秋葵属植物不同部分的精油的化学成分和抗氧化活性.doc

秋葵属植物不同部位精油的化学成分和抗氧化活性摘要挥发油的提取；花和秋葵种子采用水蒸气蒸馏法提取。气相色谱（法）和质谱联用（GC - MS）对它们的化学成分进行分离和鉴定，得出挥发油组分含量和相对比例。用面积归一化法确定各组分含量。使用水溶性维他命E作为控制清除自由基活性（IC 50）。自由的选择测试不同部位挥发油。结果实验表明，有43种化合物在花中，20种化合物在叶中和29化合物在种子中。有11种化合物是常见的三部分的挥发油。结果显示本挥发油的不同部位都有抗氧化活性，和抗氧化能力的大小：花叶种子。清除有机自由基分别3.652升/毫升，5.170升/毫升，12.396升/ mL。实验为进一步研究秋葵挥发油成分以及探索和利用它提供参考。关键词：秋葵；挥发油；抗氧化活性物质一、导言秋葵是锦葵科abelmoschusmedic一年生植物。多用于食品和药物用途。秋葵起源非洲。现在被广泛种植于热带和亚热带地区。其嫩果实为食，有丰富的蛋白质，游离氨基酸和矿物质。其果实含有粘性材料制成的果胶，多糖等组分。它有营养与健康疗效，叶，花和种子促进胃蠕动和预防便秘。它味平和性寒，具有改善咽炎，淋巴清除，调节月经的功能。秋葵属叶，花和种子也可入药，它有治疗恶性疮痈和遏制艾滋病毒的功能。被认为无公害的“植物伟哥”。近年来，一些研究已获得的化学成分，药理影响，与临床应用 2。但没有报道秋葵花和种子精油的化学成分 3。本文采用水蒸气蒸馏法提取黄秋葵叶，花和种子中的挥发油，用气相色谱-质谱对化学成分含量进行了分离和鉴定，用面积归一化法测定各成分的含量。研究提取的不同部位挥发油的抗氧化活性，从而为开发和利用秋葵提供理论基础。二、材料与方法A.实验材料和设备样品秋葵是林新春教授从浙江植物园农业和林业大学材料研究所采集标本存放于我们的实验室。样品经洗涤和60烤箱干燥后储存在密闭容器备用。2,2-diphenyl-1-picrylhydrazly（1）和6 -羟基2,5,7,8- tetramethychroman -2羧酸（中水溶性维他命E）（购买于西格玛公司）。所有均为分析级试剂。安捷伦样本系统和安捷伦5975c惰性默沙东，气相色谱，质谱仪（美国安捷伦公司），hp-5ms（30米0。25毫米，0.25米）石英毛细管柱，无限米200酶微孔板，READER（瑞士酶标仪），uv-2102电脑（上海仪表有限公司），挥发油提取装置，fe220轧机（北京z.x.mingye高科技有限公司），dgg-924a，烘干机（上海senxi实验室仪器有限公司），r201b旋转蒸发器（上海生生生物科技有限公司，）。B.样品溶液的制备采用水蒸气蒸馏法提取秋葵挥发油（中国药典2010版） 4。新鲜的秋葵叶、种子和花投入烘干到恒重，然后研磨至20目，得最后的样品准备提取，分别取花30克和种子100克，再分别把它们加入圆底烧瓶，用索氏提取器以乙醚为溶剂提取挥发油。提取完回收乙醚，收集挥发油为淡黄色透明油状液体有刺激性的气味。用无水硫酸钠脱水后存放于无菌小瓶。准备气相色谱-质谱（GC - MS）分析。C . GC - MS条件色谱条件：弹性石英毛细管色谱柱（30m0.25mm0.25um）色谱柱初始温度在50保持2分钟，以10/min升温速度升至135，再以5/min升温速度升至180；以10/min升温速度升至250；然后保持10 min柱流量0.8毫升/分钟，没有分裂样。质谱条件：离子源质谱电子,电离模式：电子能量70eV。界面温度：230，离子温度：230，GC/MS接口温度：150，大扫描范围的29-400amu，溶剂延迟：20min。化合物被确定使用nist2008质谱搜索程序。确定清除活性自由基样品溶液的制备：将精油100g用无水乙醇于10毫升容量瓶中溶解，精密称30.5毫克，定容至100毫升容量瓶。精密称14.8毫克中水溶性维他命E用无水乙醇溶解。定容为100毫升。确定清除活性的物质自由基：（1）试验1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl 5广泛用于研究的抗氧化活性，其原理是根据自由基与抗氧化剂所提供的一个电子的结合，在517纳米不同的吸光度下颜色选择性消失的特征。根据它可以用来测定抗氧化剂的自由基的清除能力。96孔微量测定方法结合酶微板块reader（微板量化的方法） 9。添加不同浓度的100微升样本和200微升DPPH溶液于微板块上，再震荡30秒，在37下保持30分钟，最后采用紫外吸收（AP）。同时，确定吸收的样本没有加入自由基(AC)和该自由基与100无水乙醇（Amax）的混合物。自由基清除活动使用下面的公式：1 -（APAC）/Amax100%。使用样品浓度（）为横坐标轴和清除自由基的活性（是）为垂直轴绘制校准曲线。