川乌煎煮时间和给药剂量与毒性的相关性研究.doc

目录（一）川乌的概述 1.川乌的化学成分及药理作用 2.川乌的毒理作用（二）川乌煎煮时间、给药剂量的影响 1.川乌煎煮时间、给药剂量与药效的相关性 2.川乌煎煮时间、给药剂量与毒性的相关性（三）问题与展望（四）结束语摘要通过探讨川乌的煎煮时间和药效与毒性的关联，而归纳出此药的最佳煎煮时间，怎样发挥药效而把毒性降为最低。归分析和验证试验表明,川乌抗炎镇痛功效与煎煮时间、给药剂量具有显著的相关性,发挥抗炎功效的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为2.4g/kg;镇痛功效的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为2.4g/kg。关键词 川乌，毒性，煎煮时间，药效（一）川乌的概述川乌，别名：鹅儿花、铁花、五毒；被子植物门，毛茛科，乌头属。英文名Aconite Root， 生于山地草坡或灌丛中。栽培于平地肥沃的砂质土壤，主要栽培于四川。分布于长江中下游，北至秦岭和山东东部，南至广西北部。为毛茛科植物卡氏乌头AconitumcarmichaeliDebx.的母根。6月下旬至8月上旬采挖，除去子根、须根及泥沙，晒干。一般于栽培第二年6月中旬采挖，除去地上茎叶，吸取泥沙，将母根与子根分开，母根晒干后称为“川乌”。性状特征：根呈不规则圆锥形，稍弯曲，顶端常有残茎，中部多向一侧膨大，长27.5cm，直径1.22.5cm。表面棕褐色或灰棕色，有小瘤状侧根及子根脱离后的痕迹。质坚实，断面类白色或浅灰黄色，形成层环纹呈多角形。气微，味辛、麻舌1.川乌的化学成分及药理作用【化学成分】总生物碱含量2.3%，酯1.0%，乌头碱0.3%。主要含乌头碱（aconitine）、中乌头碱（mesaconitine）、塔技乌头胺（talatisamine）、杰斯乌头胺（jasaconitine）、苯甲酰乌头胺（benzoylaconine）、苯甲酰中乌头胺（benzoylmesaconine）和苯甲酰下乌头胺（benzoylhypaconine）等。这类成分的分子结构中，因8位羟基的乙酰化和14位的羟基芳酰化，因而呈现强烈的毒性，是乌头中的主要毒性成分。【功能主治】祛风除湿，温经止痛。用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛、寒疝作痛。用于治疗风寒湿痹、关节疼痛等病症。一般炮制后内服。生川乌酊外用能刺激皮肤，继而产生麻木感，故外用作某些神经痛及风湿的镇痛剂。【药理作用】1.强心作用乌头碱本身并无强心作用，对心脏毒性极强；而其水解产物乌头原碱Aconine的毒性仅为乌头碱的1/2000-1/4000.有谓具强心作用，在离体蛙心可对抗乌头碱引起的心律不齐；近年有人用经10个半小时水解的乌头碱溶液于离体心脏（蛙、豚鼠）实验，仅有微弱的强心作用。日本学者认为乌头中的强心成分为非生物碱部分，其所用植物品种主要为AconitumjaponicumNakai，小部分系中国移种于日本的川乌。我国学者从川附中分离出生物碱反应不甚明显的成分，对于离体蛙心具强心作用，此成分难溶于苯、乙醚和氯仿，而易溶于水和乙醇，经pH3-11范围的酸碱度处理不减弱其强心作用，此物质既非生物碱亦非强心甙。根据此种理化性质，应作Ca（+）的定性及定量测定。南京产的中国乌头Aconitumchinense久煎剂及川附子（熟附片）煎剂，对离体心脏（蟾蜍、蛙、豚鼠）具有明显的强心作用，熟附片作用较强，煎煮愈久强心愈显着，毒性愈低，而生乌头的冷浸液或煎煮时间较短者仅表现短暂的心振幅增大，继而心脏抑制及心律紊乱（与乌头碱作用相似）。经化学分析，上述制剂不含强心甙，却含有较高浓度的钙，乌头为0.24%，熟附片1.41%（据调查在炮制过程加入卤巴）。煎煮愈久，煎剂中钙含量也相应增高。以EDTA络合法、离子交换树脂、草酸铵除去钙后则强心作用消失。乌头灰分中钙含量为0.64%，亦呈强心作用。因此认为乌头、附子（熟附片）煎剂的强心作用与其中所含的钙有密切关系。在加热煎煮或炮制后，总碱含量减少。毒性亦大大降低。 2.