nisg-尿酸CA-153--医学生用的生化学习资料.ppt

尿酸 牡丹江医学院雷宇2011年12月 尿酸的定义 嘌呤代谢的终产物 其分子式为C5H4N4O3尿酸的生成过程 尿酸的正常参考值 磷钨酸还原法 男 149 416umol L女 89 357umol L尿酸酶 过氧化物酶耦联法 成人 90 420umol L 临床意义 1 血尿酸增高 1 血尿酸增高主要见于痛风 但少数痛风患者在痛风发作时血尿酸测定正常 血尿酸增高无痛风发作者为高尿酸血症 2 在细胞增殖周期快 核酸分解代谢增加时 如白血病及其他恶性肿瘤 多发性骨髓瘤 真性红细胞增多症等血清尿酸值常见增高 肿瘤化疗后血尿酸升高更明显 3 在肾功能减退时 常伴有血清尿酸增高 可见于肾脏疾病如急慢性肾炎 其他肾脏疾病的晚期如肾结核 肾盂肾炎 肾盂积水等 4 在氯仿中毒 四氯化碳中毒及铅中毒 子痈 妊娠反应及食用富含核酸的食物等 均可引起血中尿酸含量增高 2 血尿酸降低 恶性贫血 范科尼综合征血尿酸降低 高尿酸血症与痛风 高尿酸血症 由嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄障碍引起 因为人体内尿酸无法再分解 只能通过肾脏排出体外 如果尿酸排泄出现障碍 可导致血液尿酸浓度升高 而嘌呤的吸收 合成和分解代谢若发生紊乱 则可引起尿酸生成过多并导致高尿酸血症 高尿酸血症的原因 一 尿酸排泄障碍肾脏对尿酸的排泄有四个阶段 1 肾小球滤过血浆中的全部尿酸2 近端肾小管起始主动重吸收滤液中98 的尿酸3 近端肾小管主动重吸收尿酸逐渐减少 肾小管分泌的尿酸量却逐渐增多 最后又达到滤过量的50 左右4 髓绊降支尿酸被动重吸收达滤过量的40 44 经上述四个阶段 最终随尿排出的尿酸只占滤过量的6 10 总量为2 4mmol d 当肾小球滤过率下降 或肾小管对尿酸的重吸收增加或 和 分泌减少时 均可导致高尿酸血症 肾脏排泄尿酸障碍性疾病中 一部分是机制不明我多基因性遗传缺陷引起 另一部分由慢性肾疾患等引起 当乳酸或酮酸浓度增高时 肾小管对尿酸的分泌受到竞争性抑制而排出减少药物 氢氯噻嗪 依他尼酸 呋塞米 吡嗪酰胺 小剂量阿司匹林 能抑制尿酸排泄慢性铅中毒亦能使尿酸排泄受抑制 这些均能导致高尿酸血症 二 尿酸生成过多1 嘌呤合成代谢紊乱2 食物中嘌呤增多3 嘌呤分解增加 1 嘌呤合成代谢紊乱嘌呤核苷酸合成代谢中可出现多种异常而导致高尿酸血症 其中大多数属多基因遗传缺陷 由酶缺陷引起者仅占少数 原因如下 1 次黄嘌呤 鸟嘌呤磷酸核糖转移酶完全或部分缺乏 使 不能用于补救途径中与嘌呤合成核苷酸 使嘌呤进入分解途径增多 造成尿酸产物增加 esehNyhan综合征为HG PRT完全缺乏 是一种连锁遗传缺陷 见于男性 患者表现为血尿酸增高及神经异常等症状 2 PRPP合成酶亢进 导致嘌呤核苷酸合成增多 进而其分解产物尿酸也增多 3 葡萄糖 磷酸酶缺乏 可使葡萄糖 磷酸增多 并沿磷酸戊糖代谢途径转化成较多的PRPP 促进嘌呤核苷酸合成 此外 APRT缺乏时 腺嘌呤堆积 腺嘌呤虽不能转变为尿酸而无高尿酸血症及痛风症出现 但腾涌嘌呤的代谢产物 二羟腺嘌呤由尿排出增加 可产生肾结石 常被误认为尿酸结石 2 食物中嘌呤增多体内20 尿酸来源于食物中嘌呤 摄入富含嘌呤食物过多可诱发痛风发作 