01鸡新城疫

鸡新城疫(ND),鸡新城疫又名亚洲鸡瘟（俗称鸡瘟），是由鸡新城疫病毒引起的烈性传染病，对养鸡业危害极大。,历史与分布,本病1926年首次发现于印度尼西亚的巴塔维亚，同年发现于英国新城，根据发现地名而命名为新城疫。本病分布于世界各地，1928年我国已有本病的记载，1935年在我国有些地区流行，死亡率很高，是严重危害养鸡业的重要疾病之一，造成很大经济损失。在国际动物卫生法典中，本病与高致病性禽流感同属A类病，因此世界各国对本病的发生和流行均高度重视。,病原,新城疫病毒属于副黏病毒科腮腺炎病毒属，NDV完整病毒粒子近圆形，直径为120300nm，有不同长度的细丝。有囊膜，在囊膜的外层呈放射状排列的突起物称为纤突，具有能刺激宿主产生红细胞凝集抑制抗体和病毒中和抗体的抗原成分。病毒核酸类型为单股、负链、不分节段的RNA。,本病毒存在于病鸡所有器官、体液、分泌物和排泄物，以脑、脾和肺含毒量最高，骨髓含毒时间最长。从不同地区和鸡群分离到的NDV，对鸡的致病性有明显差异。根据不同毒力毒株感染鸡表现的不同，可将NDV分为几种致病型：速发型或强毒型毒株，在各种年龄易感鸡引起急性致死性感染；中发型或中毒型毒株，仅在易感的幼龄鸡造成致死性感染，如ND系疫苗缓发型即低毒型或无毒型毒株，表现为轻微的呼吸道感染或无症状肠道感染。NDV的毒力分型必须进行生物学试验，即依据鸡胚平均死亡时间(MDT)，1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉注射致病指数(IVPI)来区别(表72)。,NDV能在鸡胚中生长繁殖，以尿囊腔接种于910日龄鸡胚，强毒株在3060h死亡，弱毒株36d死亡。死亡的鸡胚，以尿囊液含毒量最高，胚胎全身出血，以头部、足趾、翅膀出血尤为明显。当鸡胚含有母源抗体时，弱毒株不能全部致死鸡胚，胚液的血凝滴度低，这可能是受抗体影响使病毒复制发生障碍，形成无囊膜的缺损病毒，所以分离NDV的鸡胚，应来自SPF鸡群或未接种ND疫苗的鸡群。,NDV能在多种细胞培养上生长，可引起细胞病变。在单层细胞培养上能形成蚀斑，毒力越强蚀斑越大。弱毒株必须在培养液加镁离子和乙二胺四乙酸二钠(EDTA)或胰酶，才能显示出蚀斑。NDV在细胞培养中，可通过中和试验、蚀斑减数，血吸附抑制试验来鉴定病毒。NDV一个很重要的生物学特性就是能吸附于鸡、火鸡、鸭、鹅及某些哺乳动物(人、豚鼠)的红细胞表面，并引起红细胞凝集(HA)，这种特性与病毒囊膜上纤突所含血凝素有关。这血凝现象能被抗NDV的抗体所抑制(HI)，因此，可用HA和HI来鉴定病毒和进行流行病学调查。,NDV对乙醚、氯仿敏感。病毒在6030min失去活力，真空冻干病毒在30，可保存30d，在直射阳光下，病毒经30min死亡。病毒在冷冻的尸体可存活6个月以上。常用的消毒药如2氢氧化钠、5漂白粉、70酒精在20min即可将NDV杀死。它对pH稳定，pH310不被破坏。,发病机理,本病的发生一般认为是病毒从呼吸道或消化道侵入后，先在呼吸道和肠道内繁殖，然后迅速侵入血流扩散到全身，引起败血症。病毒在血液中损伤血管壁，引起出血、浆液渗出和坏死变化，严重的消化紊乱即由此所致。同时由于循环障碍引起肺充血和呼吸中枢扰乱，结果导致常见的呼吸困难。病毒在血液中维持最高浓度约4d，若不死亡，则血中病毒显著减少，并有可能从内脏中消失。在慢性病例后期，病毒主要存在于中枢神经系统和骨髓中，引起脑脊髓炎变化。本病对感受性低的禽类也主要侵害神经系统而引起特征性的神经症状。NDV强毒感染还可造成免疫抑制。,【流行病学】,鸡新城疫,传染源,本病的主要传染源是病鸡以及在流行间歇期的带毒鸡，但鸟类的作用也不可忽视。受感染的鸡在出现症状前24h，其口、鼻分泌物和粪便中已能排出病毒。而痊愈鸡带毒排毒的情况则不一致，多数在症状消失后57d就停止排毒。在流行停止后的带毒鸡，常呈慢性经过，精神不好，有咳嗽和轻度的神经症状。