（药物化学专业论文）中华猕猴桃化学成分研究.pdf

原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。 对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方 式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名： 隘煎旦整 日期：墅! l 呈：姿 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解济南大学有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅和借鉴；本人授权济南大学可以将学位论文 的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 口公开口保密( 年，解密后应遵守此规定) 论文作者签名： 陈醢且毛导师签名 目录 摘要i i a b s t r a c t i v 符号说明v i 前言1 第一章中华猕猴桃的研究状况3 1 1 化学成分3 1 2 药理作用7 1 3 立项依据与研究内容1 0 第二章中华猕猴桃根化学成分的研究1 l 2 1 概述l l 2 2 中华猕猴桃根化学成分的提取与分离1 4 2 3 中华猕猴桃根化学成分的结构鉴定1 9 第三章中华猕猴桃根中三萜类化合物抗肿瘤活性研究3 2 3 1 实验目的3 2 3 2 实验材料3 2 3 3 实验方法3 2 3 4 结果与讨论3 3 结论3 6 参考文献3 7 附录4 1 综述6 6 攻读硕士学位期间的研究成果7 3 致谢7 9 中华猕猴桃根化学成分研究 专业：药物化学 研究生：陈晓晓 导师：杨尚军研究员 摘要 中华猕猴桃根为猕猴桃科( a c t i n i d i a c e a e ) 猕猴桃属( a c t i n i d i al i n d l ) 植物中华猕 猴桃的干燥根，又名藤梨根，具有活血消肿、清热利尿、祛风利湿、散热止血的 功效，可用于治疗胃癌、乳腺癌、肝炎、水肿、跌打损伤、风湿性关节炎、痢 疾、丝虫病等。中华猕猴桃广泛分布于中国大陆的东部，主要分布区为陕两、江 西、湖南、湖北、浙江、安徽省。现代药理研究发现其具有抗肿瘤，抗菌、抗炎、抗 病毒、免疫调节、抗氧化和肝保护等方面的药理活性。据国内外文献报道，中华猕猴 桃根化学成分主要包括三萜类、黄酮类、蒽醌类、糖类、甾醇类和挥发油。 目的：本论文对中华猕猴桃( 4 c t i n i d i ac h i n e n s i sp l a n c h ) 根进行了系统的化学成 分研究，并对其中含量比较大的化合物在抗肿瘤作用方面进行初步的药理活性研究。 方法：中华猕猴桃根经9 5 乙醇提取，浓缩成浸膏，经溶剂分步萃取，应用硅胶 柱层析、s e p h a d e xl h 2 0 柱层析、制备薄层、重结晶等方法，从中华猕猴桃根中分离 纯化单一的化学成分，根据其理化性质并运用i r ，e s i m s ，1 h n m r ，1 3 c n m r 等 波谱方法，参考文献报道的数据，鉴定化合物的结构。 以接种肉瘤( s 1 8 0 ) 的小鼠为模型，观察化合物2 ，3 0 【，2 4 三羟基1 2 烯2 8 乌苏酸 在给药量分别2 0 0 ，1 0 0 ，5 0 m g k g 时对小鼠肉瘤s 1 8 0 的抑制率。 结果：从中华猕猴桃根中分离和鉴定了1 5 个化合物的结构，分别为二十四烷酸 ( i ) ，伊谷甾醇( i i ) ，硬脂酸葡萄糖苷( i i i ) ，硬脂酸( i v ) ，熊果酸( v ) ，表科罗索酸( v i ) ， 2 仅，30 【，2 4 三羟基1 2 烯2 8 一鸟苏酸( v i i ) ，胡萝卜苷( v i i i ) ，芒柄花素( ) ，鹰嘴豆芽 素a ( x ) ，表儿茶素( ) ，奎尼酸内酯( x i i ) ，正丁基o p d 一吡喃果糖苷( x i i i ) ， 蔗糖( x i v ) ，葡萄糖( x v ) 。药理活性研究表明，中华猕猴桃根中得到的2 a ，3 a ，2 4 三 羟基1 2 烯2 8 乌苏酸在给药剂量为2 0 0 m g k g 时，对小鼠肉瘤s 1 8 0 有一定的抑制作 用，而且呈现量效关系。 结论：从中华猕猴桃根中分离鉴定了1 5 个化合物，其中化合物i ，i i i ， x ，x i i 和x l i i 首次从该植物根中分离得到，其中化合物x l i 为新的天然产物。另外， 对从中华猕猴桃根中得到的化合物进行了体内抗肿瘤的初步研究，为今后中华猕猴桃 根的开发利用奠定了基础。 