生命的奥秘8基因治疗ppt课件

生命的奥秘AJourneyintoLife,1,基因治疗,失明的基因治疗,2,基因治疗的基本概念基因治疗的发展历程基因治疗的策略基因治疗的流程基因治疗的应用,内容,3,约3万个基因,人类30亿对碱基(98调控序列,2信息序列),约20万种蛋白质,基因组学,蛋白质组学,基因：编码蛋白质和RNA的DNA序列。,4,“bubbleboy”,5,基因治疗案例分析成功案例,第一例正式批准的基因治疗：先天性腺苷脱氨酶（adenosinedeaminase,ADA）缺乏症,基因缺陷,严重联合免疫缺陷症(SevereCombinedImmunodeficiency,SCID),常染色体隐性遗传病,6,SCID患者,住在休斯敦的得州儿童医院隔离泡泡里。,Bubbleboy:DavidVetter(1971-1984),六岁时第一次走出了泡泡。,隔着泡泡上课。,David和他姐姐Katherine,7,ADA缺失,SCID,T,B淋巴细胞缺陷,成熟的T细胞,成熟的B细胞,8,腺苷脱氨酶(ADA)影响的代谢路径,ADA缺陷脱氧腺嘌呤核苷酸代谢受阻dATPATP抑制核糖核苷还原酶活性阻止DNA复制和修复T、B淋巴细胞增殖障碍。,9,1990年9月14日,人ADA基因,自体白细胞,患SCID的4岁女孩,第一例成功的基因治疗,逆转录病毒载体,美国国家心肺和血液研究所,AshantiDeSilva,ADA恢复至正常水平的5%-10%,维持免疫系统改善症状,Moloneymurineleukemiavirus,10,2007年AshantiDeSilva21岁，仍生存良好,6岁照片,AshantiDeSilva,Bubblegirl离开无菌仓,1991年，另一位SCID的11岁女孩CindyKisik，接受了完全相同的基因治疗，取得成功。,2013年，DeSilva（左）/Kisik（右）和Blaese医生的合影。,11,策略：将淋巴细胞ADA酶恢复至正常的5-10%，维持免疫系统功能，改善病人症状。,ADA缺乏的基因治疗策略和步骤,步骤,1）血液中单个核细胞的分离。2）单个核细胞体外培养增殖。3）载体介导外源基因转染T细胞；4）将转染细胞回输给患儿体内。,12,为什么选择ADA缺陷症？,发病机理明确单个基因缺陷引起的疾病；基因表达调控简单；基因过量表达无害，低表达也能足以治愈SCID。,13,一、基因治疗的基本概念,基因治疗：把基因转移到患者体内，使其发挥作用，以达到治疗疾病目的。,经典的：指正常的基因整合入细胞基因组，校正或置换致病基因的一种治疗方法。广义的：改变基因的结构与功能，以达到治疗疾病目的的方法。,14,基因治疗的基本原则,“隐性”遗传的疾病，导入正常基因即可纠正缺陷；正常基因已克隆，能表达有功能的产物；治疗基因体内表达无需精确调控，表达产物过多无害；外源基因的细胞，能自然消减，不成瘤，不产生额外病毒。,15,生殖细胞(germline)基因治疗,只限某一体细胞的基因的改变只限于某个体的当代,对缺陷的生殖细胞进行矫正当代及子代,体细胞(somaticcell)基因治疗,长期影响不明，且涉及伦理学问题,16,二、基因治疗的发展历程,“改变基因缺损：医疗美好前景”N.Engl.J.Med(1968),MichaelBlaese,准备期（1980年-1989年）狂热期（1990年-1995年）理性期（1996年至今）,17,1980年，人地中海贫血患者的基因治疗，没取得好疗效，也无不良反应。1989年，首个获批基因治疗，将细菌新霉素抗性基因neoR导入肿瘤浸润的淋巴细胞，回输患者体内，细胞存活了两个月。,1.准备期：1980年-1989年,肿瘤浸润的淋巴细胞（TIL,tumorinfiltratinglymphocyte）,18,2.狂热期：1990年-1995年,1990年9月SCID患者,AshantiDeSilva，显微注射ADA基因到淋巴细胞后再输回患者体内，四年后测得获得了正常人1/4的免疫球蛋白。,1999年第1个获基因治疗的德谢尔瓦13岁。,19,法国巴黎奈克儿童医院的费舍尔博士与卡波博士也对两例先天性免疫功能不全的患儿成功地进行了基因治疗。,狂热期，在短短的几年内有100多个方案获得批准进入临床试验。1991年，我国首例基因治疗B型血友病获得成功。,20,中国第一例基因治疗,1991年12月上海,研究结果：血中凝血因子IX水平升高，症状缓解,人凝血因子IX基因,皮肤成纤维细胞,患血友病B的9岁和14岁男孩,评价：中国第一例成功的基因治疗，是世界第二例,逆转录病毒载体,复旦大学遗传学研究所302(1):1-12,癌基因抑癌基因,78,NatureMed11(7):713-714,2005.,a：miRNA过度表达，抑制了抑癌基因的正常表达；b：miRNA表达过少或缺失，不能有效抑制癌基因。,microRNAs通过对抑癌基因和/或癌基因的调控与肿瘤的发生相关,79,DetaoWang,etal.miR-150,p53proteinandrelevantmiRNAsconsistofaregulatorynetworkinNSCLCtumorigenesis.OncolRep2013;30(1):492-498.,肺癌,80,英国AdaptimmuneTherapeutics多发性骨髓瘤、黑色素瘤、肉瘤和卵巢癌较好。,修饰T细胞受体上高度可变区，使之特异识别肿瘤细胞。,LiddyN,etal.(2012)MonoclonalTCR-redirectedtumorcellkilling.NatMed.,基于修饰T细胞受体肿瘤治疗技术,（3）导入免疫增强基因,81,T细胞表达识别癌细胞的抗体识别B细胞白血病/瘤的抗CD19单链抗体,嵌合抗原受体T细胞（简称CAR-T）治疗技术,Designandimplementationofadoptivetherapywithchimericantigenreceptor-modifiedTcells.ImmunolRev,2014.257(1):p.127-44.,JunoTherapeutics公司,2012年急性淋巴细胞白血病7岁EmilyWhitehead。,82,魏则西生前在西安电子科技大学读大二。2014滑膜肉瘤晚期,魏则西事件,”,83,9月7日，90后女演员徐婷因患淋巴瘤在北京香消玉殒，她的生命轨迹永远定格在26岁。据最后为她治疗的解放军总医院第一附属医院血液科主任吴晓雄介绍，徐婷最终被确诊为淋巴瘤当中恶性程度极高的T淋巴母细胞淋巴瘤。徐婷得知自己罹患淋巴瘤之后，因为恐惧化疗，求助于伪中医针灸、刮痧、拔罐、放血之类的奇葩疗法。8月底病情迅速恶化，才住进解放军总医院第一附属医院接受正规治疗，但为时已晚，免疫系统已经处于崩溃状态，最终是脓毒血症和重度肺部感染夺去了她年轻的生命。,2013年李开复罹患淋巴瘤，他接受了规范的现代医学化疗，2015年宣布肿瘤治愈。,84,基因治疗的基本概念基因治疗的发展历程基因治疗的策略基因治疗的流程基因治疗的应用,小结：,85,1.基因治疗的基本原则有哪些？2.基因治疗的主要流程有哪些？3.基因重组载体构建的主要流程是什么？4.肿瘤基因治疗的主要策略是什么？5.基因治疗的关键问题有哪些？6.疾病基因治疗的