保鲜的机理实际上是在贮藏过程中通过增加果蔬表面的天然拮抗菌数量或 通过引入有益微生物，使果实上的微生物达到平衡，从而抑制致病菌在此微生态系中的生长、繁殖，控制果实的采后病害。 在我国，已有应用拮抗微生物防治芒果、香蕉、柑桔等水果的采后病害的报道。如刘兴荔等（ 1987）发现放线菌 618 菌株发酵液对甜橙的保鲜效果明显地优于 多菌灵，对香蕉炭疽病菌也有良好的抑菌作用；钟敏等（ 2005）的研究发现，链霉菌 702 发酵液能抑制有害菌在苹果、梨、猕龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 3 页 猴桃、甜瓜表面的生长，减慢水分蒸发，对这些水果有较好的防腐保鲜效果。在国外，科研人员经过筛选，分离得到微生物 “株，这种 菌株能够被制成去乙烯的 “乙烯去除剂 质，可防止葡萄在储存中发生的变褐、松散、掉粒，对番茄、辣椒可以起到防止失水、变色和松软的作用，保鲜效果明显；柑桔类果品的生物保鲜的报道最多，而芒果、香蕉、番石榴、菠萝等亦有大量报道，并且有些拮抗微生物已制成生防菌剂应用于采后病害的防治。 目前，国内外还很少见对龙眼的微生物保鲜研究报道，因此，借鉴其它水果的微生物保鲜技术，开展龙眼的微生物保鲜研究，将会成为这种水果采后保鲜研究的一个重要方向。 4 前期研制开发情况与技术负责人情况 前期研制开发情况 龙眼果实致腐菌的分离 与鉴定 龙眼果实致腐菌形态 通过菌落形态、颜色观察，从龙眼果实的果皮和果肉中分离纯化得到可培养的 8株细菌和 30种真菌。 图 1 从龙眼果实中分离纯化得到部分可培养细菌和真菌的形态 龙眼致腐细菌的脂肪酸鉴定 由龙眼样本中分离出来的 8株细菌的脂肪酸气相色谱检测与 。在 株菌株 上，表明为典型菌种，其中 为胡萝卜果胶杆菌龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 4 页 （ ， 大 肠杆菌（ ； 株菌株分别在 配性较低，为非典型菌种。结合平板菌落形态，这 3 株细菌的鉴定结果鼠伤寒沙门氏菌（ 确认为正确的。而 据库没有这些菌种的数据，有待于进一步的鉴定。 龙眼果实贮藏过程中的生理生化变化 不同生长阶段龙眼果皮的过氧化物酶活性是不 同的，其活性大小随果实生长期的延长而提高。在果实生长期， 活性增强的幅度较小；进入成熟期后，该酶的活性即大幅度迅速提高。不同生长阶段龙眼果皮的多酚氧化酶的活性也是不同的，其活性大小：在果实生长前期，随着生长期的延长而增加，但进入果实成熟期后有所降低。 图 2 不同生长时期龙眼果皮 活性 图 3 不同生长时期龙眼果皮 活性 注：处理 1、 2、 3 和 4 的采样时间，分别为 2006 年 7 月 5 日、 7 月 22 日、 8 月 10 日、 8 月 27 日。 龙眼果实 保鲜功能微生物 的 初步 筛选 初筛时 6 株菌对 4 种龙眼 致腐菌 均有抑制作用，通过抑菌圈试验可以看出，菌株 12对龙眼 46， 48， 49和 50均显示了较强的抑制效果；菌株 15对 4 种菌显示了一定的抑制作用，抑制效果很明显； 22 对 4 种菌的抑菌效果不明显。 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 5 页 图 4 龙眼果实致腐菌拮抗菌的筛选 技术负责人情况 林营志，男，博士，副研究员； 1999 年 7 月起在福建省农科院工作 ，主要从事农业微生物的研究，具备项目研发的技术基础和实施能力。