关键词：中华猕猴桃；化学成分；奎尼酸内酯；药理作用 m a bs t r a c t n e n s l s t h ed r i e dr o o t so fa c t i n i d i a c h i n e n s i sp l a n c t t ，a l s oc a l l e dt e n g l i g e n ，w h i c hb e l o n gt o a c t i n i d i a c e a ea n da c t i n i d i al i n d l ，h a v et h ee f f e c t so fp r o m o t i n gb l o o dc i r c u l a t i o n a n dr e d u c t i o no fs w e l l i n g ，r e l i e v i n gi n t e r n a lh e a ta n dd i u r e s i s ， a l l e v i a t i n gr h e u m a t i s m ，r a d i a t i n ga n dh e m o s t a s i s ，a n dt h e ya r eu s e dt ot r e a td i s e a s e s o fg a s t r i cc a n c e ra n db r e a s tc a n c e r , h e p a t i t i s ，e d e m a ，b r u i s e s ，r h e u m a t o i da r t h r i t i s ， d y s e n t e r y , f i l a r i a s i s ，e t a l i ti sw i d e l yd i s t r i b u t e di nt h ee a s t e r no fc h i n aa n d i ti sm a i n l y d i s t r i b u t e ds h a n x i ，j i a n g x i ，h u n a n ，h u b e i ，z h e j i a n ga n da n h u i p h a r m a c o l o g i c a ls t u d i e s o nt h i sp l a n th a v es h o w nt h a ti th a sa n t i t u m o re f f e c t ，a n t i b a c t e r i a le f f e c t ，a n t i i n f l a m m a t o r y e f f e c t ，a n t i - v i r a le f f e c t ，i m m u n o m o d u l a t o r ye f f e c t ，a n t i - o x i d a n ta n dl i v e rp r o t e c t i o ne f f e c t , e t a t h em a i nc o n s t i t u e n t s o fa c t i n i d i ac h i n e n s i sp l a n c h t i t l e t r i t e r p e n e s ， f l a v a n o i d s ，a n t h r a q u i n o n e s ，c a r b o h y d r a t e ，s t e r o l sa n de s s e n t i a lo i l s o b j e e t i v e s ：t os t u d yt h ec h e m i c a lc o n s t i t u t e so ft h er o o to fa c t i n i d i ac h i n e n s i sp l a n c h a n dt h ep r i m a r yp h a r m a c o l o g i c a le f f e c to na n t i - t u m o ro ft h ec o n s t i t u t e so fh i g hq u a n t i t y m e t h o d s ：t h ed r i e dr o o to fa c t i n i d i ac h i n e n s 西p l a n c h w e r ep e r c o l a t e d 、析t h9 5 e t o h a n dp a r t i t i o n e d 谢t hp e t r o l e u me t h e r , e t h y la c e t a t e ，n - b u t y la l c o h o lf r a c t i o n a l l y c o n s t i t u e n t sw e r ei s o l a t e da n dp u r i f i e db ys i l i c ag e lc o l u m nc h r o m a t o g r a p h y , s e p h a d e x l h 一2 0c o l u m nc h r o m a t o g r a p h y , t l cp r e p a r a t i o na n dr e c r y s t a l