菊花的组织培养导学案.doc

菊花的组织培养导学案 一、学习目标1.说明植物组织培养的基本原理。2.学习植物组织培养的基本技术。3.进行菊花或其他植物的组织培养。二、学习重点与难点重点：1.植物组织培养的相关概念和过程2.影响植物组织培养的因素3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。难点：1.影响植物组织培养的因素。2.植物组织培养过程中使用的无菌技术。三、学法指导：小组交流合作 一对一检查通关四、自主学习一、植物组织培养的相关概念和基本过程1.植物组织培养 的相关概念（1）细胞分化 ：植物的个体发育过程中，细胞在_、_和_上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因_的结果。（2）细胞的全能性： _的植物细胞仍然具有发育成为_的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。（3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过_过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种_的呈无定形状态的_。（4）脱分化：由_的植物组织或细胞产生_的过程，称为脱分化，又叫去分化。（5）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成_，这个过程叫做再分化。（6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。2.植物组织培养的基本过程移植试管苗完整的植物体二、影响植物组织培养的因素1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。同种植物材料，_ ，_ 等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择 _的茎上部新萌生的侧枝。2.外部因素：（1）营养条件 常用的是_ 培养基，其主要成分包括：_，如_ _；_ ，如_ ；_ 等。（2）植物激素 植物激素中_ 和_ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。_、_ 以及_等，都会影响实验结果。（3）环境因素 _ 、_ 、 _等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养，一般PH控制在 _ ；温度控制在 _ ；每天用日光灯 照射_小时。【思考】(1)生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响？三、实验操作过程1.制备MS固体培养基实验室一般使用4保存的配制好的培养基母液来制备（1）配制各种母液。配制母液时，大量元素浓缩_ _ _ ，微量元素浓缩_ 。常温保存。激素类、维 生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。（2）配制培养基。配制1LMS培养基时，将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水，加热熔化，然后加入蔗糖30g,依次加入母液，定容至1000mL。_，然后分装到锥形瓶中，每瓶分装_。（3）灭菌。高压蒸汽灭菌2、外植体消毒选取菊花茎段时，要取 _。无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料（外植体）的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑_；另一方面还要考虑植物材料的_。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。一般情况下，细菌污染可能是由接种人员造成的，真菌污染可能是_ _灭菌不当。 过程：流水冲洗软刷刷洗流水冲洗 过程流水冲洗软刷刷洗流水冲洗_无菌吸水纸吸干外植体表面体积分数为_的酒精中摇动23次，持续_无菌水清洗无菌吸水纸吸干外植体表面质量分数为0.1的_溶液中12min无菌水中至少清洗3次3、接种接种前，用 体积分数 70%的酒精将工作台擦拭，然后点燃酒精灯