送检病料的注意事项.ppt

送检病料的注意事项 上海农场生产技术服务中心吴中彬 一 送检病料的选择 1 采集发病初期 临床症状明显的 未用抗生素 1周内 治疗的发病猪只 采病料的时间应在病猪死后的数小时内进行 冬季6小时内 夏季4小时内 2 怀疑某种疾病时 应采取该病常侵害的部位 3 提不出怀疑对象时 可以将整个病猪送检 4 败血性传染病 如猪瘟 败血性链球菌病 可以采取心 肝 脾 肺 肾 淋巴结以及胃肠等组织 一 送检病料的选择 5 专嗜性传染病或侵害某种器官为主的传染病 则采取该病侵害的主要器官组织 如猪大肠杆菌病采取肠管以及肠内容物 有神经症状的传染病采取脑 脊髓等 6 检查疫苗免疫效果时 则需采取血液 待凝固析出血清后用于检测 二 病料采集的注意事项 1 解剖前检查 凡发现病猪急性死亡时 切不可随便解剖 未解剖前 必须由末梢血管采血 或局部采血 作涂片 检查是否患有炭疽杆菌 操作时应特别注意 勿使血液污染他处 以防传播和对人体的伤害 当确定不是炭疽时 方可解剖 二 病料采集的注意事项 2 采集器械的消毒 采集用的刀柄 刀片 剪刀 镊子等用具可以煮沸30分钟 然后用酒精棉球擦拭 并在火焰上烧一下 器皿在高压灭菌器内或干燥箱内灭菌 软木塞或橡皮塞置于0 5 石炭酸溶液中煮沸10分钟 载玻片应在1 2 的碳酸氢钠溶液中煮沸10 15分钟 水洗后再用清洁纱布擦干 将其保存于酒精中 注射器和针头放于清水中煮沸30分钟即可 二 病料采集的注意事项 3 病料采集人员需带好手套 穿上防护服和雨靴 病料采集好后要注意场所和人员 尤其是参与病料采集的饲养员 的消毒 防止人为的扩散病原 4 每个猪场最好有固定的采集病料的地点 以便消毒和隔离 三 病料的保存 采取病料后要及时送实验室检测 如病料不能不能立即进行检测 或须送往外地检验时 应加入适量的保存剂 使病料尽量保持新鲜状态 以便得出正确的结果 二 病料的保存 一 细菌检测材料的保存将采取的组织块 保存于饱和盐水或30 甘油缓冲液中 容器加塞封固 1 饱和盐水配制蒸馏水100毫升 加入氯化钠38 39克 充分搅拌溶解后 用数层纱布滤过 高压灭菌后备用 二 病料的保存 2 30 甘油缓冲溶液的配制纯净甘油30毫升 氯化钠0 5克 碱性磷酸钠1克 蒸馏水加至100毫升 混合后高压灭菌备用 二 病毒检验材料的保存将采取的组织块保存于50 甘油生理盐水或鸡蛋生理盐水中 容器加塞封固 二 病料的保存 1 50 甘油生理盐水的配制中性甘油500毫升 氯化钠8 5克 蒸馏水50毫升 混合后分装 高压灭菌后备用 2 鸡蛋生理盐水的配制先将新鲜鸡蛋的表面用碘酒消毒 然后打开 将内容物倾入灭菌的容器内 按全蛋9份加入灭菌生理盐水1份 摇匀后用纱布滤过 然后加热至56 58 持续30分钟 第二日和第三日各按上法加热1次 冷却后即可使用 二 病料的保存 三 病理组织学检验材料的保存将采取的组织块放入10 福尔马林溶液或95 酒精中固定 固定液的用量须为标本体积的10倍以上 如用10 福尔马林固定 应在24小时后换新鲜溶液1次 严寒季节为防组织块冻结 在送检时可将上述固定好的组织块取出 保存于甘油和10 福尔马林等量混合液中 二 病料的保存 四 血清学检测样品的保存用于血清学检测的样品一般情况下冷藏条件下保存就可以 如有特殊需要 可以将同一血清分装在几个EP管中 除需要检查的一份 其余的冷冻保存 15 三 病料的送检 一 