l i z a t i o n t h e i rs t r u c t u r e s w e r ei d e n t i f i e do nt h eb a s i so ft h e i rc h e m i c a la n dp h y s i c a lp r o p e r t i e sa sw e l la st h es p e c t r a d a t ao fi i le s i m s ，1 h - n m ra n d1 3 c n m re t a l t h ei n h i b i t i o ne f f e c to f 2 a ，3 a ，2 4 - t r i h y d r o x y u r s 12 一e n 一2 8 一o i ca c i do ns a r c o m a18 0t u n l o r ( s 18 0 ) 一 b e a r i n gm i c ew a so b s e r v e da td o s a g e so f2 0 0 ，10 0a n d5 0m g k gb ys y s t e m a t i c a l l yt o i v m e a s u r et h es18 0t u m o ri n h i b i t i o nr a t e r e s u l t s ：f i f t e e nc o m p o u n d sw e r ei s o l a t e df r o ma c t i n i d i ac h i n e n s 括p l a n c ka n dw e r e d e t e r m i n e da sf o l l o w s ：( n ) 一t e t r a c o s a n o i c - a c i d ( i ) ，f l - s i t o s t e r o l ( i i ) ，s t e a r y l - p - d g l u c o p y r a n o s i d e ( i i i ) ，s t e a r i ca c i d ( i v ) ，u r s o l i ca c i d ( v ) ，3 - e p i c o r o s o l i c a c i d ( v i ) ， 2 a ，3 a ，2 4 t r i h y d r o x y u r s 一12 - e n 2 8 - o i ca c i d ( v i i ) ，d a u c o s t e r o l ( v i i i ) ，f o r m o n o n e t i n ( i x ) ， b i o c h a n i na ( x ) ，( ) - e p i c a t e c h i n ( x i ) ，q u i n i d e ( x i i ) ，脬b u t y l p d f r u c t o p y r a n o s i d e ( x i i i ) ，s u c r o s e ( x i v ) ，g l u c os e ( x v ) t h ep h a r m a c o l o g i c a ls t u d i e sh a v es h o w nt h a t 2 0 l ，3 a ，2 4 一t r i h y d r o x y u r s - 12 - e l l 一2 8 一o i ca c i da td o s a g e so f2 0 0m g k gh a v es o m ea n t i t u m o r a c t i v i t y , a n dt h e r ew a sad o s e e f f e c tr e l a t i o n s h i p c o n c l u s i o n s ：f i f t e e nc o m p o u n d sw e r ei s o l a t e df r o ma c t i n i d i ac h i n e n s 括p l a n c h a m o n gt h e m c o m p o u n d si ，i i i ，i v ，i x ，x ，x i ia n d x i l lw e r ei s o l a t e df r o ma c t i n i d i a c h i n e n s i sp l a n c kf o rt h ef i r s tt i m e c o m p o u n d sx 1 1w a si s o l a t e df o rt h ef i r s tt i m ea s n a t u r a ls u b s t a n c e t h ei n v e s t i g a t i o no na n t i t u m o re f f e c to fa c t i n i d i ac h i n e n s i sp l a n c h i n d i c a