但到目前为止认为 摄入高嘌呤食物过多并非发生高尿酸血症的直接原因 3 嘌呤分解增加在骨髓增殖性疾病中 有旺盛的细胞合成和分解 从而出现核酸分解亢进 嘌呤和尿酸生成增多 高尿酸血症的原因也可归纳为原发性和继发性 原发性包括肾脏热点尿酸障碍和尿酸产生过多 是高尿酸血症的主要原因 继发性包括多种肾脏疾病以及引起嘌呤分解过多的疾病 痛风 由于遗传性或获得性的尿酸打满减少或嘌呤代谢障碍 导致高尿酸血症 当出现尿酸盐结晶和沉积 并引起特征性急性关节炎 痛风石 间质性肾炎 尿酸性尿路结石 痛风是一组疾病 高尿酸血症中痛风发生率为10 20 严重者有关节畸形及功能障碍 临床常用别嘌呤醇治疗痛风症 国别嘌呤醇与次黄嘌呤结构相似 易被黄嘌呤氧化酶错误识别 并较牢固地结合在该酶的活性部位上 使酶失去活性 从而抑制次黄嘌呤和黄嘌呤转变为尿酸的作用 使血和尿中尿酸浓度下降 而血与尿中次黄嘌呤和黄嘌呤则升高 因其溶解度比尿酸大 故在泌尿道中不易析出结晶 极易通过肾脏排出 另外 别嘌呤醇在体内与PRPP生成别嘌呤核苷酸 不仅消耗了PRPP 且还能反馈PRPP酰胺转移酶 阻断嘌呤核苷酸的从头合成 血 尿中尿酸测定 血 尿中尿酸测定方法可分为两大类 磷钨酸还原法和尿酸酶法 目前以尿酸酶法为主 另外 还有高效液相色谱法 磷钨酸法在碱性环境中 血 尿中尿酸具有还原性 无蛋白滤液中的尿酸可使磷钨酸还原生成蓝色的钨蓝 可进行比色测定 此法的不足之处是特异性不高 显色褪色速率变化不定 灵敏度低 尿酸酶法尿酸酶测定方法可分为三种类型 1 紫外分光光度法血 尿中尿酸在282 292nm处有特异吸收峰 当其经尿酸酶作用后 产物在此波长范围无吸收峰 测量酶作用前后吸光度之差 可计算血 尿中尿酸含量 2 酶联比色法3 酶联 紫外分光法 除以上方法外 固相酶技术的发展使测定更简单 更易自动化 尿酸酶的固相化有以下几种类型 固相尿酸酶与氧电极相联 测定尿酸氧化时的耗氧量 固相尿酸酶及过氧化物酶与显色法结合 夹心固相酶 荧光法 使产生的H2O2与对羟基苯乙酸反应产生荧光 此法具有酶反应的特异性及荧光法的灵敏性 高效液相色谱法血 尿标本以本性溶液抽提 在高效液相色谱仪中分离 于280nm处分别测定尿酸 黄嘌呤 次黄嘌呤 也可以采用内标法 在254nm处测定血 尿中尿酸 本法特异性高 快速和准确性好 可作为参考方法 也可用于常规工作 本实验室所用检测原理 URIC试剂用于以一种定时终点分析法测定尿酸浓度 尿酸被尿酸酶氧化 生成尿囊素和过氧化氢 过氧化氢在过氧化物酶催化下与 氨基安替比林 AAP 和 二氯 羟基苯磺酸酸 DCHBS 反应 生成一和中有色产物 SYNCHRON系统将自动稀释尿样并将适量体积的样品和试剂分配到一个反应杯中 对于血清或血浆所用的比例为样品对试剂 比 对于尿液所用的比例为稀释样品对试剂 比 系统将监测520nm的光吸收变化 此光吸收变化与样品中的尿酸浓度成正比 系统依此计算并给出尿酸浓度 化学反应方案 尿酸 O2尿酸酶尿囊素 H2O2 CO2H2O2 4 AAP DCHBS过氧化物酶醌亚胺 H2O 参照区间 每个实验室应根据其患者群体自行确定参考范围 评价 1 尿酸标准浓度在178 6 713 8umol L范围内线性良好 批内和批间CV在224 8umol L和792 8umol