参与和主持的课题 ： 福建省农科院科技创新团队建设基金 (微生物基础生物学与农业生物药物的研究与应用 ”，承担微生物基础生物学方向建设和研究工作； 福建省科技计划公益专项 “生物农药行业特色芽孢杆菌资源库的建立及生防菌株的筛选应用 ”；福建省发展与改革委员会工程中心建设项目 “福建省生物农药工程研究中心 ”；863 项目 “设施蔬菜病虫害生物 ；福建省重大科技项目龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 6 页 “青枯病生物杀菌剂 研制与应用 ”；福建省重大科技 项目 “高效生物杀虫剂 研制与应用 ”。获科研成果：福建省科技项目 “高效生物杀菌剂 研究与应用 ”获 2008 年度福建省科技进步二等奖；福建省科技项目 “高效生物杀虫剂 获 2006年福建省科技进步二等奖。 车建美，女，博士生，助理研究员。 2003 年 7 月，毕业于福建农林大学，获农学硕士学位。 2003 年 9 月 至 2007 年 12 月，在福建省农科院生物技术研究所工作。 2008 年至今，在福建省农科院农业生物资源研究所。项目申请者一直从事微生物的研究开发利用研究，具备研究要求的专业基础与技能 。主持福建省自然基金 1项（ 2008福建省科技厅重点项目1项（ 2008福建省青年创新科学基金 1项（ 参加科研项目 8项。发表论文 20多篇。 5 主要研发方案，包括研究开发的内容、目标、技术路线以及技术经济指标 研发内容 引起龙眼采后病害的病原菌分析 按照不同的龙眼采收季节，进行不同品种龙眼果实的采收， 选用马铃薯 养基、牛肉膏 养基等培养基，从不同腐烂程度的 不同龙眼品种的 龙眼果皮 和 果肉上分离病原菌 。 将从龙眼果实果皮和果肉 分离的病 原菌，在不同时间和不同品种的龙眼果实上进行回接试验，观察龙眼果实致腐菌 的致腐效果。 龙眼果实致腐菌的鉴定 通过镜检、回接试验，找出导致鲜果腐烂的主要病原菌；通过菌落形态、菌体形态观察，生理生化特征测定， 统，鉴定到种。目前 已经完成细菌的分离与鉴定工作。 引起龙眼采后腐烂致腐菌的主要作用机理 在不同温度下，用气流法测定采后果实的呼吸强度，电导仪测定果皮细胞膜透性，菲林试剂法测定还原糖、蔗糖和总糖的变化情况，测定可溶龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 7 页 性固形物 (可滴定酸 (量的变化， 色法测定丙二醛（ 量变化，碘量法测定 量，测定过氧化氢酶（ 过氧化物酶（ 多酚氧化酶（ 超氧化物歧化酶的活性，分析这些参数或活性的变化与龙眼腐烂之间的关系。 1.0 分别加入 10 000 0 清液转入 25 淀用 5 次，上清液并入 25 容至刻度，低温下保存备用 。测定 酶活性测定方法参照朱广廉等（ 2008）的方法。 保鲜功能微生物 的筛选、保鲜效能和毒性检测 保鲜功能微生物 的筛选 以引起龙眼腐烂的病原菌为拮抗目标，从本研究室已建立的生防菌资源库中，采用抑菌圈、抑菌率和对峙作用的方法来筛选高效广谱的拮抗菌，作为微生物 保鲜功能微生物 。 拮抗菌菌液的制备 将病原菌划线于 于 30 条件下培养 48 h；将拮抗菌划线于 于 30 条件下培养 48 h。分别挑取病原菌单菌落于装有 25 A 培养液的 250 角瓶中，置于30 ， 200 r/8 h，每株病原菌三个处理。 分别挑取拮抗菌单菌落于装有 25 50 于 30 ， 170 r/8 h。 拮抗菌的抑菌试验 采用抑菌圈方法。将 养基在培养皿中倒入薄薄一层，将 成菌悬液培养基，倒入已经有一层 养基的培养皿中静置，晾干。将已灭菌的牛津杯用无菌镊子放到培养基上，每个培养皿放 4 个牛津杯。