t e dt h a tt h ec o m p o u n ds h o w e da n t i t u m o ra c t i v i t y i tp r o v i d e st h ee v i d e n c ef o rt h e 劬 f u r t h e ru t i l i z a t i o na n dr e s e a r c h k e yw o r d s ：a c t i n i d i ac h i n e n s i sp l a n c h ：c h e m i c a lc o n s t i t u t e s ； ，- q u i n i d e p h a r m a c e u t i c a le f f e c t v 1 h n m r 1 3 c n m r i r t l c e s i m s m p h s q c h m b c d m s o t m s 符号说明 h y d r o g e n o u sn u c l e a rm a g n e t i cr e s o n a n c e c a r b o n i cn u c l e a rm a g n e t i cr e s o n a n c e i n f r a r e da b s o r p t i o nm a s ss p e c t r u m t h i n - l a y a rc h r o m a t o g r a p h y e l e c t r o s p r a yi o n i z a t i o nm a s ss p e c t r u m m e l t i n gp o i n t h e t e r o n u c l a e rs i n g eq u a n t u mc o r r e l a t i o n h e t e r o n u c l a e rm u l t i p l e b o n dc o r r e l a t i o n d i m e t h y ls u l f o x i d e t e t r a m e t h y l s i l a n e v i 核磁共振氧谱 核磁共振碳谱 红外光谱 薄层层析 电喷雾电离质谱 熔点 异核单量子相关二维谱 异核多键相关二维谱 二甲基哑砜 四甲基硅烷 渗f 丘学j 卜。o ? 7 诊文 】l l - _ _ - 刖舌 天然药物是药物的一个非常莺要的组成部分，它有着数千年的历史。我国人民在 与疾病长期斗争的过程中，积累了大量的用中草药防病治病的经验，而且临床基础非 常雄厚，为保障人类的生命健康发挥了重要作用，而且与中医一起构成了中华民族的 文化瑰宝，是中华民族五千年来得以繁衍昌盛的一个重要原因，也是全人类的宝贵遗 产。中药冈其副作用小，疗效好，活性强等优点，逐渐受到医药界的关注。 迄今为止，人们已对中草药进行了大量的化学成分方面的研究，并从中分离得到 了大量的化合物，其中不少化合物已应用于临床。然而，中药中的化学成分众多，大 多数情况下发挥药效的物质不是其中的某一个成分，而很可能是某一类或某几类化学 成分的协同作用。结合中药中某确切疗效，采用现代科学技术，应用各种提取、分 离、纯化、鉴定、分析等手段，从微观上逐步弄清中药中所含的化学成分的种类、结 构、理化性质及含量，从而用现代科学知识和技术来研究中药的主治功效，为真征揭 示其药效的物质基础提供强有力的科学依据。 猕猴桃科( a c t i n i d i a c e a e ) 猕猴桃属( a c t i n i d i al i n d l ) 植物为落叶、半落叶的常 绿藤本。全属有6 6 种，主产地为哑洲，分布在马来两亚至西伯利亚的东部。我国是优 势主产区，分布在中国大陆的东部，主要分布区为陕西、江西、湖南、湖北、福建、 浙江、河南、安徽等省。我国利用猕猴桃的历史悠久，早在二千多前的尔雅 中即有记载，东晋著名学者郭璞将其注作“羊桃”，而后本草衍义、本草纲 目中都有记载。猕猴桃全株均可作为药用，中医认为其果性寒，味酸、甘，能调 理中气、生津润燥、解热除烦、通淋，用于治疗消化不良、食欲不振、呕吐、烧烫伤 等症；其根、根皮性寒、味苫涩，具有活血消肿、清热利尿、祛风利湿、散热 止血的功效，可用于治疗胃癌、乳腺癌、肝炎、水肿、跌打损伤、风湿性关节 炎、痢疾、丝虫病等。近年来的研究发现中华猕猴桃根及其制剂都具有较好的抗肿 瘤作用，尤其对消化系统的肿瘤治疗效果更为显著。 近年来，我国学者对猕猴桃属植物中华猕猴桃、葛枣猕猴桃、中越猕猴桃、软枣 猕猴桃、毛花猕猴桃、美味猕猴桃的果实、根茎和枝叶，均进行了一系列的化学成分 研究；药理活性的研究主要集中在抗肿瘤和保肝活性方面。对于中华猕猴桃根，国内 外仅有少量关于化学成分的研究，药理活性的研究也停留在浅层次的抗肿瘤研究方 面。所以，进行其抗肿瘤深层次物质基础的研究，对于评价中华猕猴桃根的药用价值 和全方面开发有着非常重要的意义。