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_甘油分析方法甘油的化学分析方法过碘酸钠法（GB/T 13216.691）原理：在强酸性介质中，过碘酸钠将三个相连羟基的甘油氧化分解成甲酸和甲醛，用NaOH中和生成的甲酸，用pH值计指示终点。从NaOH标准溶液的消耗量计算甘油的含量。CH2OH-CHOH-CH2OH+2NaIO42HCHO+HCOOH+2NaIO3+H2O 试剂 蒸馏水：不含二氧化碳。 乙二醇稀释溶液：1体积不含甘油的乙二醇，用酚酞作指示剂中和后，再用1体积水稀释。 硫酸溶液：约0.1mol/L。 甲酸钠溶液：约0.1mol/L。 过碘酸钠酸性溶液的制备：称取60g（精确至0.1g）过碘酸钠，溶于已加入120mL硫酸溶液的约500mL的水中，边加入边冷却，转移到1000mL容量瓶中，用水稀释到刻度并摇匀。必要时用玻璃过滤器过滤。 溶液的酸度校核：空白试验所用NaOH溶液的体积应不少于4.5mL，这与基本反应产生的酸度相当。 NaOH溶液：约0.05mol/L。 NaOH标准溶液：约0.125 mol/L。 酚酞指示剂：溶解0.5g酚酞于95%（体积比）乙醇中，稀释至100mL。 仪器 滴定管：50mL。 pH值计：pH值计应用两种缓冲溶液校准。 a： 邻苯二甲酸氢钾溶液：0.05mol/L（10.12g/L），20时pH值为4.00； b： 10水四硼酸二钠（Na2B4O710H2O）溶液：0.01mol/L（3.81g/L），20时pH值为9.22。测定步骤（1） 试验份：称取含甘油不大于0.5g的样品（精确至0.0002g）。如果不知甘油的大致含量，应称取0.5g样品进行预测（如果甘油含量大于75%，最好称取0.5g+0.1g样品，精确至0.0002g），置于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀后取50mL此溶液用于测定。（2） 试验溶液的制备：对碱性样品或样品酸化时出现焦油沉淀，可将试验份放入配有回流冷凝器的烧瓶中，需要时稀释到50mL，加2滴酚酞指示剂，用硫酸溶液中和到刚好褪色。再加入5mL硫酸溶液，煮沸5min，冷却，必要时过滤，并用水洗涤过滤器。滤液转入600mL烧杯中。无上述情况时则可将样品直接放入烧杯进行测定。（3） 滴定：用水稀释试样至体积约250mL，在不断搅拌下，加入NaOH溶液，调节pH值至7.90.1。加入50mL过碘酸钠溶液，混合搅匀，盖上表面皿，在温度不超过35的暗处放置30min。然后加入10mL乙二醇稀释溶液，混合，在相同条件下放置20min。加5.0mL甲酸钠溶液，用NaOH标准溶液滴定至pH值7.90.2。.（4） 空白试验：在相同条件下，用相同量的试剂和稀释水，用50mL水代替样品，做空白试验。但加入过碘酸钠溶液之前，空白溶液应调节pH值至6.5，加入过碘酸钠溶液之后，滴定终点至pH值也是6.5。（5） 计算：甘油含量（质量，%）=（V1-V2）c0.0921100m=9.21c(V1-V2)/m式中 V1测定样品耗用NaOH标准溶液的体积，mL； V2空白实验耗用NaOH标准溶液的体积，mL； m试验份的质量，g； cNaOH标准溶液的浓度，mol/L； 0.0921甘油的毫摩尔质量，g/mmol。两个平行实验的允许误差为0.2。JIS食品甘油标准、FCC标准、美国药典甘油标准等叙述的方法（与GB/T 13216.691相当）操作如下：正确取出约0.5g的甘油，加水成500mL，正确抽取50mL，加水约200mL。加入NaOH或H2SO4溶液调节pH值至7.90.1。然后加入50mL6%的过碘酸钠，轻轻摇动，放置30min后，加入10mL50%的乙二醇，摇动，再放置暗处20min。