拮抗菌液经 10000 r/0 上清液 150 置过夜，转到 30 培养箱恒温培养 24 h，用无菌水作阴性对照，用农用链霉素作阳性对照 保鲜功能微生物 的保鲜机理的研究 测定微生物 保鲜功能微生物 使用后龙眼果实的呼吸强度、细胞膜透性，丙二醛、活性氧消除剂含量，过氧化氢酶和多酚氧化酶等在贮藏过程中的龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 8 页 变化，了解生理生化状态，为保鲜机理的研究提供依据；观察微生物 保鲜功能微生物 使用后龙眼上腐烂病原菌的生长情况，分析抑菌机理。 保鲜功能微生物 的毒性检测 毒性检测将委托农业部指定的检测机构 保鲜功能微生物 剂生产工艺技术研究与应用 通过微生物特性、发酵技术、制剂技术的研究，研制出有 效的应用剂型；结合采收期、放置密度、贮藏的环境因子的研究，确定出最佳的施用技术。 微生物保鲜剂应用的标准操作规程 制定龙眼果实微生物保鲜的标准操作规程。 研究目标 1) 筛选到 1微生物学特性稳定、对引起龙眼采后果实腐烂病原菌有较强拮抗作用、能快速稳定繁殖、对人畜无毒无害的高效拮抗菌作为 保鲜功能微生物 ； 2) 获得 保鲜功能微生物 的微生物学参数及最佳培养条件； 3) 获得 保鲜功能微生物 的保鲜机理； 4) 形成 保鲜功能微生物 剂的生产工艺；结合采收期、放置密度、贮藏的环境因子的研究，确定出一整套的施用技术。 6 承担单位与合作单位概况 及必要的支撑条件 项目承担单位 福建省农业科学院农业生物资源研究所 福建省农业科学院农业生物资源研究所农业微生物研究中心，致力于农业微生物资源保护利用，包括微生物资源收集、保存、鉴定，农业微生物基因资源研究、评价、开发、利用，农业微生物开发利用包括微生物农药、微生物肥料、微生物生物饲料、微生物降污技术、微生物保鲜技术等。承担着 “福建省生物农药工程研究中心 ”，与德国波恩大学共同建立 “中德生物防治合作实验室 ”，联合招收德国波恩大学的博士生，组建了福建省农业科学院微生物创新团队，首席专家刘波博士、研究员，国家百 千万一二层次管理人才，省政府优秀专家。 2003年以来，承担国际合作项目、国家 863龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 9 页 项目、国家基金项目、省科技重点项目等 80多项，得到研究经费的资助一千多万元，拥有分子生物学设备，紫外，气相，液相，气 生物自动鉴定仪，全自动微生物发酵设备和制剂工艺研究设备等。与德国、瑞典、美国以及中国的港澳台地区建立了合作研究关系。开展微生物转基因工程、微生物农药、微生物肥料、微物生物饲料等领域的国际合作研究。开发出高效生物杀虫剂 枯病生物杀菌剂 萎病生物杀菌剂 枯病免 疫抗病接种剂 萎病免疫抗病接种剂 壤生物杀线剂 作为福建福农生化有限公司的技术创新中心，科研产品进入生产示范应用。获国家专利 10项，获省科技进步二等奖 2项，省科技进步三等奖 3项。 研究所拥有较强的生物技术研究装备，拥有 胞融合仪、基因扩增仪、系列电泳仪、高速离心机、超低温冰箱、紫外分光光度计、凝胶成像仪、气相色谱仪、液相色谱仪、酶标仪、蛋白层析系统、超纯水系统、倒置显微镜、多功能立体解剖镜、高压灭菌器、各种型号的超净工作台、培养箱多台、全自动电 脑控制节能玻璃温室 (荷兰进口 )、人工气候室、自动生测仪、分子筛分离机、电脑网络办公系统、细菌培养系统、组织培养系统、生物毒素耦合装置、微机自控发酵装置等先进仪器和设施。可进行分子、细胞、组织、个体和群体水平的农业应用基础研究、战略高技术探索以及重大社会公益性研究。