本实验拟对中华猕猴桃根进行一系列下面的研 1 审# 妒水姚喂化唆兮口宪 究： 中华猕猴桃根化学成分的提取与分离：采用多种色谱技术分别对中华猕猴桃根的 乙醇提取物进行系统分离纯化，得到其单一的化学成分。 中华猕猴桃根化学成分的结构鉴定：对分离得到的化合物，采用e s i m s ，i r ， u v ，1 h n m r ，1 3 c n m r ，h s q c ，h m b c 等波谱方法对化合物的结构进行鉴定。 对分离得到的三萜类化合物进行初步的药理活性筛选，探讨其生物活性的物质基 础。 2 一 滓书上学酊! 学伫论之 第一章中华猕猴桃的研究状况 中华猕猴桃属于猕猴桃科猕猴桃属植物。中华猕猴桃又名阳桃、猕猴桃、藤梨、 羊桃、羊桃藤，为大型落叶藤本植物。该植物主要分布在中国大陆的东部，分布区为 湖北、陕西、江西、湖南、福建、浙江、河南、安徽等省，常与美味称猴桃交叉重叠 分布，但更偏南，而且分布的海拔高度也要低约4 0 0 米【1 1 。我国利用猕猴桃的历史悠 久，早在二千多前的尔雅中即有记载，东晋著名学者郭璞将其注作“羊桃” 1 2 】。而后本草纲目、本草衍义中也都有记载3 】【4 1 。中华猕猴桃全株都可作 为药用，中医认为其果性寒，味酸、甘，能调理中气、生津润燥、解热除烦、通淋， 用于治疗消化不良、食欲不振、呕吐、烧烫伤等症；其根、根皮性寒、昧苦涩，具 有活血消肿、清热利尿、祛风利湿、散热止血的功效，可用于治疗肝炎、胃癌、 乳腺癌、水肿、跌打损伤、风湿性关节炎、痢疾、丝虫病等【5 】【6 1 。 1 1 化学成分 中华猕猴桃所含的化学成分非常丰富。据国内外的研究报道，到目前为止，已经 从中华猕猴桃的多个药用部位( 果实、根、茎、叶) 中分离得到多种化学成分，主要 有三萜类、黄酮类、糖类、甾醇类、挥发油、生物碱、有机酸类、葸醌类等化合物。 其中三萜类化合物在中华猕猴桃全株中均有发现：黄酮类化合物在猕猴桃中分布广 泛，叶中含量最丰富。 1 1 1 三萜类 三萜类化合物在猕猴桃属植物中普遍存在，而且大多是1 2 一烯2 8 乌苏酸类型的三 萜化合物，且在2 ，3 ，2 3 ，2 4 位多具有羟基取代。该植物也含有齐墩果烷类的三 萜酸，但含量比较少。中华猕猴桃中所含的三萜化合物的名称和结构见表1 1 和图1 1 。 3 4 5 6 7 8 9 1 0 3 p ，2 3 一二羟基一1 2 - 烯2 8 一鸟苏酸 ( 3p ，2 3 一d i h y d r o x y u r s 一12 - e l l - 2 8 一o i ca c i d ) 3 p ，2 4 一二羟基1 2 - 烯- 2 8 一乌苏酸 ( 3 p ，2 4 d e h y d r o x y u r s 一1 2 一e n - 2 8 一o i ca c i d ) 2 0 【，30 【，2 3 ，2 4 。四羟基1 2 烯2 8 鸟苏酸 ( 2 q ，3 0 【，2 3 ，2 4 一d e h y d r o x y u r s 12 e l l 2 8 - o i ca c i d ) 2 q - 羟基齐墩果酸( 2 a - h y d r o x y o l e a n o l i ca c i d ) 2 0 【一羟基乌苏酸( 2 a h y d r o x y u r s o l i ca c i d ) j a c o u m a r i ca c i d 2 3 羟鲞鸟苏酸( 2 a - h y d r o x y u r s o l i ca c i d ) 3 p o - l 酰鸟苏酸( 3 p - 0 - a c e t y l u r s o l i ca c i d ) 7 7 7 8 8 8 8 8 1 1 2 a ，2 4 二羟基乌苏酸( 2 0 【，2 4 一d i h y d r o x y u r s o l i ca c i d ) 8 1 22 a ，3 0 【，2 3 三羟基。1 2 烯2 8 鸟苏酸8 ( 2 0 【，3 0 【，2 3 - t r i h y d r o x y u r s 一12 一e n - 2 8 一o i ca c i d ) 1 3 2 0 【，3 a ，2 3 三羟基。1 2 ，2 0 ( 3 0 ) 二烯2 8 鸟苏酸 8 ( 2 a ，3 a ，2 3 一t r i h y d r o x y u r s 一12 ，2 0 ( 3 0 ) 一d i e n - 2 8 - o i ca c i d ) l4 2 0 l ，3p - d i h y d r o x y u r s 一12 - e n 一2 8 ，30 - o l i d e 9 15 2 0 【，3 p ，2 4 一t r i h y d r o x y u r s 一12 - e n - 2 8 ，3 0 - o l i d e 9 1 6 蔷薇酸( e u s c a p h i ca c i d ) 8 1 7 表科罗索酸( 3 - e p i c o r o s o l i ca c i d ) 9 l8 齐墩果酸( o l e a n o l i ca c i d ) 9 1 9 积雪草酸( a s i