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文档简介
1,体液检验,.,2,3,浆膜腔积液检查,2,本章内容,4,掌握脑脊液一般性状检查、脑脊液常用化学检查中的蛋白质检查、葡萄糖定量测定和氯化物定量测定、脑脊液显微镜检查的原理、方法和临床意义。,第一节脑脊液检查,5,一、标本采集和处理(一)标本采集(二)标本转运(三)标本保存和接收二、一般检查(一)理学检查(二)化学检查(三)显微镜检查三、临床应用,本节内容,6,第一节脑脊液检查,脑脊液(CSF):存在于脑室和蛛网膜下腔的无色透明液体。,7,1.易通过的物质:氯,钠,镁等离子;2.较易通过的物质:白蛋白,葡萄糖,钙离子,乳酸,氨基酸,尿素和肌酐;3.极难或不能通过的物质:纤维蛋白原,补体,抗体,毒素和药物,及胆红素,胆固醇.,血脑屏障的通透性,8,第一节脑脊液检查,脑脊液的功能:保护脑脊髓及神经,并通过血管周围间隙供给脑部营养,维持神经细胞的渗透压,酸碱平衡和输出代谢产物。脑脊液检查对中枢神经系统疾病的诊断和预后观察有重要意义,9,适应症,有脑膜刺激症状时,如脑膜感染性疾病。疑有颅内出血,如蛛网脑膜下腔出血。中枢神经系统肿瘤。不明原因的剧烈头痛、昏迷、抽搐或瘫痪。中枢神经系统疾病需椎管内给药治疗及手术前麻醉、造影等,禁忌症,对疑有颅内压升高者,为避免因腰穿诱发脑疝,应先作眼底检查,如有明显视乳头水肿,忌作腰椎穿刺。休克、衰竭或濒危状态的病人。穿刺置局部皮肤有炎症的病人。颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状的病人。,第一节脑脊液检查,10,第一节脑脊液检查,一、标本采集和处理,腰椎穿刺法,11,二、一般检查,第一节脑脊液检查,12,第一节脑脊液检查,二、一般检查:理学检查,颜色,正常:无色或淡黄色红色-出血(损伤、病变)黄色-陈旧性出血、黄疸白色-化脓性脑膜炎黑色-脑膜黑色素瘤,13,脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血鉴别,14,第一节脑脊液检查,二、一般检查:理学检查,透明度:正常-透明。,15,第一节脑脊液检查,二、一般检查:理学检查,凝固性:正常无凝块。,16,1、脑脊液呈毛玻璃样混浊见于:()A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、神经梅毒E、隐球菌性脑膜炎2、脑脊液黄色见于()A、流行性脑膜炎B、化脓性脑膜炎C、蛛网膜下腔出血D、结核性脑膜炎E、脑肿瘤3、脑脊液呈黄色胶冻样见于()A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、隐球菌性脑膜炎E、蛛网膜下腔梗阻4、脑脊液呈现小絮状凝块见于()A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、神经梅毒E、蛛网膜下腔梗阻,练习题,B,C,E,D,17,二、一般检查,第一节脑脊液检查,18,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,球蛋白,苯酚,蛋白盐(白色混浊),原理,结果,:,白色云雾状混浊,:,白色云雾状,:,:,正常:,阴性,白色絮状沉淀,立即形成白色凝块状,19,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,注意事项,红细胞过多时,须先离心使细胞沉淀,吸取上清液进行试验试验中所用试管应十分洁净,否则易出现假阳性结果。所用试剂苯酚如不纯,亦可引起假阳性反应;室温低于10,酚饱和度低,亦可引起假阳性结果。,20,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,蛋白质定量试验磺基水杨酸-硫酸钠试验,2,蛋白质,磺基水杨酸-硫酸钠,A530,原理,结果,腰池0.20.4g/L;小脑延髓池0.10.25g/L;侧脑室池:0.050.15g/L,正常:,与标准蛋白比较,21,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,注意事项,脑脊液如有多量细胞或混浊,应先离心以除去。如蛋白质浓度过高,应先行用生理盐水稀释后重新测定。加入SS-S试剂的操作手法和速度、室温及比浊前的放置时间都会影响实验结果。故操作时应注意控制加入试剂的方式和比浊时间与标准管一致。应随气温改变,勤作标准曲线。,蛋白质定量试验磺基水杨酸-硫酸钠试验,22,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,临床意义,血屏通透性增高:脑膜炎;出血性脑病。