病料的记录和送检单1 装病料的容器上要有编号 并详细说明送检样品的情况 附有送检单 2 送检病料的记录包括 病猪的年龄 性别 发病日期 症状 死亡时间和取材时间 以及送检病猪的免疫情况和治疗情况 三 病料的送检 二 病料的包装和运输一般微生物检测病料怕热 需用泡沫箱装上冰块保存 病理检验材料怕热 对于送检的血清样品在送检途中要防止剧烈震荡 避免引起溶血 影响检测结果 病料采集装箱后 要尽快托料车带到动保中心 送外地检测的可以派专人送检 四 一些常规病料的采集事项 1 全血的采集 在一次性采血器内先吸入灭菌的5 柠檬酸钠1ml 再采血5 10ml 混合后放在试管架上 2 血清的采取 1 用一次性采血器采集2 5ml血液 将采血器的活塞微微拔出一些 使针筒内留有部分空气 然后将一次性采血器摆成斜面 静置于室温或温箱中1 2小时 待血液凝固后放置冰箱 4 或冷暗处 析出的血清装入EP管中 编号用于检测 四 一些常规病料的采集事项 2 或将采得的血液放入离心管中 直立凝固后 经1000 1500转 分离心5 10分钟以分离出血清 在采血和分离血清过程中 应防止震荡 过热等 以免引起溶血 用于血清学检测的样品不要添加任何抗凝剂 四 一些常规病料的采集事项 3 皮肤的采取 采取病变皮肤的一块 保存在30 的甘油缓冲液中或10 饱和盐水中或10 的福尔马林溶液中 4 实质脏器的采取 采取心 肝 脾 肺 肾和淋巴结等实质脏器时 应在剖开胸腹后立即采取 如剖开后暴露时间太长有污染的可能时 则应在采取的部位用酒精棉球或烧红的烙铁烧烙后剪去 采取的脏器分别置于灭菌的容器或塑料袋中 编好号 四 一些常规病料的采集事项 5 肠管的采取 将欲采取肠管的两端用线扎后剪断 也可用烧红的铁片或酒精棉球 将欲采肠管表面烧烙后 剪开一个小口 用灭菌棉拭子刮取肠道粘膜及其内容物 放入灭菌容器中 四 一些常规病料的采集事项 6 脓汁 鼻汁 阴道分泌物 胸水及腹水的采集 用灭菌棉拭子蘸取后 放入灭菌试管中 对于未破溃脓肿内的脓汁和胸水等 可以直接用灭菌注射器抽取 放入灭菌小瓶中 如脓汁粘稠不宜吸取时 可向脓肿内注入1 2ML灭菌生理盐水或磷酸缓冲液 然后再吸取 操作时 注意勿破坏脓肿壁 以防脓汁扩散 四 一些常规病料的采集事项 7 脑 脊髓的采取 按病理解剖开颅骨要求打开头盖骨 采取脑 脊髓作病毒检查 应将采得的脑 脊髓浸入50 甘油盐水液中或将整个头颅割下 泡入浸过0 1 升汞液的纱布中 外面最好再用塑料布或油纸包裹 装入泡沫箱内送检 8 死胎的采取 可将整个尸体用塑料布或数层不透水的油纸包裹 装入泡沫箱内送往实验室 四 一些常规病料的采集事项 9 尿液的采取 用导尿管无菌采取病猪尿液若干 放入灭菌的玻璃瓶内送检 五 一些常规疾病的采样检测说明 1 球虫的检查 1 用载玻片刮取回肠粘膜 在显微镜下观看 2 取肠壁组织保存在福尔马林内做组织切片 2 口蹄疫无菌采取新鲜 成熟 未破裂 无污染溃烂的水疱皮或水疱液 水疱皮可保存在 甘油生理盐水中 供作反血凝及动物试验 五 一些常规疾病的采样检测说明 3 猪瘟采死猪的整个扁桃体 脾 肾 淋巴结及有病变的消化道 分别装在容器中供病理检查 酶标试验及分离 培养动物接种 如需抗体检查则采血清 另外采全血也可用于抗原检测 4 猪丹毒采死猪的脾 肾 淋巴结或有疹块的皮肤保存在 甘油生理盐水中 作细菌学检查 也可采未破溃的淋巴结或病猪耳静脉全血送检 五 一些常规疾病的