对血压、血管的影响乌头碱能使血压下降，中国乌头及川附（熟附片）煎剂对麻醉犬或猫可引起迅速而暂短的降压，此时心脏并无明显变化，降压可被大量阿托品或苯海拉明所消除。用末梢阻力测定装置表明，熟附片煎剂能引起下肢血管显着扩张，此外尚能扩张冠状血管（与血压、心率无关）。有谓急救回阳汤（附子、樟脑、人参、麝香）有升压作用。四逆汤（附子、干姜、甘草）对狗急性失血亦使血压上升。而附桂汤对大鼠肾皮性高血压（肾上腺部分灼伤）有降压作用，并使灼伤侧肾上腺活动加强（1-C14-乙酸钠掺入试验）。 3. 消炎作用及其与肾上腺皮质的关系熟附片（白附片）或黑附片煎剂，经腹腔注射或口服对甲醛性及蛋清性踝关节肿有明显的消炎作用。熟附片煎剂不论口服（0.2g/100g）、皮下或肌肉注射均能显着降低大鼠肾上腺内抗坏血酸的含量，其作用不被戊巴比妥钠及氯丙嗪所阻断，但可部分被可的松所阻断。中国乌头中分离出的生物碱部分以及纯乌头碱亦有降低肾上腺内抗坏血酸的作用，但非生物碱部分则无效；此外熟附片煎剂尚能增加大鼠尿中17-酮类甾醇的排泄，减少大鼠末梢血液中嗜酸性白细胞数，因此对垂体-肾上腺皮质系统具有兴奋作用。用组织化学方法（小白鼠）研究亦证明，附子煎剂可使肾上腺皮质中胆甾醇含量减少（说明肾上腺皮质激素分泌旺盛），磷酸酶活性增强（说明通过肾上腺皮质激素增强了糖、蛋白、脂肪的代谢）并促进肝糖元的增加。但用黑附片煎剂1克/100克（较上述报告剂量大5倍），1次或连续6次口服给药，均不能使大鼠肾上腺内抗坏血酸含量降低。 4. 对中枢神经系统的影响乌头碱0.1-0.2mg/公斤能破坏大白鼠电防御性一运动爬杆条件反射，非条件反射亦受轻度破坏，脑各部位氨含量均急剧下降；以0.002g/kg注入家兔第四脑室，可引起麻醉现象。用电刺激小白鼠尾巴法证明乌头碱有一定的镇痛作用，东莨菪碱能增强其效力。乌头在中药麻醉复方中，其镇痛作用可与洋金花协同，并能拮抗洋金花引起的心率加快及口干。中国乌头煎剂能提高家兔电痉挛阈，但不能防止大白鼠最大电休克发作2. 川乌的毒理作用1.心脏毒性 心脏毒性一直被认为是川乌的主要毒性。乌头碱类中药致心律失常的特点是 多样易变,以频发室性早搏最常见。川乌的主要成分乌头碱导致心律失常的心电图异常率可达80.1%88.0%,呈多形性改变,称紊乱性心律失常,其中以室性心律失常最常见,严重的患者可能出现室性心动过速和心室颤动。缓慢型心律失常也比较容易发生,如窦性心动过缓、房室传导阻滞等。2.神经系统毒性。神经系统通常被认为是川乌作用的靶器官之一。外周神经系统损伤通常表现为皮肤蚁行感、刺痛以及麻木；中枢神经系统损伤则主要表现为头晕、视物不清、昏迷等。 乌头碱作用于神经系统主要机制为使中枢神经系统和周围神经先兴奋后抑制,阻断神经-肌肉接头的传导功能。神经-肌肉接头传导阻滞的原因主要是由于过度的突触前去极化导致神经动作电位和终板电位阻滞10。重度中毒者因位于延髓的呼吸和血管运动中枢麻痹,导致呼吸抑制,血压下降。组织缺氧后,机体正常的氧化还原的动态平衡被破坏,形成严重的氧化应激状态,从而激活促凋亡基因,引起组织器官细胞的凋亡3.消化系统毒性。川乌的消化系统毒性作用在临床上主要表现为恶心、呕吐、胃部烧灼感、流涎及腹痛、腹泻等,也有个别患者出现上消化道出血等症状。生川乌水煎液的长期毒性实验结果显示,动物胃平滑肌细胞的线粒体嵴减少、线粒体明显肿胀,胃壁内分泌细胞的线粒体同样肿胀,肠上皮细胞的线粒体嵴部分消失,线粒体轻度肿胀。4.泌尿系统毒性。川乌以及其他乌头类中毒出现泌尿系统毒性症状的比较少,只在个别案例中出现了肾衰竭、蛋白尿等情况。由于乌头碱可以导致心功能障碍,心功能障碍又能使肾脏产生缺血、缺氧,而乌头碱是经肾脏代谢后随尿液排出体外, 所以,乌头碱在代谢过程中毒性对肾可能产生损害作用。5.呼吸系统毒性。在动物实验中,川乌中毒会导致动物呼吸功能障碍；临床上也有中毒者因为位于延髓的呼吸运动中枢麻痹,导致呼吸抑制的病例。（二）川乌煎煮时间、给药剂量的影响1. 川乌煎煮时间、给药剂量与药效的相关性查文献川乌煎煮时间、剂量与药效的相关性研究，经实验川乌能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀;显著对抗蛋清所致大鼠足肿胀;抑制巴豆油所致大鼠炎性肉芽肿的增生,减少炎性渗出;显著减少醋酸所致小鼠扭体次数,延长小鼠扭体潜伏期;明显延长热板刺激小鼠添足潜伏期,提高热板小鼠痛阈值,即具有显著的抗炎镇痛作用。