脑脊液循环障碍:脑部肿瘤;椎管梗阻如脊髓肿瘤、蛛网膜下腔粘连脑脊液蛋白质含量增高。Froin综合征:脑脊液标本外观呈黄色胶冻状,且有蛋白-细胞分离现象,是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特征。,蛋白质定量试验磺基水杨酸-硫酸钠试验,23,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,原理,紫红色化合物,酶试剂:葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,GOD)和辣根过氧化物酶(peroxidase,POD)及4-氨基安替比林和2-甲基苯胺显色系统,测定管,37水浴30min,葡萄糖O2H2O葡萄糖酸H2O2(GOD)H2O2还原型显色剂H2O氧化型显色剂(无色)POD(紫红色),24,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,参考值,成人:2.5-4.4mmol/L,临床意义,减低:中枢神经系统细菌性、真菌性感染中枢神经系统肿瘤增高:主要见于糖尿病患者。鉴别细菌性和病毒性脑膜炎:细菌性脑膜炎显著降低。病毒性脑膜炎,脑脊液葡萄糖含量正常。,25,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,氯化物测定-葡萄糖氧化酶法,原理,2CL-Hg(CNS)2HgCL2HCNS3HCNSFe(NO3)3Fe(CNS)33HNO3(紫红色),参考值,成人120130mmol/L,26,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,氯化物测定-葡萄糖氧化酶法,临床意义,减低:细菌性或真菌性脑膜炎;氯化物测定对化脓性脑膜炎和结核性脑膜炎的鉴别有重要意义,脑脊液氯化物含量减低在结核性脑膜炎时为明显。低氯血症增高:脑脊液氯化物含量增高见于尿毒症、呼吸性碱中毒等。,27,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,酶学检查,5,28,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,原理,正电极,负电极,PH8.6缓冲液,2球蛋白,前清蛋白,球蛋白,球蛋白,1球蛋白,清蛋白,29,第一节脑脊液检查,30,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,参考值,前清蛋白2%6%、清蛋白55%65%、1球蛋白3%8%、2球蛋白4%9%、球蛋白10%18%、球蛋白4%13%。,31,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,临床意义,前清蛋白增加见于脑萎缩、脑积水及中枢神经变性疾病。清蛋白增加见于脑血管病变、椎管阻塞。和球蛋白增加见于脑膜炎、脑肿瘤。球蛋白增加可见于动脉硬化,脑血栓及脂肪代谢障碍性疾病。球蛋白明显增加见于脑肿瘤。,32,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,7,免疫球蛋白质分析,原理,抗原和抗体在凝胶中或特殊缓冲液中特意结合,形成抗原抗体复合物。通过测定凝胶中抗原抗体复合物沉淀环直径或特殊缓冲液中抗原抗体复合物浊度计算出免疫球蛋白的含量。,参考值,IgG:10-40mg/L;IgA:0-6mg/L;IgM:0-13mg/L;IgE:极少量。,33,脑脊液免疫球蛋白的报告方式及参考值,s:血清csf:脑脊液TP:总蛋白Alb:白蛋白Ig指数:IgG、IgA、IgM计算公式相同。,34,第一节脑脊液检查,二、一般检查:化学检查,7,免疫球蛋白质分析,临床意义,IgG增高:常见于神经梅毒、化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、小舞蹈病、神经系统肿瘤。IgA增高:常见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤等。IgM增高:常见于化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎、肿瘤、多发性硬化症等。IgE增高:常见于脑寄生虫病等。,35,1、脑脊液蛋白质定性的方法有、2、脑脊液蛋白质定量的方法有、。临床常用的方法是。3、脑脊液氯化物检测方法有、。临床常用方法为,其参考方法为。,练习题,36,4、结核性脑膜炎病人的脑脊液中酶增高程度最显著,可用于结核性脑膜炎的诊断与鉴别诊断。5、化脓性脑膜炎病人的脑脊液典型变化是葡萄糖,蛋白质、氯化物。