a t i ca c i d ) 9 2 0 2 0 【，3 a ，l9 ，2 4 一t e t r a h y d r o x y u r s 一12 一e l l 一2 8 一o i ca c i d 9 2 l 3 b h y d r o x y u r s 1 2 1 8 d i e n 2 8 o i ca c i d 9 4 泮声，卜学毋j 学，? i 淦支 r 3r 4 r 1r 2r 3r 4 1ho hc h ，c h 3 3ho hc h 2 0 hc h 3 4ho hc h ac h ，o h 7o ho hc h 3 c h 3 9hhc h 2 0 hc h a 1 0h c h z c o c h 3c h 3 1 1o h o hc h ，c h ，o h 1 9o h o hc h 2 0 hc h 3 r 1 2o h 5o h 1 2o h 1 7o h o 8 1 1 2 黄酮类 o h r 2r 3r 4 o h c h 3c h 2 0 h o hc h 2 0 hc h 2 0 h o hc h 2 0 hc h 3 o hc h 3c h 3 r r 3 r 4 o h r 1r 2r 3r 4 6o ho hc h 3c h 3 1 8ho hc h 3c h 3 1 5 o h h o ， h o t 1 3 图1 1 中华猕猴桃中二萜类化合物的结构 1 6 国内外多位学者【l o 】【1 1 1 对中华猕猴桃的化学成分进行了研究，通过理化手段和光 谱学等方法对黄酮类化合物进行了分析，发现该植物叶中含有黄酮单糖苷和双糖苷。 5 出。# 赞咎姚喂化戏。弘宦 昌军等从中华猕猴桃根中分离得- n 8 个黄酮类化合物：( ) 一表阿福豆素、( + ) 阿福豆 素、( ) 表儿茶素、( + ) - 儿茶素、( ) 表阿福豆素( 4 p 一8 ) ( - ) 一表儿茶、( - ) - 表儿茶素 ( 4 p _ 8 ) ( ) 表儿茶素、( + ) 一阿福豆素( 4 a 一8 ) ( + ) - 阿福豆素、( + ) - 儿茶素( 4 0 【一8 ) ( + ) - 儿茶 素。k a l a n d i y aa 等1 1 4 】从中华猕猴桃果中分离得到1 个黄酮双糖苷和4 个单糖苷：槲皮 素3 o - a l 鼠李糖苷，槲皮素3 o - f j d 葡萄糖苷，山奈酚一3 o - a l 一鼠李糖昔，山奈酚 3 - 0 b d 葡萄糖苷，芦丁。此外还有其它黄酮苷成分【1 3 】：槲皮素- 3 o - a 吡喃鼠李糖 ( 1 - 4 ) 0 【吡哺鼠李糖( 1 6 ) p 吡喃半乳糖苷，山奈酚一3 一o - a 一吡喃鼠李糖- ( 1 4 ) a 一吡喃鼠 李糖( 1 6 ) p 一吡喃葡糖糖苷，山奈酚一3 o - a 吡喃鼠李糖( 1 4 ) 一仅一吡喃鼠李糖( 1 6 ) 一p - 吡 喃半乳糖苷，。 1 1 3 甾醇类 胡萝卜苷，p 谷甾醇等是猕猴桃属植物中普便存在的甾醇类化合物。崔莹等8 1 对 中华猕猴桃根乙酸乙酯萃取部位的化学成分进行了研究，从中分离得到3 个甾醇类化 合物，经鉴定分别为：p 谷甾醇，3 p ，6 0 【二羟基谨甾烷，( 2 2 e ，2 4 r ) 一麦角甾- 4 ，6 ，8 ( 1 4 ) ，2 2 - 四烯3 酮，。 1 1 4 酚类化合物 昌军蚴等从中华猕猴桃根中分离得到了4 个新的酚类化合物p l a n c h o l sa d 。其 中化合物p l a n c h o l s a 和p l a n c h o l sb 对细胞a 3 8 8 和a 3 9 9 具有明显的细胞毒活性。 1 1 5 蒽醌类 姬政等【1 5 1 从硬毛中华猕猴桃根中分离得到了6 个葸醌类化合物：大黄素、大黄素 甲醚、羟基大黄素、大黄素8od d 葡萄糖苷、q u e s t i n 和大黄酸。 1 1 6 其它成分 中华猕猴桃果实中含有人类所需要的1 7 种氨基酸及柠檬酸、果酸和磷、钾、钙、 镁等矿物元素。有人对中华猕猴桃的挥发油也进行了一些研究1 6 】【1 7 】【1 引，并且发现其 猕猴桃挥发油中含有0 【和p p i n e n e 蒎烯。中华猕猴桃的叶及根均含有葡萄糖、果糖、蔗 糖、中肌醇，麦芽糖等糖类成分19 1 。从中华猕猴桃根2 0 1 中分离得到布洛芬，布洛芬 酸，布洛芬6 甲基醚，c o 羟基大黄素，布洛芬一8 b d 葡糖糖苷，布洛芬一8 一甲基醚。 此外还有绿原酸，原花青素、3 , 4 二羟基苯甲酸、羟基苯丙烯酸【2 1 1 、l 茶氨酸【2 2 1 、油 酸、亚油酸、亚麻酸、软脂酸、硬脂酸、花生四烯酸2 3 1 ，另外还含有人类所必须的 6 渗毫，、学矽 。学! 二沦支 各种氨基酸。王金秋【2 4 l 等对中华猕猴桃的种子中的脂肪酸类化学成分进行了系统的分 析，发现主要含有亚麻酸和亚油酸，占总脂肪酸的8 9 4 0 。 f u j i o 等【2 5 1 从中华猕猴桃的新鲜叶中分离得到一个新的葡萄糖苷猕猴桃苷 ( k i w i i o n o s i d e ) 。