并建立了生物技术产品研制的中试车间，用于完成生物技术产品生产过程的发酵、提取、浓缩、粉碎、混合、配料、干燥、包装等工艺环节。 近几年来，研究所与福建众智生物科技有限公司等企业建立了合作关系，进行生物技术研究成果的产业化，同时以企业作为中试、示范基地 ，并借助它们辐射全省全国。目前本中心已研究、开发出 5 种新型的生物农药产品供企业生产、销售，在全省和全国推广应用。本中心还与福建省九个地（市）农科所建立了生物技术成果推广协作网，通过这一协作网，也可迅速将科技成果转化为生产力。 部分设备图片如下： 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 10 页 全自动微生物鉴定系统 沸腾藕合器 自动生测仪 植物培养室 凝胶成像仪 原子吸收分析仪 质谱仪 气相色谱 液相色谱 光波温室 人工气候箱 项目成果对接企业 福建隆科君农业科技有限公司 福建隆科君 农业科技有限公司是一家农业微生物制品的研发、技术推广，农业计算机软硬件开发销售的农业综合技术服务公司，现专业从事远程监控微生物发酵床零污染养猪法的环保推广应用。 与企业的对接协议 项目成果名称： 龙眼微生物保鲜技术 项目承担单位（甲方）：福建省农科院农业生物资源研究所 项目成果对接企业（乙方）： 福建隆科君农业科技有限公司 为了加速科技成果的转化，更好地服务于农业生产，提高农民的经济效益和社会效益，双方经协商同意签订本协议： 一、甲方同意将本项目内的技术成果 优先 转让给乙方；并由乙方负责该技术成果的转化和实施工作 。 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 11 页 二、甲乙方双方同意该技术成果的转化方式为作价入股，即甲方以该技术成果作价向乙方增资，具体作价金额根据评估结果确定。乙方同意负责办理该项目成果的作价增资工作。甲方最终所持受让方的股份比例根据受让方最终的注册资本确定。 三、乙方通过向甲方支付股息的方式支付技术成果转让收益，乙方不再向转让方支付任何形式的技术报酬或使用费。 四、依据本协议技术成果对接成功后，甲方有义务对乙方进行充分有效的技术指导，乙方委托甲对该技术成果进行后续开发，后续开发形成的知识产权，包括技术秘密成果等，归乙方所有，其他有关后续开发的具体事宜，根据有关法律规定执行，法律没有规定，由双方另行协商。 五、本协议未尽事宜，由双方另行协商。 六、本协议经双方签章后生效，一式两份，双方各执一份。 研究队伍人员配置 本项目研究小组由 7人组成，博士 2人，博士生 1人，其中高级职称 3人，中级职称 3 人。项目组成员主要研究领域为微生物或生物农药，人员构成和相关领域研究经验可满足该项目具体实施的需要。项目组成人员见下表。 姓 名 性别 专业 职称 承担任务 林营志 男 微生物 博士、副研 菌剂发酵技术研究；项目执行协调。 车建美 女 生物技术 博士生、助研 标准操作规程制定；项目执行协调。 刘 波 男 生物技术 博士、研究员 项目总体规划设计 郑雪芳 女 分子生物学 硕士、助研 龙眼果实 保鲜功能微生物 的 筛选及特性研究 林抗美 女 植物保护 研究员 基质配方研究 及田间应用试验 马丽娜 女 农学 农艺师 基质配方研究及田间应用试验 刘丹莹 女 农学 技术员 菌剂研究 7 经费概算与资金来源 经费概算 (1) 微生物菌种研究 细菌分离培养系统 2万元 菌种保藏系统 5万元 小计 7万元 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 12 页 (2) 微生物 