计算IC 50用乙醇稀释备用的无水水溶性维他命E成不同浓度的溶液。然后，使用水溶性维他命E浓度为横坐标轴，清除自由基的活性为纵轴绘制校准曲线（r =74.109x + 0.0753r 2 =0.9902）。从水溶性维他命E校准曲线计算清除自由基活性IC 50。三、结果及分析A .鉴定挥发性成分添加提取的挥发油样品于注射器中，和稀释100我醚。注射量0.2L .根据上述分析条件，用气相色谱-质谱分析挥发油，扫描后色谱峰，质谱获得总离子流图得到了三部分的挥发性化学成分。堆栈图1所示。通过nist2008标准质谱数据库检索和访问。质谱数据联合分析手册，对不同部分秋葵精油的化学成分的进行鉴定，见表1。惠普软件处理系统定量分析的化合物。根据峰面积归一化法，计算每种挥发油成分的相对含量。结果被显示在表1。.表1显示的化学成分。气相色谱质谱对秋葵花挥发油，和叶进行了分离和鉴定的方法。对43，20，29的化合物进行分离，分别其中17种化合物被发现在花和叶中，其中22种化合物被发现之间的花和种子里，这13种化合物被发现叶片和种子里。所有11个成分均被发现在三个部分的挥发油。它们是苯甲醛，苯乙醛2,5-di-tert-butyl-1,4-苯醌，2 -己基esterbutanoic，酸，二丁基羟基，（-）-柏木，（+）- beta-cedrene，tert-hexadecanethiol，17pentatriacontene，二十七。它们主要由由酚，醇，酯和碳氢化合物组成。根据化学成分确定，氮棕榈酸含量较高，在秋葵花、种子分别为，44.304%、23.404%。此外，其中之一是一种脂肪酸。所以秋葵种子可以作为一种新的含有高脂肪的 12 石油资源使用。翻译结果重试抱歉，系统响应超时，请稍后再试 支持中英、中日在线互译 支持网页翻译，在输入框输入网页地址即可 提供一键清空、复制功能、支持双语对照查看，使您体验更加流畅B .清除自由基能力抗氧化有自由基的清除能力，所以它能保护人体免受自由基的伤害，延缓过程中的一些慢性疾病。1法是广泛使用的自由基的测定清除能力。秋葵属不同部位挥发油和中水溶性维他命E的合成。制备了不同浓度的抗氧化剂，和抗氧化活性自由基分别测量。使用样品浓度（）为横坐标轴，清除自由基的活性（Y）为垂直轴绘制校准曲线，从水溶性维他命校准曲线（图2）计算IC 50的样本E，3.652升/毫升（花），5.170升/毫升（叶），12.396升/毫升(种子），5.731升/毫升（中水溶性维他命E）。从图2显示，实验结果表明，当乙醇稀释作用不同的部分有能力清除有机自由基。清除自由基的清除能力随挥发油浓度上升。在比较这些挥发性油的不同抗氧化能力时，IC 50值作为自由基清除能力指标。IC 50值浓度的一半的抗氧化剂清除自由基是清除较小的IC 50值，它的更好的清除自由基的能力，较强的抗氧化活动。本离子的挥发油是来自不同地区的植物秋葵属。在一定的浓度范围内，0.001浓度0.012毫克/毫升浓度范围内水溶性维他命E，该浓度和清除自由基的清除能力保持良好的线性关系。不同部位挥发油所具有的抗氧化活性其IC 50值为花叶种子，这表明，秋葵花挥发油具有最高的清除自由基能力。挥发油三个不同的部分。抗氧化活性的挥发油从不同的部位与它的浓度正相关。使用水溶性维他命E为阳性对照，1秋葵花，叶和种子清除自由基的能力是相对于水溶性维他命E清除清除自由基能力。分别为0.0943毫克，0.1335毫克和0.3201毫克。图1秋葵属不同部位挥发油GC MS图结论比较秋葵不同的部分提取的挥发性化学成分，我们了解到叶片中含有比种子和花多的多种挥发性化学成分。我们已确定了64种化合物，它们主要是酚酯，酚酸，碳氢化合物，萜类和醛类，及其衍生物。然而，酯含量，氨基酸和萜类化合物是很高的。随着医药和检测方法进一步的发展，人们会更多更深入地了解有害自由基。很多研究表明，好氧微生物不断的代谢会产生自由基。而且积累的自由基会导致氧化损伤，这进一步导致衰老，癌症，中风，心肌炎，糖尿病与其他慢性疾病 13。一些外在自然抗氧化剂可以对抗体内过多的自由基，因此，它可以防止相关疾病的遗传。由于对合成抗氧化剂的安全的质疑，许多研究人员正致力于开发更安全，更有效的和无毒的天然抗氧化剂。通过使用来维护和改善身体健康。通过自由基法和酶法，实验得出秋葵在不同部位提取的精油显示一些抗氧化活性。该实验结果开发和利用秋葵精油提供了理论基础。秋葵挥发油浓度，清除率曲线致谢我们感谢浙江省重点现代营林技术实验室，浙江林业大学提供通用型的微孔板分光光度计。表1挥发油不同部分化学成分的分析结果翻译结果重试抱歉，系统响应超时，请稍后再试 支持中英、中日在线互译 支持网页翻译，在输入框输入网页地址即可 提供一键清空、复制功能、支持双语对照查看，使您体验更加流畅分享到 翻译结果重试抱歉，系统响应超时，请稍后再试 支持中英、中日在线互译 支持网页翻译，