加入5mL浓度为1mol/L的甲酸钠水溶液，用0.1mol/L的NaOH溶液（ISO用0.125mol/L的NaOH溶液）滴定到pH值为7.90.1表示终点，同时做空白试验。并且试验时用新煮沸的蒸馏水。每毫升0.1mol/L的NaOH溶液相当于9.209mg的甘油。重铬酸钾法高纯度甘油可以采用重铬酸钾法。原理：甘油在酸性溶液中能被重铬酸钾氧化成二氧化碳和水，过量的重铬酸钾将碘化钾氧化成碘，用硫代硫酸钠滴定析出的碘，从而计算甘油含量。3C3H8O3+7K2Cr2O7+28H2SO47K2SO4+9CO2+7Cr2(SO4)3+40H2OK2Cr2O7+6KI+7H2SO4Cr2(SO4)3+4K2SO4+3I2+7H2O3I2+6S2O32-6I-+3S4O62- 有以上三式可知，1mol硫代硫酸钠相当于92.094427=6.578g甘油。试剂硫代硫酸钠标准溶液：0.1mol/L。碘化钾：20%溶液。淀粉指示剂：0.5%溶液。重铬酸钾溶液：89g/L。测定：称取样品1g左右（精确至0.0002g），移入250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。取出10mL于锥形瓶中，加入25mL重铬酸钾溶液及30mL硫酸（1:1，体积比），瓶口放置一玻璃漏斗，于水浴上加热2h，冷却后移入250mL容量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。取25mL于500mL具塞锥形瓶中，加入15mL20%的碘化钾溶液，盖上瓶塞，于暗处放置10min，加水300mL，然后用0.1mol/L的硫代硫酸钠标准溶液滴定，近终点时加入淀粉指示剂数滴，继续滴定至溶液由蓝色变成亮绿色。同时作空白试验。计算：甘油含量按下式计算。甘油%= （V2-V1）c0.006578(m1025025250 100式中 V1滴定样品时耗用硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL； V2滴定空白时耗用硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL； c硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L； m试验份的质量，g； 0.0065781mmol硫代硫酸钠相当于甘油的质量，g。比色法 在碱性条件下，把甘油生成铜络合物，进行比色测定。 在10mL甘油中，加入10mL21%的NaOH溶液，再加入6mL6%的氯化亚铜溶液，充分混合后并离心分离，取上层溶液在635nm处进行比色测定。 另外，也有把甘油用重铬酸钾氧化分解进行定量的方法。 在甘油（0.25g以下）中，加入25mL0.0092%的重铬酸钾溶液和30mL浓硫酸，在水浴中煮沸20min，使甘油分解，在587nm处测定重铬酸钾的消耗量。作为重铬酸钾方法的变更方法，再加入二苯胺脲，在540nm处进行测定。 此外，对低含量的甘油如皂基中的甘油含量的测定，可采用如下操作的分光光度法进行。 原理：将定量的皂基（或肥皂、脂肪酸）用硫酸分解，生成的脂肪酸用石油醚萃取后，残留于水中的甘油用过碘酸氧化成甲酸和甲醛，将甲醛用1，8-二羟基-3,6-二萘磺酸显色，用分光光度计测定紫红色溶液的吸光度，求出甘油的含量。本法适于测定甘油含量低于0.5%的试样。 操作：将定量的皂基（或肥皂、脂肪酸）用硫酸分解，生成的脂肪酸用石油醚萃取后，残留水溶液（250mL）作为试样。（1） 取样量参考：样品中估计的甘油含量/%样品的取样量/g试样溶液取样量/mL0.25-0.50110.12-0.24210.06-0.11220.06以下32（2） 取试样溶液数毫升，加入过碘酸钠溶液1mL，放置15min。