ATB简易操作流程.doc

简易操作流程1. 分纯细菌，18-24小时培养物（新鲜菌）。2. 根据细菌选试条（见附件1）。3. 将试条和培养基从冰箱取出，放室温15-20分钟，按表建议配制菌悬液 （见附件2） 。4. 4或24小时后将试条放入ATB仪器读数。简单操作步骤如下图所示1取菌 2稀释 3加样 4.读数 ATB结果的处理1. 进入到ATB NEW 软件界面，根据ATB操作指南在“录入”界面中输入病人 资料及标本信息。2 ATB NEW 软件支持自动判读及人工输入两种方式。 首先在“ATB”界面下，输入标本号 1）若选择自动判读方式：将ATB鉴定试条放于阅读器的承托架上，然后按 “ ”。阅读器将会自动判断试条的类别，分析试条的反应情况，显示鉴定报告。屏幕出现所鉴定细菌的名称，T值、ID%、不常见试验等详细的资料。若结果准确，按“ ”确认结果，随后进行药敏试条的判读。 2） 若选择人工输入试条结果，选择所需要目测的试条，屏幕出现生化反应表，用键盘输入结果按“ ”确认读数，电脑分析开始。屏幕出现所鉴定的细菌名称，ID% T 不常见试验等资料 。3）若不做细菌鉴定试验，可直接进入敏感试验。4） 自动阅读药敏分析试条，将ATB药敏试条放于阅读器的承托架上，按“ ”，机器自动阅读判断试条类别，结果出现:药敏试条名称，所用药物名称，药敏反应，即R=耐药，S=敏感， I=中介。按“ ”确认结果，专家系统将给出审核结果。5）鉴定、药敏结果判读完毕后，按“ ”，将结果传输至CIRS软件；若不需要保存结果，可按“ ”删除标本。3 在“录入”界面下进行报告的打印，审核处理等操作4 除此之外，ATB软件具有专家系统，查询及多种统计功能，可以实现对结果进行审核及评估，确认药敏结果是否符合实际情况，同时可指出耐药机理，在药敏检测中可以测定细菌的各种不同耐药机制，包括ESBL,MRSA,VRE等，为医生确定正确的抗生素治疗方案提供数据。详细步骤见ATB NEW操作指南。ATB 建议质控方法室内质量控制(IQC) ICQ的频率请遵循当地监控部门的推荐并且由微生物专家制定。通常情况下，在如下情况下进行ICQ是合理的：1. 发生任何的变化: 接收到新的试条或不同批号的试条 新的技术人员刚开始使用ATB EXPRESS/MINI API 仪器维护保养或故障修复后 软件升级后2. 无论是您每天使用或每月仅用一次仪器，IQC至少应该每月做一次。注意: 用户可以向我公司索取每批次产品的质量保证文件。怎样完成IQC? 人员：ICQ应该由每天进行常规工作的实验室工作人员完成。 菌株：质控菌株应该被当作常规标本对待。. 以 下表格给出了各试条需要用到的质控菌株类型:菌株的种类ATCC #试条的类型货号传统的药敏实验ATB?G (-) 514 315大肠埃希菌25 922ATB UR 514 335金黄色葡萄球菌25 923ATB STAPH 514 325铜绿假单胞菌27 853ATB PSE 514 345肺炎链球菌49 619ATB STREP 514 355粪肠球菌29 212ATB ENTEROC 514 365流感嗜血杆菌49 247ATB HAEMO14 299快速药敏实验大肠埃希菌25 922rapid ATB E 414 384传统鉴定大肠埃希菌11 775ID 32 E32 400多食鞘氨醇杆菌35 656ID 32 GN32 100鸡葡萄球菌700 401ID 32 Staph32 500土生隐球酵母64 676ID 32 C32 200快速鉴定产酸克雷伯菌43 863rapid ID 32 E32 700无乳链球菌12 401rapid ID 32 Strep32 600生痰二氧化碳嗜纤维菌33 612rapid ID 32 A32 300为了简化ICQ，我们仅在上表中列出了针对各试条可以使用到的其中一种标准菌株，其他可用于ICQ的标准菌株种类请参阅各试条包装盒内的产品说明资料。 以上所选菌株的原则如下： - 毒性低 - 容易培养保存 - 生物可变性低（包括由于培养条件不同引起的变异); -对抗生素广泛敏感 -常用于其它生物梅里埃产品的质控当然，实验室可以选用各产品包装说明资料中提及的其它质控菌株。注意: 被使用到的菌株一定要有鉴定溯源性 遵循菌株供应商要求的使用和传代要求。 菌株应该转种到推荐的培养基上 使用前检查细菌的纯度 质控结果合格才能使用相应的产品。IQC 结果的解释：把获得的结果和预期的结果（在产品包装说明资料内）进行比较。预期的结果是指：由厂家提供的针对特定菌株，使用该产品应该获得的结果。实际结果解释下一步的行动ID 或 AST 试条:实验结果和预期结果完全符合本实验室的使用条件合格可以常规使用该产品ID 产品: 结果显示有1到2个生化反应不符合, 鉴定菌种正确或不正确u 重复质控过程u 在额外的调查和/或更正行动未采取前，不能使用该批次产品*从以下方面完成调查：u 仪器 (ATB/mini API主机, 比浊仪、电子加样枪): 完成维护和/或校正u 菌株:检查纯度和活性.，必要时，使用新鲜菌株重复实验。u 方法学:严格遵循产品包装说明资料中的推荐检查培养基、菌龄、接种等环节是否符合。AST 产品: S, I, R值和期望值不一致或MIC超出了期望值（和期望值有一个及以上稀释度的差异）不能使用该批次产品 悬浮液的选择: 使用推荐的 API安培 悬浮培养液; 技术人员: 换另一技术人员重复实验. 如果以上步骤均未奏效，请联系生物梅里埃公司技术人员。