中华猕猴桃的茎和果实中含有秦皮苷和马栗树皮苷1 2 刚。此外从中华 猕猴桃中分离得到的猕猴桃碱( a c t i n i d i n e ) 【2 7 1 ，它是一种不常见的单萜类生物碱，具 有抗肿瘤、降血糖等活性。阎家麒等1 2 8 】从中华猕猴桃根中分离得到的中华猕猴桃多糖 ( a c t i n i d i ac h i n e n s i sp l a n c hp o l y s a c c h a r i d e ，a c p s ) 是一种有效的免疫调节剂，而且具 有很强的抗细菌感染作用。有文献报道【2 9 1 ，中华猕猴桃根中鞣质的含量约为1 2 1 0 。 1 2 药理作用 中华猕猴桃具有生津润燥调中理气，解热除烦，保健长寿的功效，主治食欲不振、 淋巴结核、肝炎、呕吐、坏血病、烧烫伤等症；其根具有活血消肿、清热利尿、祛 风利湿、散热止血的功效。中华猕猴桃根在民间常作为复方制剂，主要用于食道 癌、胃癌、大肠癌的治疗，并取得了一定的疗效。现代药理学研究表明中华猕猴桃具 有抗肿瘤、抗突变、抗病毒、降血脂、保肝、提高免疫力等多种药理活性，具有广泛 的开发前景。 1 2 1 抗肿瘤作用 张书芳等【3 0 1 研究了哑硝胺、亚硝酸钠对雄性昆明种小鼠，亚硝酸钠对雄性s d 大 鼠肝脏脂质过氧化物水平和肝脏抗氧化酶系活力作用，并且探讨了中华猕猴桃果汁对 该作用的影响。实验结果表明，中华猕猴桃汁能通过消除亚硝酸盐和抗脂质过氧化作 用从而降低亚硝酸盐、亚硝胺对机体的毒性，从而降低癌症的发生率。卢丹【3 1 1 等通过 研究报道了中华猕猴桃果实中的多糖f p 2 具有显著的抗肿瘤活性，对肉瘤$ 1 8 0 n * 瘤细 胞的生长有很明显的抑制作用，当给药剂量为1 5 0 m g k g 时，其抑制率达到5 4 2 0 。 邹益友等【3 2 1 用乙酸乙酯萃取猕猴桃根的水提液中的中等极性的活性成分( 葸醌 类成分) ，用噻唑蓝比色法研究其抗肿瘤活性。实验结果显示，乙酸乙酯萃取液对结 肠低分化腺癌细胞的抑制率为6 0 1 0 ，对白血病细胞的抑制率为5 4 2 4 。这说明猕 猴桃根中提取的中等极性复合溶液能抑制肿瘤细胞d n a 的合成和诱导t 4 淋巴细胞产 生i l 2 ，促进天然杀伤性细胞对y a c 1 淋巴细胞的毒作用，从而杀伤肿瘤细胞。实验 结果表明，猕猴桃根提取物中的蒽醌类成分对肿瘤细胞有明显的杀伤作用。 临床上应用发现：中华猕猴桃根与健脾养阴的中药结合使用，对属于癌前病变的 7 吐! 。f 婴咎姚燃化学t 戈兮碑文 萎缩性胃炎伴肠化生，有比较好的疗效【3 3 1 。李吴等 3 4 1 研究了藤梨根对人胃低分化腺 癌b g c 8 2 3 细胞的作用，发现其对胃癌b g c 8 2 3 细胞有明显的杀伤作用。卫培峰等【3 5 】 在动物实验中证明了藤梨根能有效诱导小鼠胃癌细胞的凋亡，并且与对照组细胞的凋 亡率和死亡率有显著差异。阮叶萍等【3 6 】观察藤梨根和益气补肾口服液对小鼠s 1 8 0 实 体瘤的抑制作用，实验结果发现两者都对s 1 8 0 实体瘤有抑制作用，但藤梨根的抑制作 用弱于益气补肾口服液。楼日酉君等【3 6 l 观察猕猴桃根提取物的体内、外抗肿瘤活性，结 果发现其对小鼠肝癌模型和人肝癌裸小鼠移植瘤模型有一定的抗肿瘤活性，且其活性 成分主要存在于极性较小的部位。 国宏莉唧等人用m t t i ： ：色法检测藤梨根的正丁醇提取物在不同时间和不同浓度 对e c a - 1 0 9 细胞的生长抑制作用，t u n e l 法检测它对癌细胞生长的诱导凋亡效应，免 疫组化s p 法检测其凋亡相关蛋白b a x 和b c l 2 的表达，实验结果表明，提取物对人食管 癌e c a - 1 0 9 细胞的生长抑制作用随着作用时间的延长和药物浓度的升高而增强；它对 人食管癌e c a - 1 0 9 细胞仃明显的凋亡效应，这说明藤梨根的正丁醇提取物能够有效的 抑制人食管癌e c a - 1 0 9 细胞生长。曹书芬【3 9 】等人用m t t 比色法检测藤梨根的乙酸乙酯 提取物对人食管癌细胞生长的抑制作用，结果显示其生长抑制率可达至1 j 7 7 5 0 ，这说 明藤梨根的乙酸乙酯提取物能有效抑制人食管癌e c a - 1 0 9 细胞的生长。 1 2 2 抗氧化和保肝作用 吴瑾瑾等研究了浙江产的中华猕猴桃根中化学成分的活性，发现其具有消除活 性氧自由基的作用，并且无副作用。阎家麒等1 2 8 】用f e n t o n 反应产生羟基自由基o h 。和 二甲基亚砜( d m s o ) 碱性体系产生超氧阴离子自由基0 2 ，用电子顺磁共振捕捉技术 观察了中华猕猴桃多糖( a c p s ) 对模型体系中产生的o h 。和0 2 量的变化情况，结果表 明a c p s 对o h 和0 2 。自由基具有很强烈的清除作用。统计学处理这两种自由基对照组 和实验组之间有显著性差异( p 0 0 1 ) ，这说明中华猕猴桃多糖有与机体内源性抗自由 基体系相类似的作用能力，为抗衰老作用的研究提供进一步的理论依据。