（3） 加入1mL氯化亚锡溶液和10mL1，8-二羟基-3,6-二萘磺酸，混合。在水浴上加热30min，冷却后用稀硫酸稀释到100mL。（4） 用10nm比色池在571nm处（本溶液最大吸收波长在571nm附近）测定吸光度，同时用水进行空白测定。由试样的吸光度与空白试验的吸光度之差，从预先制作的甘油吸光度曲线求出甘油的含量（%）。C=m1100250Vm10001000=0.025m1Vm式中 C甘油含量，% m1由标准曲线求出的甘油含量，g； V取试样溶液的量，mL； m样品量，g。色谱法测定甘油气相色谱法 气相色谱法测定甘油的色谱柱有许多种，通常柱温控制在180左右，以Celite(硅藻土、镁氟石)作为担体，聚乙二醇-6000作固定液，可以圆满地分析甘油产品。 J.Synder用Tenax-GC柱，柱温从150升至240对甘油进行分析，并和过碘酸法进行了比较。 N.Chambers对润湿剂中的甘油、甘露醇、山梨糖醇等乙酰化物用1.5%的QFI-HMDS80-100目色谱柱，在柱温200的条件下进行分析。乙酰化操作如下：在60-100mg样品中，加入吡啶、无水乙酸（50:50，体积比）10mL。在水浴中进行反应。 也有用80-100目的活性炭，0.8%的THEED-Carbopack C色谱柱，在柱温125下进行分析的报告。 另外，三甲基硅烷化的甘油、聚合甘油用Silicone OV-17 1.3%为固定液，担体100-200目的色谱柱，从90升温至350，升温速率在5/min下进行。 三甲基硅烷化操作如下：在0.18-0.22g甘油中，加入1mL吡啶和0.4mL六甲基二氯硅烷、0.4mL三甲基氯硅烷，在80下反应5min，静止后取上层清液进行分析。高压液相色谱法 用屋太芝公司分析糖类专用的反向柱，以乙腈：水=92.5:7.5（体积比）作为洗脱剂，以视差折光仪为检测器，可以对甘油进行分析。 另外，也可以用水系的凝胶渗透色谱对甘油进行分析。分析条件如下。 色谱柱：Asahipak GS-220H(7.6mmID250mL)。 柱温：40。 流量：0.5mL/min。 检测器：视差折光仪。 样品：0.5%甘油20L。 洗脱剂：水。相关文献1.HPLC检测生物柴油生产过程中副产物甘油含量的研究 张宏武,王璐,产竹华,夏永军,陈蕴,许赣荣 (江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122)主要仪器Angilent 1100系列高效液相色谱仪,KDC-16H高速台式离心机。最佳色谱条件:色谱柱:ZORBAX NH2(250mm 4. 6 mm,5m);检测器:示差检测器;柱温30;流动相:70%乙腈;流速1mL/min。甘油最低检测限为2mg/L,回收率为94. 34%99.43%,相对标准偏差为1.03%。与传统化学方法相比,高效液相色谱法快速简便,结果准确,重现性好。2.分光光度法测定甘油合剂中甘油的含量 徐秀丽,成立军,刘伦 (泰山医学院第一教学医院,山东泰安271000)根据甘油与氢氧化铜悬浊液作用生成绛蓝色的甘油铜溶液,采用分光光度法在630 nm波长处测定吸光度,建立回归方程,以确定甘油的含量。3. 气相色谱法测定工业甘油含量 申书昌 王文波 齐齐哈尔轻工学院本文使用Chromosorb101固定相作为柱填料,采用气相色谱法测定水溶液中甘油。操作过程简便,测定结果准确。色谱柱：32000（mm）不锈钢柱,内填Chromosorb101(60-80目)固定相;柱温:235；载气：氢气,，60mL/min；检测器：TCD；汽化温度：270。4. 生物柴油一甘油联产工艺及甘油含量测定方法的研究 杜晓刚 南京理工大学美国HP一6890气相色谱仪谱仪带FID、TCD双检器，分流不分流进样口HP一5弹性石英毛细管柱(Film Thickne