*：如果在此情况下一定要使用产品，请仔细评价各份报告是否可靠并且可以发出，该工作应该由实验室的微生物学家、主管或负责人完成。质控结果的储存： 在ATB EXPRESS/ mini API上 ，和建立病人资料一样建立质控菌株的档案。需要查询的时候，遵循病人资料的查询方式或者及时打印出所有结果备查。注意：具体的IQC方案和操作步骤请以NCCLS的推荐和产品包装说明资料为基础，用户根据当地监控部门的需要制定出各自的常规IQC流程。ATB仪器的日常维护一、仪器的日常维护进行仪器维修前必须对各个不同的组件及每个部件的功能进行检查，防止对仪器有严重的损坏，并保证在最适宜的条件下进行仪器的维护。注意：1在仪器维护前必须断开所有内部电源2不要使用稀释剂，三氯乙烯或酮类物质擦洗所有塑料组件。读数组件的清洁准备工作1检查所有的电缆，电线以及街头是否安全2检查所有的板孔是否干净3检查读数器外部表面是否有损坏4检查风扇盖定期维护1每周清洁板架用温和的肥皂水清洁板架，清洗干净用棉布蘸酒精消毒板架表面置空气中晾干2每月清洁光电二极管用无菌的棉拭子蘸酒精仔细清洁光电二极管额外维护以下维护步骤不在每周及每月的维护范围内读数器外部表面应该用温肥皂水清洁，防止过多灰尘覆盖。必须在断开电源的情况下进行清洁维护工作。二、比浊仪DENSIMAT校准程序以下情况应进行比浊仪的校准：1、 如果对仪器的精密度产生怀疑；2、 使用中发生某些突发事件（如安培瓶破裂、液体渗入读数孔）；校准方法： 选取2个悬浮液培养基安培。（一个最少1.5ml，一个最少2.5ml） 将二者分别放入比浊仪。读数应在0到0.1McF之间。 用标准菌株ATCC25922 Escherichia coil制备菌悬液。用550nm的分光光度计调整光密度到0.125，即0.5McF。 将此菌悬液平均分入2个空的安培瓶中 将安培瓶再次放入比浊仪判读，读数应为0.5 0.1 McF。如果所有读数高于预期值，须清洗光电二极管（见说明书清洗流程部分），重复测试。如果问题仍然存在，请通知梅里埃或当地代理商。注意！硫酸钡不适用于制作DENSIMAT的标准物。附录1 ATB试条种类：Rapid ID 32/ID 32 细菌快速鉴定试条Rapid ID 32：4小时快速鉴定试条32300Rapid ID 32 A快速厌氧菌鉴定32700Rapid ID 32 E快速肠杆菌鉴定32600Rapid ID 32 Strep快速链球菌及相关菌鉴定ID 32：24小时常规鉴定试条32400ID 32 E肠杆菌鉴定32100ID 32 GN革兰氏阴性杆菌鉴定32500ID 32 Staph葡萄球菌及微球菌鉴定32200ID 32 C酵母菌及念珠菌鉴定Rapid ATB ：快速药敏检测，只供ATB/miniAPI仪器判读14384Rapid ATB E4ATB 快速肠道杆菌药敏试验ATB：仪器或人工判读用药敏试剂条14334ATB UR 快速ATB尿菌药敏试验14269ATB ANAATB厌氧菌药敏测定14203ATB FUNGUS 2 INTATB酵母菌及其他真菌药敏测定14299ATB HAEMOATB嗜血杆菌及布拉汉菌属药敏测定14365ATB Enteroc5ATB肠球菌药敏测定14315ATB G-5ATB肠杆菌属药敏测定14345ATB PSE 5ATB假单胞菌及有关菌药敏测定14325ATB STAPH 5ATB葡萄球菌药敏测定14355ATB STREP 5ATB链球菌药敏测定附录2 药敏试条简易操作表货号试条微生物悬浮液菌液浓度转移量接种培养基接种量孵育环境McFulul/每孔14335ATB UR-5尿道肠杆菌20040或706400.510ATB培养基135需氧14315ATB G-5G-肠杆菌14345ATB PSE-5假单胞菌36C 2C非发酵菌14325ATB STAPH-5葡萄球菌706402200ATB Na培养基2%（OXAE/OXA）135需氧ATB培养基（其它孔）36C 2C14355ATB STREP-5链球菌属706400.5200ATB S培养基135需氧 （可能部分链球菌在厌氧环境下生长更加良好）肺炎球菌36C 2C18-24Hr14365ATB Enter-5肠球菌706400.5200ATB S培养基135需氧36C 2C18-24Hr-作者：我想我可以-发布时间：2009-7-11 8:27:00- 附录2 药敏试条简易操作表货号试条微生物悬浮液菌液浓度转移量接种培养基接种量孵育环境McFulul/每孔14335ATB UR-5尿道肠杆菌20040或706400.510ATB培养基135需氧14315ATB G-5G-肠杆菌14345ATB PSE-5假单胞菌36C 2C非发酵菌14325ATB STAPH-5葡萄球菌706402200ATB Na培养基2%（OXAE/OXA）135需氧ATB培养基（其它孔）36C 2C14355ATB STREP-5链球菌属706400.5200ATB S培养基135需氧 （可能部分链球菌在厌氧环境下生长更加良好）肺炎球菌36C 2C18-24Hr14365ATB Enter-5肠球菌706400.5200ATB S培养基135需氧36C 2C18-24Hr14299ATB HAEMO嗜血杆菌200400.550ATB S培养基135需氧36C 2C布兰汉菌218-24Hr14384Rapid ATB E4肠杆菌快速药敏200400.55