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XXXX医院检验科微生物实验室假单胞菌属检验标准操作规程编号:MYCH/ 版本:第1版 第0次修改页数:第 3 页 共 3 页假单胞菌属检验标准操作规程1概述假单胞菌属包括铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、斯氏假单胞菌等。铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种。2标本类型血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。3鉴定3.1 形态与染色 革兰阴性杆菌。3.2 培养特性 在血琼脂平板上35培养1824小时,形成蓝绿色、透明溶血环的菌落,有生姜味。在麦康凯琼脂平板上,可形成5种不同的菌落。可形成5种不同的菌落。典型型:菌落不规则,边缘呈伞状伸展,无色透明,似大肠埃希菌菌落;粗糙型:菌落呈钮扣状,表面粗糙,或菌落中央隆起边缘扁平;黏液型:菌落光滑,隆起,呈黏液状,嵌入培养基中,不易挑起。似肺炎克雷伯菌菌落,但是无色;侏儒型:生长缓慢,培养18小时尚不见菌落,24小时后才有细小菌落。3.3 生化特性 氧化酶试验阳性;分解葡萄糖,不分解乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖;动力、枸橼酸盐、精氨酸双水解酶和硝酸盐还原试验均阳性;吲哚、赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶试验阴性。3.4 鉴别要点3.4.1 本菌属特征 蓝绿色或荧光色菌落、有生姜味,动力和氧化酶试验阳性,在4时不生长而在42时可以生长。3.4.2 与荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌的鉴别 三者均可产生荧光色素,但铜绿假单胞茵42时生长,后两者则不能生长。3.5 操作步骤3.5.1 氧化酶试验 参见氧化酶试验标准操作规程。3.5.2 鉴定 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。4药敏参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI最新版本:5质量控制感染铜绿假单胞菌的病人,经抗生素治疗34日后,易产生耐药性。因此对铜绿假单胞菌要经常做抗生素药敏试验。7.临床意义铜绿假单胞菌广泛分布于水、空气、土壤以及正常人体皮肤、呼吸道与肠道粘膜中,为条件致病菌。当手术、化疗、放疗、激素治疗等原因使人体抵抗力下降时容易引起感染。可引起烧伤创面感染、肺部感染、泌尿道感染、中耳炎、脑膜炎、菌血症等。8.鉴定流程血液、尿液、痰等挑取麦康凯平板或血琼脂平板可疑菌落氧化酶试验阳性仪器鉴定或手工生化鉴定并做药敏试验假单胞菌属参考文献1 中国合格评定国家认可委员会CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南20082 周庭银编著临床微生物学诊断与图解第二版上海:上海科学技术出版社,20073 叶应妩,王毓三,申子瑜主编全国临床检验操作规程第三版南京:东南大学出版社,20064 Murray PR. Manual 0/F Clinical Microbilogy. 9th ed. Washington: ASM Press, 20075 IS0 15189:2007医学实验室一质量和能力认可准则2007 编写人签名复审人签名审批人签名生效日期
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