发酵 工艺 研究 发酵原料 5万元 微机控制发酵系统 9万元 生产在线监控系统 5万元 小计 19万元 (3) 微生物 制剂基质配方研究 液体制剂设备 5万元 基质材料 3万元 小计 8万元 (4) 龙眼微生物保鲜剂 使用方法技术研究 室内保鲜研究 3万元 田间应用研究 5万元 小计 8万元 (5) 龙眼微生物保鲜剂标准操作规程与示范推广 标准操作规程建立 3万元 技术示范与推广 5万元 小计 8万元 总计 50万元 资金来源 本项目计划总投资 50 万元。其中自筹资金 20 万元，向省发改委申请项目专项资金 30万元。 8 起止 年限与进度安排 本项目建设期限为 3年，即 2010 2013年，进度安排如下： 2010年 5月 2011年 5月 ，完成 不同龙眼品种果实致腐菌的分离和回接试验和致腐机理 的研究，包括： 不同龙眼果实果皮和果肉致腐菌的分离和鉴定、致腐菌在不同龙眼品种的回接、不同腐烂程度龙眼果实果皮和果肉的生理生化特性的测定 2011年 6月 2012年 5月 ，重点 龙眼 保鲜功能微生物 的筛选和保鲜机理的分析，包括龙眼果实 保鲜功能微生物 的筛选、在不同品种龙眼果实的龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 13 页 保鲜效果的检测、 保鲜功能微生物 处理后龙眼果实的生理生化特性分析。 2012年 6月 2013年 5月 ，在前期研究基础上， 龙眼果实微生物保鲜剂的推广应用， 制定标准操作规程，并在福建省 龙眼主产区 进行宣传推广。 9 经济社会效益初步分析 龙眼是原产我国南亚热带地区的名贵水果，营养丰富、风味独特，深受喜爱。我国是龙眼的生产大国，栽培面积和产量均占世界首位。福建省又是我国龙眼的主产地，近 20年来发展迅速，成为我省农民主要的致富门路之一。然而，由于我省龙眼的成熟期分别为 8后生理代谢旺盛，鲜果易变色、变质、腐烂，不耐贮存和长途运销，果实采后损失率高，出口量少。因此，研 究龙眼的保鲜技术，有效延长保鲜期和货架寿命对促进龙眼产业的健康发展具有重要的意义。 目前，我国水果，尤其是龙眼等热带水果的贮藏保鲜技术整体性还比较落后，对龙眼的贮藏保鲜，大多采用低温、保鲜剂、 由于受到设备条件、操作技术等限制，化学保鲜法仍是主要途径。然而，许多化学保鲜剂如亚硝酸钠、苯甲酸钠及 会残留在贮藏的水果中，危害人体健康。因此，建立一套安全无毒有效方法，用于解决龙眼保鲜问题，变得日益迫切 ， 必将会带来巨大的经济社会效益。 10 项目与工程化、产业化工作的衔接 在项目实施过 程中，坚持产学研相结合，自主研发与引进创新相结合，建立科研院所、推广部门和企业参与的技术研发与转化体系，加快科研成果的推广应用。在我 省龙眼主要品种 种植的重点地区 进行示范推广应用，并通过媒体宣传，对基层农业技术人员和生产企业人员进行培训、技术指导。 坚持与企业合作，将产品生产技术转让企业，实现产品生产的扩大化，增加产品生产量，同时借助企业力量，大力推广产品，结合技术培训，建立一套安全无毒的龙眼保鲜方法，为社会带来一定的经济效益。 