6、病毒性脑膜炎脑脊液中葡萄糖含量通常为A、减低B、增高C、正常D、明显增高E、明显减低7、脑脊液蛋白质增高最明显的疾病是A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎D、脊髓肿瘤E、脑动脉硬化,练习题,37,练习题,8、脑脊液葡萄糖减低最明显的疾病是()A、化脓性脑膜炎B、真菌性脑膜炎C、结核性脑膜炎D、脑囊虫病E、神经梅毒9、CSF氯化物明显降低见于()A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、乙型脑炎E、新型隐球菌性脑膜炎10、引起CSF中葡萄糖浓度减低的疾病除外()A、结核性脑膜炎B、隐球菌性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、化脓性脑膜炎E脑膜瘤,38,二、一般检查,第一节脑脊液检查,39,第一节脑脊液检查,二、一般检查:显微镜检查,红细胞:无;白细胞:成人(0-8)106/L;儿童为(0-15)106/L,新生儿为(0-30)106/L。白细胞分类以单个核细胞为主,多为淋巴细胞和单核细胞。,细胞计数,40,第一节脑脊液检查,二、一般检查:显微镜检查,细胞检查,方法学评价一般用脑脊液离心沉渣涂片,经瑞特染色后用油镜分类,但细胞形态常受影响。为了尽可能多地收集细胞和保持完好的细胞结构,国内一些单位已将细胞玻片离心沉淀仪运用于细胞学检查,提高了癌细胞的检出率,在细胞染色技术上也采用了多种方法。,41,二、一般检查:显微镜检查,第一节脑脊液检查,细胞检查临床意义,红细胞增多见于脑出血、蛛网膜下腔出血、脑脊髓外伤、肿瘤、脑膜炎等。白细胞增多见于中枢神经系统感染、肿瘤、脑膜白血病等。病毒性脑(膜)炎、脊髓灰质炎等轻度增加(数十1000106/L),结核性脑膜炎中度增加(500106/L,以混合性细胞为主,中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞同时存在),化脓性脑膜炎显著增加(1000106/L,以中性粒细胞为主)。中性粒细胞增多:见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎破溃期、乙型脑炎早期、脑出血等。,42,二、一般检查:显微镜检查,第一节脑脊液检查,淋巴细胞增多:见于各种病毒性脑膜炎、真菌性脑膜炎(新型隐球菌性脑膜炎白细胞数可达数百106/L,以淋巴细胞为主)结核性脑膜炎早期及恢复期等。嗜酸性粒细胞增多:见于脑部寄生虫感染(如脑囊虫病)、变态反应等。肿瘤细胞和白血病细胞用细胞浓集法制备涂片,染色后查肿瘤细胞和白血病细胞,对中枢神经系统恶性肿瘤和脑膜白血病的诊断具有重要价值。,细胞检查临床意义,43,二、一般检查:显微镜检查,第一节脑脊液检查,细菌检查,正常脑脊液无细菌。脑膜炎症时,可直接涂片染色查细菌,或将标本离心后,取沉淀物涂片,提高阳性检出率。常规情况下,需涂片三四张,用于革兰染色、抗酸染色和特殊染色(如果标本蛋白含量太低,可在沉淀物中加少量血清以利固定)。,44,三、一般检查:显微镜检查,第一节脑脊液检查,45,第一节脑脊液检查,肺炎链球菌,46,第一节脑脊液检查,金黄色葡萄球菌,47,第一节脑脊液检查,脑膜炎双球菌,48,第一节脑脊液检查,结核分枝杆菌,49,二、一般检查:显微镜检查,第一节脑脊液检查,寄生虫检查,正常脑脊液无病原体。,50,第一节脑脊液检查,三、临床应用,51,52,53,小结1、一般性状检查:颜色,透明度,凝块或薄膜以及比密。2、化学检查:PH,蛋白质(定性,定量,电泳,免疫球蛋白)葡萄糖(定量分析),氯化物,酶学等。3、显微镜检查:细胞总数及细胞分类,细胞学检查(肿瘤细胞,特殊染色),寄生虫学检查。4、微生物检查:三大染色及细菌培养(脑膜炎奈瑟菌,链球菌,葡萄球菌等等)。,54,1、正常脑脊液中主要为细胞和细胞,葡萄搪含量为血糖的。2、脑脊液中中性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞同时存在主要见于:()A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、病毒性脑膜炎D、脑寄生虫病E脑出血,练习题,55,3、A、脑脊液中细胞数常达数千106/L,以中性粒细胞为主B、细胞数500106/L,中性粒细胞、淋巴细胞及浆细胞同时存在C、细胞数轻度增加,多为数十106/L,以淋巴细胞为主D、细胞数可正常E、细胞数多为数百,以淋巴细胞为主病毒性脑炎、脑膜炎()新型隐球菌性脑膜炎()结核性脑膜炎()化脓性脑膜炎()脑肿瘤(),练习题,56,1、如何鉴别穿刺损伤引起出血(新鲜出血)与蛛网膜下腔或脑出血(陈旧性出血)?2、如何根据实验室检验结果鉴别化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎?3、某成人男性病人,突然嗜睡,唤醒后主诉头痛,不能回答其他问题。