唐筑灵等【4 1 l 用维生素c 作为阳性实验对照组，观察中华猕猴桃( a c t i n i d i ac h i n e n s i sp l a n c h ，a c p ) 原汁对h 2 _ i0 2 。i 所致的溶血和膜脂质过氧化产物丙二醛产生水平的影响。结果发现抗 h 2 。l0 2 。i 的溶血作用a c p 原汁比维生素c 强，a c p 原汁还有抑制h 2 10 2 。i 所致膜脂质过氧 化物丙二醛产生水平的作用。 舒思洁等观察猕猴桃原汁( a c p ) 对实验性肝损伤大鼠血清转氨酶活性的影响，以 血清谷丙转氨酶( s g p t ) 和血清谷草转氨酶( s g o t ) 作为指标。实验结果发现，a c p r 沣专j 、学酚! 学! ! 论芝 明显降低s g p t 和s g o t 活性( p 0 0 5 ，差异无显著性，说明s s a p 液能协同少量的r i l 2 刺激机 体的免疫系统，增强机体细胞的免疫功能，提高机体的免疫力，是一种良好的天然免 疫增强剂。 1 2 4 抗病毒作用 邵传森一5 1 等用反向间接血凝试验法和双抗体夹心法检测中华猕猴桃多糖 ( a c p s r ) 在m a l 0 4 细胞上对轮状病毒d s l 株及s a i 株的抑制作用时，发现细胞先 感染轮状病毒后加a c p s r ，则对轮状病毒有抑制作用，而先用a c p s r 处理细胞后， 则不能保护细胞免受感染。猕猴桃根提取液中的猕猴桃多糖( a c p s r ) 是一种新的免 疫调节剂，有很强的抗细菌感染的作用。 1 2 5 降血脂作用 刘晓鹏等【4 6 l 研究猕猴桃的复方口服液( 以野生中华猕猴桃汁为基质，配以丹参、 绞股蓝等中药) 对高脂血病的预防和治疗及其与抗脂质过氧化的关系时发现，服用猕 9 t 扛# 纺咎桃壤化学吱兮碑宦 猴桃的复方口服液可以抑制喂饲料建立高脂血症模型的w i s t a r 大鼠的体重、体脂( 肾 周及周辜脂肪重量) 增加，说明它具有预防和减少体内脂肪沉积的良好作用，同时还 可以抑制血清总胆同醇( t c ) 、甘油三酯( t g ) 、低密度脂蛋白( l d l c ) 、高密度脂蛋 白( h d l c ) 水平的增加，能够提高血清高密度脂蛋白胆固醇( h d i c ) 水平。因此进 一步证实了猕猴桃复方口服液对高脂蛋白血症，心血管疾病，动脉粥样硬化都具有防 治作用。 1 3 立项依据与研究内容 猕猴桃在民间作为药用，已有较长的历史，历代本草中都有记载。猕猴桃属中许 多种植物的根、茎、果实、叶等药用部位具有抗肿瘤、抗突变和抗畸变作用，这已逐 渐引起国内外学者的霞视，预期町从中发掘出用于预防及治疗肿瘤的天然药物。中华 猕猴桃根药用价值很高，在民间主要用于治疗消化道肿瘤、肝炎等症。现代中药学对 猕猴桃根的研究多集中于化学成分及提取物的抗肿瘤活性的分析，而关于猕猴桃根的 抗肿瘤、抗病毒等活性成分的筛选却未见报道，限制了该味中药的深入开发。中华猕 猴桃根抗肿瘤疗效好，并且在我国分布广泛、资源丰富，具有广阔的开发前景。基于 此，我们对中华猕猴桃根进行了较系统的化学成分和药理活性研究，期望能对中华猕 猴桃根的合理利用、临床应用和天然抗癌药物的开发方面提供科学的理论依据。 1 0 中华猕猴桃( a c t i n i d i ac h i n e n s i sp l a n c l g ) 的干燥根经9 5 乙醇冷浸提取，浓缩成浸 膏，分别用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇萃取，反复硅胶柱层析，c l s 柱层析、重结晶 等方法从中分离纯化得到1 5 种化合物，通过理化常数测定和光谱数据分析等手段鉴 定了其中1 5 个化合物的结构，分别为二十四烷酸( ( n ) 一t e t r a c o s a n o i c a c i d ，i ) ，p - 谷甾 醇( s i t o s t e r o l ，i i ) ，硬脂酸葡萄糖苷( s t e a r y l p d g l u c o p y r a n o s i d e ，i i i ) ，硬脂酸( s t e a r i c a c i d ，i v ) ，熊果酸( u r s o l i ca c i d ，v ) ，表科罗索酸( 3 - e p i - c o r o s o l i c a c i d ，v i ) ，2 a ，3 a ，2 4 - 三羟基1 2 烯2 8 一乌苏酸( 2 a ，3 a ，2 4 t r i h y d r o x y u r s 1 2 e n - 2 8 o i ca c i d ，v i i ) ，胡萝卜苷 ( d a u c o s t e r o l ，v i i i ) ，芒柄花素( f o r m o n o n e t i n ，i x ) ，鹰嘴豆芽素a ( b i o c h a n i n a ，x ) ， 表儿茶素( ( ) - e p i c a t e c h i n ，x i ) ，奎尼酸内酯( r - q u i n i d e