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 第 14 页 11 附件 科技查新报告 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 公司营业执照复印件与复印件 第 15 页 报告编号 :2010技查新报告 项目名称： 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 委托单位： 福建省农科院农业生物资源研究所 委托日期： 2010 年 5 月 31 日 查新机构（盖章）： 福建省农科院农业经济与科技信息 研究所 查新检索中心 查新完成日期： 2010 年 6 月 8 日 中华人民共和国科学技术部 二年制 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 公司营业执照复印件与复印件 第 16 页 查新项目 名 称 中 文：龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 英文： 查新机构 名 称 福建省农业科学院农业经济与科技信息研究所 通信地址 福州市五四路 247 号 邮政 编码 350003 负 责 人 曾玉荣 电话 87869417 传 真 87889415 联 系 人 刘健宏 李国成 电 话 87869417 电子信箱 、查新目的 立项查新 二、查新项目的科学技术要点 分离与鉴定龙眼采后病害病原微生物，并通过美国 行龙眼致腐菌致腐机理的研究；通过抑菌圈、抑菌带进行龙眼微生物保鲜菌的分离，研究龙眼微生物保鲜菌对龙眼果实的保鲜效果与保鲜机理；通过微生物特性、发酵技术、制剂技术的研究，研制 出有效的应用剂型；结合采收期、放置密度、贮藏的环境因子的研究，确定出最佳的施用技术，制定龙眼果实微生物保鲜的标准操作规程。 三、查新点与查新要求 查 新 点： 开展龙眼微生物保鲜菌剂的开发与研制 查新要求： 证明在所查范围内国内有无相同或类似研究。 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 公司营业执照复印件与复印件 第 17 页 四、文献检索范围及检索策略 （一）机检 维普资讯： 中文科技期刊数据库 1989国科技经济新闻数据库 1992国知网： 中国期刊全文数据库 1979国博士学位论文全文数据库 1979国优秀硕士学位论文全文数据库 1979国重要报纸全文数据库 2000方数据： 中国科技成果数据库 1990国学位论文数据库 1990外标准数据库 中国农业科技文献库 1990家科技成果网 建科技成果库 索 百度搜索 （二）手检 最近出版的相关期刊及图书 （三 ）检索词 龙眼；保鲜；微生物；微生物保鲜菌株；微生物保鲜菌剂 （四）检索式 1微生物 *（保鲜剂 +保鲜菌） 2. （龙眼 +桂圆） *保鲜 3. （龙眼 +桂圆） *保鲜 *（微生物 +生防 +拮抗 +病原菌 +控制） 4. （龙眼 +桂圆） *（生防菌 +拮抗菌 +控制菌 +生物菌剂） 龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 公司营业执照复印件与复印件 第 18 页 五、检索结果 根据本委托项目特点确定检索词、文献源及检索策略，检出与查新点相关文献 35篇。其中，密切文献 15 篇，题录如下： 1. 陈世平龙眼微生物保鲜技术的研究与应用通过评审中国果业信息， 2009，26（ 10）： 39. 为民微生物芽孢杆菌菌株对龙眼保鲜获得成功农产品加工， 2009（ 9）： 29. 福建科研新成果让龙眼水果保鲜告别传统技术中国新闻网， “龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 ”项目通过现场评审福建省农业科学院网， 魔芋葡甘聚糖抗菌复合膜对龙眼的常温保鲜研究现代食品科技， 2006，22（ 2）： 107112 6. 陈绍军龙眼复合涂膜保鲜剂的研究农业工程学报， 2006， 22（ 8）： 2197. 