体温39,脑膜刺激征阳性。脑脊液标本检查,外观混浊,Pandy试验(十十十),蛋白定量855mg/L,葡萄糖0.9mmol/L,氯化物110mmol/L,白细胞数890106/L,多个核细胞占93,单个核细胞占7,试分析此结果,作出初步判断并指出如何进行确诊。,自测题,57,第二节浆膜腔积液检查,58,概述,浆膜腔:人体的胸腔、腹腔和心包腔、关节腔统称为浆膜腔。浆膜腔积液:根据积液产生的部位不同,分为胸腔积液(胸水)、腹腔积液(腹水)、心包腔积液、关节腔积液。根据浆膜腔积液产生原因和性质,将其分为漏出液和渗出液。漏出液:是通过毛细血管滤出、并在组织间隙或浆膜腔内积聚的非炎症性组织液,多为双侧性。渗出液:多为炎性积液,多为单侧性,59,漏出液和渗出液产生的机制和原因,60,化学和免疫学检查,细菌培养(厌氧菌1ml、结核菌10ml),1,2,浆膜腔穿刺法,一、标本采集和处理,第二节浆膜腔积液检查,61,注意事项立即送检,及时检查过久导致:易出现凝块细胞破坏、变性葡萄糖分解细菌溶解或死亡,一、标本采集和处理,第二节浆膜腔积液检查,62,1、量正常:少量病理情况下:与病变部位和病情严重程度有关,二、一般检查-理学检查,第二节浆膜腔积液检查,63,二、一般检查-理学检查,第二节浆膜腔积液检查,1、量正常:少量病理情况下:与病变部位和病情严重程度有关,64,2、颜色:正常透明淡黄色(1)红色穿刺损伤、恶性肿瘤、结核病(2)白色化脓性细菌感染乳白色见于淋巴管阻塞(3)绿色铜绿假单胞菌感染(4)棕色阿米巴脓肿破溃(5)黑色曲霉菌感染(6)草绿色多见于尿毒症引起的心包积液,二、一般检查-理学检查,第二节浆膜腔积液检查,65,二、一般检查-理学检查,第二节浆膜腔积液检查,3、透明度:正常为清晰透明报告时用“清晰透明”、“微混”、“混浊”描述渗出液:WBC增多,蛋白增多,含大量细菌、真菌时呈不同程度混浊乳糜液:含大量脂肪漏出液:清晰透明,66,4、比重:漏出液1.0185、5、PH值:正常7.407.50。6、正常无凝块渗出液:可自行凝固如有纤维蛋白溶解酶时可无漏出液:一般不易凝固或出现凝块,二、一般检查-理学检查,第二节浆膜腔积液检查,67,二、一般检查-化学检查,第二节浆膜腔积液检查,1、蛋白质蛋白质定性试验粘蛋白定性检查(Rivalta试验)(1)原理:浆膜粘蛋白是多糖和蛋白质形成的复合物,其PH为35,亦称酸性糖蛋白,在稀乙酸溶液中呈白色云雾状沉淀。(2)操作:取100ml蒸馏水于量筒中,加入23滴冰乙酸,混匀取标本1滴,滴入稀乙酸溶液中,如呈白色云雾状沉淀至筒底,则为粘蛋白反应阳性;若不出现白色云雾状沉淀或呈混浊半途扩散消失者,为阴性。(3)结果判断与报告()清晰不显雾状;()渐呈白雾状;()呈白雾状;(2)呈薄白云状;(3)呈浓白云状。,68,二、一般检查-化学检查,第二节浆膜腔积液检查,方法学评价Rivalta试验简易过筛试验、简便、快速、无需特殊仪器蛋白质定量可测各种蛋白,有助于积液性质的判断,参考值:Rivalta试验:漏出液阴性;渗出液阳性蛋白定量:漏出液-30g/L,69,二、一般检查-化学检查,第二节浆膜腔积液检查,临床意义体液中蛋白含量30g/L以下者多为阴性;30-40g/L80以上呈阳性;40g/L以上多为阳性;化脓性、结核性等炎症性疾患,蛋白含量40g/L;恶性肿瘤为2040g/L。非炎症性漏出液(心力衰竭、肾病、肝硬化、静脉淤血等),因毛细血管通进性改变较小,形成的漏出液中血浆蛋白成分亦低,大多10g/L。,70,2、葡萄糖测定方法:葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法,特异性、准确性均佳参考值:3.6-5.5mmol/L漏出液:较血糖稍减低渗出液0.6临床意义:、LD增高见于化脓性、恶性、结核性积液、积液LD/血清LD1.0为恶性积液,二、一般检查-化学检查,第二节浆膜腔积液检查,75,4、酶学:(2)溶菌酶(LZM)参考值:05mg/L鉴别良性与恶性积液、结核性与其他性质积液增高见于感染性积液、结核性积液,二、一般检查-化学检查,第二节浆膜腔积液检查,76,4、酶学:(3)腺苷脱氨酶(ADA)与T淋巴细胞增殖、分化和数量有密切关系用于对结核性积液诊断和疗效观察参考值:045U/L临床意义鉴别结核性和恶性积液结核性阳性率达99%观察疗效抗结核药物治疗有效时,ADA,二、一般检查-化学
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