回归分析和验证试验表明,川乌抗炎镇痛功效与煎煮时间、给药剂量具有显著的相关性,发挥抗炎功效的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为2.4g/kg;镇痛功效的最佳煎煮时间为6小时,最佳给药剂量为2.4g/kg。川乌主要含脂溶性生物碱乌头碱、中乌头碱和次乌头碱,具有很强的毒性,同时又具有较强的抗炎镇痛作用,但其不耐热,加热后极易水解为毒性很小的单酯型生物碱和乌头原碱等。煎煮6小时后脂溶性有毒生物碱几乎完全水解,提示川乌在最佳煎煮时间、剂量下发挥抗炎镇痛功效的物质基础并非乌头碱类有毒生物碱,但是否就是其水解产物,抑或其它抗炎镇痛成分,目前尚缺乏直接证据2. 川乌煎煮时间、给药剂量与毒性的相关性查资料川乌煎煮时间和给药剂量与毒性的相关性研究，当前，药物长期毒性实验的实验动物一般选用健康动物。由于乌头类有毒中药的安全性研究中大量实验已证明，乌头类中药水煎液对疾病模型动物产生的毒性效应与健康动物有差异（杨 卓.附子煎煮时间、给药剂量与毒性的相关性研究.成都中医药大学2002级硕士学位论文）。结合病证动物模型研究川乌的毒性将对临床用药更具指导意义，因此我们选用佐剂性关节炎模型大鼠作为研究川乌长期毒性的实验对象，揭示生川乌水煎液煎煮时间和给药剂量与毒性的相关性。由于影响中药毒性的因素多元化，故本课题引入了数学的方法均匀设计。其特点为每因素的每水平只作一次实验，实验次数等于水平数。应用均匀设计法得出的实验结果与正交设计并无显著性差异，仍能反映体系的主要特征，因此特别适合多因素、多水平的实验研究7。本课题选择影响生川乌水煎液毒性的两个主要因素煎煮时间和给药剂量，每个因素选择7个水平，共进行7次实验，将实验结果多元回归分析，得出煎煮30 min，给药剂量为临床用量120倍时，对痹证动物的毒性最大同时药效最佳。该结果仅是应用统计方法得出的一个理论推测值，对于该结果的真实性、可靠性、重复性还要通过重复实验得到验证。（三）问题与展望随着中药制剂越来越多地应用到我们的实际治疗中，中药的毒性也随之受到重视。近年来中药使用不当所致的中毒案例屡见不鲜，这提示了我们需要一个更为安全和可靠的用药指导。需要进行大量的试验来明确怎样的使用药物。以前一段时间一农妇煎煮川乌不当致死的例子来说，同样的药物，由于煎煮时间不同而导致的结果就天壤之别。本文通过论述川乌的煎煮时间对药效及毒性的影响，来探讨一定的用药规律，为临床使用提供了参考和指导作用。以后我们药学工作者应当积极研究，努力实验，来归纳更多的用药方法。（四）结束语经过一个多月的努力，和老师的指导下，我终于完成了我的毕业论文，在这个过程中，我学习到很多知识，也明白了写论文是一个不断学习的过程。我也体会到了实践对于理论知识的重要性。没有实践就没有理论。一切理论都是建立在实践的基础上的。中药的使用有非常多的讲究，我们在总结古代人的经验的基础上，更应当进行很多的实验，明确具体时间和具体条件下中药的使用办法。从而使中药能更多地服务于临床。主要参考文献1田代华.实用中药辞典,第1版M.北京:人民卫生出版社，2002:177.2师海波,周重楚,李延忠，等.川乌总碱的抗炎作用J.中国中药杂志,1990,15(3):46.3宋东江,陆满文，李汉青.乌头碱类化合物毒理学研究概况J.中国药理学通报,1989,5(5):272.4王浴生.中药药理与应用,第2版M.北京:人民卫生出版社，1998:109.5何忠文,何平文.附子川乌草乌中毒12例辨析J.江西中医学院学报,2000,12(2):54. 6 Ameri A, Simmet T. Interaction of the structurally relatedaconitum alkaloids, aconitine and 6-benzyolheteratisine, in therat hippocampusJ. Eur J Pharmacol,1999,386：187-194.7 Grishchenko , Naumo AP, Zubov AN. Gating and selectivity ofaconitine-modified sod