保留这种慢性病鸡，是造成本病继续流行的原因。,传播途径,本病的传播途径主要是呼吸道和消化道，鸡蛋也可带毒而传播本病。种蛋内含有病毒时，在孵化过程中可致鸡胚死亡，死亡鸡胚中的病毒能存活数天，如果处理不好也可散毒。创伤及交配也可引起传染。另外，带毒鸡的迁移，肉蛋品的运输以及屠宰下脚料如羽毛、蛋壳、血、内脏、消化道内容物、病鸡排泄物、污染的饲料、用具，非易感的野禽、体外寄生虫、人畜等都可传播本病。,易感动物,鸡、火鸡、珠鸡及野鸭对本病都有易感性，以鸡最易感。各种年龄的鸡，易感性也有差异，幼雏和中雏易感性最高，两年以上鸡较低。水禽(鸭、鹅)对本病有抵抗力，但可从鸭、鹅中分离NDV。近年来在我国一些地区出现对鹅也有致病力的NDV，并且造成很大的经济损失，值得注意。1997年前后我国鹅群中开始爆发的鹅ND与NDV新基因型的出现有关，这种基因型的NDV对鹅的致病性增强。鹅ND在前几年的文献中用“鹅副黏病毒感染”、“鹅类新城疫”等名称，现建议统一用“鹅ND”表示。,流行特点,ND一年四季均可发生，但以春秋两季较多，这取决于不同季节中新鸡的数量，鸡只流行情况和适于病毒存活及传播的外界条件。购人貌似健康的带毒鸡，并将其合群饲养或宰杀，可使病毒散播。污染的环境和带毒的鸡群及非法买卖病死鸡是造成本病流行的常见原因。易感鸡群一旦感染速发性嗜内脏型鸡新城疫病毒，可迅速传播并呈毁灭性流行，发病率和病死率可达90以上。,但近年来，由于免疫程序不当，或有其它疾病存在抑制ND抗体的产生，及NDV毒力增强，常引起免疫鸡群发生新城疫而呈现非典型的症状和病变，其发病率和病死率略低。对免疫鸡群中NDV强毒感染流行的流行病学研究表明，NDV一旦在鸡群建立感染，通过疫苗免疫的方法无法将其从群中清除，而在群内长期维持，当鸡群的免疫力下降时，就可能表现出症状。,临床症状,鸡新城疫,临床特征,主要临诊特征是呼吸困难，下痢，产蛋下降、神经紊乱；主要的病变特征为喉头气管出血，十二指肠及小肠前、中、后段局灶性出血（枣核状出血）和后期出现的溃疡灶；腺胃乳头、腺胃与肌胃交界处、肌胃角质层下出血；而其他内脏器官基本正常。,病鸡发热，精神不振，伏地不动或翅下垂，闭目呆立,鸡新城疫,食欲减少或废绝，排出绿色粪便,鸡新城疫,嗉囔内充满酸臭黏液，倒提病鸡，可从口腔中流出,鸡新城疫,大多数病鸡呼吸困难，张口呼吸，咳嗽，发出呼噜声,鸡新城疫,鸡冠和肉垂呈暗红或青紫色,鸡新城疫,23天后鸡只大批死亡，耐过鸡可能出现神经症状,鸡新城疫,未受刺激时较为正常，一旦受到惊吓，便出现头颈扭曲,鸡新城疫,平衡失调，倒地挣扎,鸡新城疫,或呈观星姿势,鸡新城疫,有时可见神经麻痹、瘫痪,鸡新城疫,产蛋鸡发病时产蛋量大幅度下降，软壳蛋,产蛋鸡发病时产蛋量大幅度下降，有软壳蛋,鸡新城疫,白壳蛋数量增加,鸡新城疫,【病理变化】,鸡新城疫,腺胃乳头出血是本病的特征性病变,鸡新城疫,肌胃角质下层出血,鸡新城疫,整个肠道发生卡他性炎症，肠腔充满黏液，外观可见紫红色枣核样肿大的淋巴集结,鸡新城疫,黏膜弥漫性充血、出血和假膜样坏死,鸡新城疫,肠道淋巴集结出血、坏死,鸡新城疫,表面有黄白色伪膜覆盖,鸡新城疫,盲肠扁桃体出血、溃疡及坏死,鸡新城疫,直肠黏膜条状出血或点状出血,鸡新城疫,慢性病例可见十二指肠黏膜岛屿状坏死,鸡新城疫,产蛋鸡卵泡出血、液化、变形,鸡新城疫,气管黏膜充血、出血,鸡新城疫,有时可见胰腺出血,鸡新城疫,诊断,典型ND根据流行病学、症状和特征性的病理变化，可作出初步诊断。但是对于对于缺乏典型症状和病变的病例，须进行实验室的诊断。实验室检查有助于对ND的确诊。病毒分离和鉴定是诊断ND最可靠的方法，常用的是鸡胚接种、HA和HI试验、中和试验及荧光抗体技术。但应注意，从鸡分离出的NDV不一定是强毒，还不能证明该鸡群流行ND。