DNA亲子鉴定选修3ppt课件.ppt

第三讲DNA亲子鉴定基本步骤,1,亲子鉴定的应用范围刑事方面：（1）无名尸体（2）强奸致孕（3）拐卖儿童民事方面：（1）男方怀疑子女非亲生（2）移民；登记户口（3）财产继承（4）婴儿调错（5）寻亲（6）索取抚养费（7）试管婴儿（8）灾难善后（9）交通事故（撞人逃逸；司机换人）,2,采集样本,电泳分型,提取DNA,PCR扩增,分析结果,接受委托,3,4,司法鉴定需提供（个人鉴定可不提供）：委托单位委托书，被鉴定人有效身份证件原件(身份证、户口本或出生证明)司法鉴定或个人鉴定均需填写：亲子鉴定委托书内容包括：1.姓名性别年龄民族身份证号等2.照相情况：本中心照相()；自带照片()张；委托人要求不照相(签名：)3.其它信息：（1）母亲肯定是孩子的生母(是否)；（2）是否进行过异基因骨髓移植(是否)；（3）是否有双胞胎兄弟姐妹(是否)。（4）是否要求保留样本(是否),接受委托,5,采集样本,血液：抽取静脉血1-2ml，抗凝。血痕：将血液滴在22cm2医用纱布或滤纸上，通风阴干，做好标记后，分别存放在纸制信封中，切勿密闭保存。口腔拭子：先用清水簌口，使用医用棉签，从口腔内壁颊粘膜处适当力度反复擦拭，取出棉签，通风阴干，做好标记后，分别存放在纸制信封中，切勿密闭保存。每人需提取4-5根棉签。胎儿羊水：（孕16-20周）本鉴定室开具委托书在指定医院采取，由工作人员取回或被鉴定人自己在正规医院采取，羊水需5-10ml。带毛囊毛发：将毛发用力连根拔下，毛发末端可看到清晰的毛囊，即毛发根部白色物质。,6,1.样本处理血液：溶血，去除红细胞，消除血红素的影响。血痕、口腔拭子：洗脱细胞胎儿羊水细胞，带毛囊毛发：分离细胞2.加入5Chelex-100200l，10mg/ml蛋白酶K2l，摇匀，56水浴30min。3.取出后在漩涡混匀器上震荡混匀5-10秒。4.沸水浴8min，震荡混匀5-10秒。5.8000r/min离心5min，4保存备用。（PCR时取上清作为模板）,提取DNA,Chelex-100法,7,STR位点1：TPOX,STR表型：6-8,PCR扩增,8,Powerplex16PCR体系（huaxi),按加样先后顺序引物（16对）：0.5lBuffer(含Mg2+,dNTPs）0.5l金牌Taq酶AmpliTaqGold：0.4l灭菌超纯水：3.13.35l（补足总体积）模板DNA：0.250.5l总体积：5l,9,电泳分型,聚丙烯酰胺凝胶电泳毛细管电泳,10,毛细管电泳图谱,11,1.两个以上位点不符合遗传规律：排除父子关系2.全部符合遗传规律或1-2个位点不符合遗传规律计算父权相对机会(RCP)=若RCP100%99.99，支持甲是乙的生物学父亲若RCP100%99.99，继续增加检测位点，直至排除或支持。,结果分析,12,13,14,15,16,相关知识1.母系亲缘鉴定：线粒体DNA测序2.父系亲缘鉴定：Y-STR（孔子，成吉思汗）3.萨达姆4.双胞胎5.奇美拉现象6.曹操墓7.养父8.伦理道德方面,17,建议忠告1.珍爱生命，远离网游2.按部就班，学好专业3.人际交往，增加阅历4.关注时事，目光长远,18,试题1.目前最常用的亲子鉴定技术是什么？简述这种方法的基本原理。2.简述DNA亲子鉴定的基本流程。3.哪些样本可用于DNA亲子鉴定?采集方法?注意事项？4.采用上述方法进行亲子鉴定，结果有没有可能达到100%认定父子关系？为什么？5.上述方法可否用于动物之间的亲缘关系鉴定？与人类的DNA亲子鉴定相比，有哪些困难？6.关于亲子鉴定或分子生物学实验，你有何疑问，想了解哪些方面的知识？7.班级，姓名，学号，手机号码,19,课件hougeshuaia密码：xuanxiu交作业：17日前交给本班学习委员或代表；17日（周四）上午或中午，第三实验楼304房间，交给侯老师或放在边台