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文档简介

教学目标：多肽结构的测定方法教学重点：了解末端残基分析法测定肽中氨基酸的排列顺序教学安排：O1 ，O5O6；10min一、概述多肽与蛋白质都是由 -氨基酸为结构单元，它们之间无严格界线。一般认为相对分子质量 1万，能透过半透膜，不被三氯乙酸或浓硫酸所沉淀的为多肽。多肽广泛存在于自然界，在生物体内起着重要作用，如谷-胱-甘肽保护人体免受毒素对细胞的侵袭，延缓人体衰老。对肽的研究有两方面工作：测定肽的组成和 -氨基酸在肽链中排列顺序；合成多肽，保证测定结果的正确性，多肽结构测定大体分三步。1.测定实验式将肽在酸性溶液中彻底水解，用色谱法分离确定氨基酸的种类、相对含量，计算出各种氨基酸的相对数目，求出实验式。2.确定分子式用化学方法或物理方法测定其相对分子质量，从而确定分子式。3.末端残基分析法，测定多肽中氨基酸的结合顺序二、N 端氨基酸分析有两种方法进行 N 端氨基酸的分析1）彻底水解法用2，4-二硝基氟苯与多肽的 N 端氨基反应，然后彻底水解产物，可确定 N 端的氨基酸： 这种方法可以一次得到全部氨基酸分子，也可确定 N端氨基酸的组成。2）埃德曼（Edman）降解法用异硫氰酸苯酯与多肽的 N 端氨基反应，然后水解产物，得到 N 端氨基酸和少一个氨基酸结构单元的多肽，分析 N 端氨基酸结构，回收少一个氨基酸的多肽。再重复操作，逐步确定 N 端氨基酸结构，经过多次降解，可确定多肽的氨基酸种类和连接顺序：（苯基乙内酰硫脲）催产素加压素三、C 端氨基酸的分析在羧肽霉作用下水解，有选择的使游离羧基的 -氨基酸的酰胺键水解，对水解下来的氨基酸进行鉴定，确定结构：（降解后的多肽）经过反复多次降解，可以逐步把多肽的链结构顺序弄清楚。对于长的肽链可以先降解成较短的多肽，然后再进行 N 端或 C
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