临检严茹红.ppt

,项目评价阿米巴滋养体从粪便脓血和稀软处取材，立即送检；运送及检查时均需保温，保持滋养体活力血吸虫孵化毛蚴标本至少30g，必要时取全份标本送检；如查寄生虫虫体及作虫卵计数时，应采集24h粪便蛲虫卵用浸泡生理盐水棉签或透明薄膜拭子于晚12时或晨排便前，自肛门皱襞处拭取粪便送检连续送检原虫和某些蠕虫有周期性排卵现象，未查到寄生虫和虫卵时，应连续送检3天，以免漏检,一、标本采集寄生虫检验:注意采集时间与温度,二、标本处理,1检毕标本应作为生物垃圾进行焚化处理2容器、玻片等应以消毒液浸泡24h后流水冲洗晾干备用,一、理学检验：粪便量,与进食种类、量及消化器官功能状态有关，一般健康成人排便次数可隔天1次到每天2次，每次排便量约为100-200g，当胃肠、胰腺功能紊乱或有炎症时粪便量及排便次数可增加,颜色临床意义黄褐色正常人含粪胆素淡黄色乳儿便；服用大黄、山道年绿色食用大量绿色蔬菜；甘汞，乳儿肠炎，胆绿素白色、灰白色钡餐后、胆道阻塞、阻塞性黄疸、胰腺病红色食用西瓜蕃茄等；直肠癌、肛裂、痔疮出血果酱色阿米巴痢疾，肠套，食用大量咖啡、巧克力黑色或柏油色上消化道出血，服用铁剂与铋剂,一、理学检查：颜色,一、理学检查：性状,一、理学检验：寄生虫,粪便中可见虫体或其片段,二、化学检查,1粪便隐血试验（fecaloccultbloodtest、FOBT）上消化道出血量少于5ml，粪便中无可见的血液，红细胞破坏，显微镜检查也未见红细胞，而需采用化学法、免疫法等才能证实的出血，称为隐血。,检测原理：化学法,血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化氧化底物邻甲联苯胺脱氢为邻甲偶氮苯（显蓝色）,方法学评价,方法学评价,各种粪便隐血试验均有优缺点，国内外尚无统一公认的标准化方法，美国胃肠病学学会推荐愈创木酯化学法或免疫法,因素评价标本因素假阴性：因粪便标本陈旧灵敏度减低，血液在肠道停留过久，血红蛋白被细菌降解，血红素消失假阳性：粪便隐血来源于非消化道如齿龈出血、鼻出血、月经血等食物因素假阳性见于含血红蛋白的动物血，如鱼、肉、肝脏，含过氧化物酶的叶绿素新鲜蔬菜药物因素假阳性：使用铁剂、铋剂，引起胃肠道出血药物如阿司匹林、皮质醇、非类固醇抗炎药、引起肠炎药物、秋水仙素、萝芙木碱中药假阴性：服用大量维生素C或其他具有还原作用药物器材和试剂假阳性：器材污染铜离子、铁离子、消毒剂、溴、铁、硼酸、过氧化物酶假阴性：过氧化氢浓度低或过氧化氢失效、试剂保存温度和湿度不当如冰冻、受光、受热和受潮等可失效操作过程假阴性见于试验反应时间不足、显色判断不准。试验前在标本中加水减低灵敏度，而实际上同时增高了假阳性,干扰因素与评价（化学法）,检测原理：免疫法,常用免疫胶体金法。胶体金是由氯化金和枸橼酸合成的胶体物质呈紫红色。胶体金与羊抗人血红蛋白单克隆抗体和鼠IgG吸附在特制的乙酸纤维膜上，形成一种有标记抗体的胶体金物质，再在试带上端涂上包被羊抗人Hb多抗和羊抗鼠IgG抗体。检测时，将试带浸入粪悬液中，悬液通过层析作用，沿试带上行。如粪便中有Hb，在上行过程中与胶体金标记羊抗人Hb单抗结合，待行至羊抗人Hb多抗线时，形成金标记抗人Hb单抗-粪Hb-羊抗人Hb多抗复合物，在试带上显现1条紫红色线（阳性），试带上无关的金标记鼠IgG随粪悬液上行至羊抗鼠IgG处时，与之结合形成另1条紫红色线，为试剂质控对照线。