因为有的鸡群存在强毒和中等毒力的NDV，所以分离出NDV还得结合流行病学、症状和病变进行综合分析，必需针对分离的毒株作毒力测定后，才能作出确诊。还可以应用免疫组化和ELISA来诊断本病。,1.病毒的分离病料最好取发病初期的病死鸡的脾或脑。发病中、后期取脑或骨髓作病料，如果鸡只已腐败，最好从骨髓分离。一定要注意无菌取病料，将病料用微量匀浆器研成乳剂，按14或19加入灭菌的生理盐水制成悬浮液，离心后取上清液，按每毫升加入青霉素和链霉素各10002000单位对上清液进行双抗处理，置37温箱中作用3060分钟或置4冰箱中作用48h。以上清液0.10.2ml接种911日龄鸡胚尿囊腔内，接种后的鸡胚置37温箱中继续孵化，24小时照蛋一次，弃去24h内死亡的鸡胚，以后每24h照蛋一次，死亡鸡胚置4冰箱中。若分离毒为强度株，则在接种后3060h即可致死鸡胚；若为弱毒株，接种后36d鸡胚死亡。收获死亡鸡胚的尿囊液作病毒的鉴定。,2.病毒的鉴定将上述收获的尿囊液作红细胞凝集试验（HA），如果具有血凝特性，并不能说明是NDV，必须与已知的抗NDV血清进行血凝抑制试验（HI），如果所分离的病毒能被这种特异性抗体所抑制，才能证明所分离的病毒为NDV。所分离的NDV是强毒株、中毒株还是弱毒株，还需进行毒力测定，主要依据鸡胚平均死亡时间(MDT)，1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉注射致病指数(IVPI)来判定。,3血清中和试验一般是用已知的抗NDV血清来鉴定可疑病毒。试验可在鸡胚或细胞以及易感鸡中进行。其方法是：在抗NDV阳性血清中加入一定量的待检病毒，混匀后，注射911日龄鸡胚（SPF胚或非免疫鸡所产种蛋），或鸡胚成纤维细胞，或者易感鸡，并设不加血清的对照组。如果注射血清和病毒混合物的鸡胚或鸡只不死亡、鸡胚成纤维细胞无病变，而对照组死亡或细胞出现病变，则可肯定待检病毒为NDV。,4荧光抗体技术是将荧光染料结合到抗体上，成为荧光染料标记抗体。当此标记抗体与相应的抗原相遇，可发生特异性结合形成抗原抗体复合物，该复合物在紫外光的照射下，可产生特定的荧光，可在荧光显微镜下观察到。荧光抗体技术对NDV的检查具有高度特异性和敏感性，而且快速的优点。作荧光抗体检查的材料以脾脏为首选，也可取肺和肝。按常规方法用冰冻切片制成标本，然后将ND荧光抗体稀释成一定的工作浓度，滴加到经固定的切片标本上，37染色30min，取出后立即用PBS（pH8.0）洗3次，然后滴加0.1%伊文思蓝，作用23s，再用PBS冲洗。然后用91缓冲甘油封固，镜检。在荧光显微镜下见荧光的地方即为NDV所在部位。,5酶联免疫吸附试验（ELISA）此方法能够检验NDV在细胞培养中的生长情况。如有NDV生长，在细胞核边缘可见到明显棕褐色酶染斑点。它还能直接检出病鸡或带毒鸡的泄殖腔和口腔中的NDV，该方法比HA和HI、荧光抗体技术等更加敏感，特异性更强，是快速而准确的诊断方法。目前辣根过氧化物酶标记羊抗兔结合物已有商品出售，应用比较方便，不需要荧光显微镜。为了提高ELISA的敏感性和特异性，又发展了双夹心ELISA，斑点ELISA用于ND的诊断。,本病应注意与禽霍乱、传染性支气管炎和禽流感相区别。禽霍乱可侵害各种家禽，鸭最易感，呈急性败血经过，病程短，病死率高，无神经症状，肝脏有灰白色坏死点。慢性的可见肉髯肿胀，关节炎。心血涂片和肝触片，染色镜检可见两极染色的巴氏杆菌，抗生素治疗有效。而新城疫有呼吸道和神经症状，腺胃乳头出血，消化道黏膜出血、溃疡，盲肠扁桃体出血和坏死，肝脏没有坏死点。传染性支气管炎，主要侵害雏鸡，成年鸡表现为产蛋下降。病毒接种鸡胚，胚胎发育受阻成为侏儒胚，无神经症状和消化道无明显病变，支气管内有纤维素栓子。,高致病性禽流感潜伏期和病程比ND短，没有明显呼吸困难和神经症状，嗉囊没有大量积液。肉眼变化，见皮下水肿和黄色胶样浸润，黏膜、浆膜和脂肪出血比ND更为明显和广泛，但确切鉴别诊断必