杨文领 “湿冷系统 ”在龙眼保鲜中的应用研究食品科学， 2001， 22（ 8）： 79. 王则金，苏大庆等生物抑制剂处理结合低温冷藏对龙眼保鲜质量的影响中国农学通报， 2004， 20（ 6）： 43119 9. 段洁利龙眼果实变温处理保鲜技术的研究农机化研究， 2006（ 11）： 439 10. 常世敏，李海芹龙眼采后贮藏保鲜技术研究进展广西热带农业， 2005（ 1）：1520 11. 刘供华华农研制出 “绿色 ”微生物保鲜剂精细与专用化学品， 2005， 13（ 10）：382. 成果名称：水果生物保鲜剂生产技术完成单位：浙江大学成果年份： 2007 13. 宋照军，赵良天然微生物保鲜剂的研究应用肉类工业， 1999（ 7）： 3414. 傅德明壳聚糖与有益微生物组合的生物保鲜剂用于丰都红心柚常温贮藏试验中国果菜， 2006（ 3）： 4315. 王曙文国内外果蔬生物保鲜技术的研究进展农产品加工，学刊， 2008（ 12）：110索结果分析： 1. 关于龙眼微生物保鲜菌剂的报道。密切 文献 14 报道了该查新委托单位承担的福建省科技厅重点项目（ 2008“龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 ”已于 2009 年 8月 30 日通过专家现场评审，考察了微生物保鲜剂对龙眼的保鲜效果。该研究课题组从菌种库中筛选了芽孢杆菌 5579、 5581 三种菌株，研究了其微生物学特性，并对龙眼采后病害抑制作用和酶的抑制效果进行研究。结果表明，芽孢杆菌对八种细菌和三种真菌及龙眼果实衰老相关酶具有明显的抑制作用。专家评审认为：以三种芽孢杆菌发酵液作为保鲜剂，稀释五十倍水溶液喷雾处理龙眼果实，都具有良好的防腐保鲜 效果，龙眼微生物保鲜技术的研究与应用 公司营业执照复印件与复印件 第 19 页 其中 孢杆菌处理效果最好。该院农业生物资源研究所与会专家认为：使用微生物技术保鲜龙眼，保鲜期长，且成本低、安全卫生，具有良好的应用前景，建议扩大在其它品种上的应用研究。 2. 关于龙眼保鲜技术的报道。许秀真（ 2006）研究了以 基质，通过添加一定浓度的壳聚糖、脂质、乳化剂、杀菌剂以及生物抑制剂所制得到的膜，将其应用于龙眼常温保鲜中，取得了较好的保鲜效果。陈绍军（ 2006）报道了选用魔芋葡苷聚糖、壳聚糖、乳化剂等，采用正交设计设立 10 个试验组，进行涂膜效果试验和龙眼常温保鲜试验，得出最佳的 涂膜配方（含抗菌抑霉剂）。杨文领（ 2001）报道了 “湿冷系统 ”在龙眼保鲜中的应用研究。 “湿冷系统 ”给龙眼提供了低温高湿的贮藏环境，结合臭氧杀菌较好控制了龙眼的腐烂与褐变，为龙眼的保鲜提供了一个新的方法。王则金等（ 2004）采用生物抑制剂处理龙眼进行低温气调保鲜。生物抑制剂处理结合低温冷藏对龙眼保鲜质量的影响，以提高龙眼的保鲜质量和商品率为目的。段洁利（ 2006）综述了预冷处理、热处理、低温冷藏、速冻贮藏等龙眼果实变温处理保鲜技术的研究与发展状况。常世敏（ 2005）也对龙眼果实采后生理和贮藏特性、常温贮藏、冷 藏、气调贮藏、热处理、辐射等贮藏保鲜技术方面的研究进展进行了综述。 3. 关于果蔬微生物保鲜菌剂的报道。刘供华（ 2005）报道了华中农业大学课题组首次从我国柑橘园中筛选得到了一株对柑橘有防腐保鲜效果的生防菌 34株，研制出“绿色 ”微生物保鲜剂，可使柑橘保存 90 天不烂，并且对人体没有任何毒副作用，华农研制的这种保鲜剂通过湖北省科技厅组织的鉴定。浙江大学（ 2007）的 “水果生物保鲜剂生产技术 ”项目成果提到每千克隐球酵母保