,方法学评价：免疫法,免疫胶体金法优点较多灵敏度和特异性：美国癌症学会认为免疫法在特异性和灵敏度上等于或好于愈创木酯法，不受食物因素影响，无须禁食，不受动物血红蛋白和辣根过氧化物酶的干扰,因素评价生理因素胃肠道每24h排出血液0.5-1.5ml，个别可达3ml，长跑运动员可达4ml，服用阿司匹林2.5g，即可引起消化道出血2-5ml，免疫学检查呈阳性标本因素假阴性见于消化道大量出血，出现后带现象，还见于上消化道出血，血红蛋白降解变性，失去免疫原性或单抗与血红蛋白不匹配食物因素各种动物血红蛋白、辣根过氧化物酶无干扰药物因素正常人或服用刺激胃肠道药物后可造成假阳性器材和试剂试剂保存不当或失效出现假阴性操作过程直接使用低温保存（15以下）的标本试验，可出现假阴性结果,干扰因素与评价（免疫法）,其他方法,1血红蛋白荧光测定：采用卟啉荧光血红蛋白定量试验，除可测定粪便中未降解的血红蛋白外，还可测定血红素衍化物卟啉，克服了化学法和免疫法受血红蛋白降解而影响检测结果的缺点，但方法复杂2放射性核素铬（51Cr）法：可测定出血量，灵敏度高，但价格贵且有放射性污染3转铁蛋白法（Tf）：灵敏度达2mg/L，可作为消化道出血的有效标志，联合检测Tf和Hb，假阳性率低，有助于筛检早期大肠癌4HemeSelect免疫法：采用反向被动血凝法原理，检测完整的血红蛋白和球蛋白，但费用高,目前认为免疫法主要用于检测下消化道出血，对大肠癌的筛选最合适,化学法用于诊断上消化道出血更可靠。常用胶体金法做直肠肿瘤出血的初筛，而化学法常做上消化道出血的筛查。上消化道出血时化学法比免疫法阳性率高；下消化道出血时免疫法比化学法灵敏度高。最好多种方法联合应用。,临床意义：主要用于消化道出血，消化道肿瘤筛检和鉴别（1）消化道恶性肿瘤，FOBT持续阳性，约87%的肿瘤患者隐血试验阳性。（2）消化性溃疡，FOBT呈间断阳性。（3）钩虫病、溃疡性结肠炎、肠结核以及胃病、Crohn病可呈阳性。用于消化道肿瘤的早期筛查，降低死亡率,二、化学检查,临床意义,粪便脂肪增高见于1胰腺疾病：慢性胰腺炎、胰腺癌、胰腺纤维性变等2肝胆疾病：胆汁淤积性黄疸、胆汁分泌不足、病毒性肝炎、肝硬化等3小肠病变：乳糜泻、Whipple病、蛋白性肠病等4其他：胃、十二指肠瘘、消化性溃疡等,三、显微镜检查（细胞）,三、显微镜检查（细胞）,1、红细胞：下消化道出血痢疾结肠炎、直肠/结肠癌2、白细胞：菌痢其他病原体感染及溃疡性结肠炎寄生虫感染与过敏性肠炎,3、大吞噬细胞：菌痢及直肠炎症。4、肠粘膜上皮细胞：肠道炎症。5、肿瘤细胞：乙状结肠癌、直肠癌。,三、显微镜检查（细胞）,三、显微镜检查（食物残渣）,夏科-莱登结晶无色透明菱形，两端尖长，大小不等，折光性强黄棕色斜方形，主要见于阿米巴痢疾、钩虫病及过敏性肠炎,三、显微镜检查（结晶）,寄生虫和原虫：根据不同虫卵的特点采用不同的方法，主要方法有直接涂片法、厚涂片透明法、加藤法、浓集法、浮聚法其中甲醛-乙酸乙酯沉淀法和厚涂片透明法、加藤法为WHO推荐方法,三、显微镜检查（病原学）,大便的镜下检查,粪便中可见较多正常菌群，其菌量和菌谱处于相对稳定状态，保持细菌与宿主的生态平衡。,第三节粪便工作站,包括标本浓缩收集管、自动加样装置、流动计数室、显微镜、电脑控制，可自动吸样、染色、混匀、重悬浮、传动装置，通过观察判断粪便沉渣各种成分作出定量计数，系统具有图像清晰，可实现部分自动化,一、标本采集与转运质量保证,1容器：无吸水性、无渗漏、有盖，无污染物，细菌培养标本应无菌2标本：根据检验目的选择最有价值的标本，如脓血、粘液或色泽异常标本，保证送检量，寄生虫检查尽量用浓集法3送检时间：肠内原虫滋养体应立即送检，冬天注意保温，检验及时4患者准备：停用影响检验结果的药物和食物,二显微镜检查质量保证,1工作人员：加强技能培训，提高镜检识别能力2标本涂片：厚薄适宜，能透视字迹为宜3显微镜观察：按“城垛式”观察顺序，先用低倍镜观察全片，再用高