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22qll微缺失检测在产前诊断中的应用价值 陆林苑唐海深江陵 【摘要】目的探讨22q11微缺失检测在产前诊断领域中的应用价值。方法应用染色体荧光原位杂交（FISH）技术，对55例疑妊娠22q11微缺失胎儿的高危孕妇进行产前22q11微缺失的检测。结果55例产前诊断病例中，22q11微缺失2例，均为胎儿心脏室间隔缺损。结论对于先天性心脏病的胎儿应行产前诊断检测22q11微缺失。 【关键词】22q11微缺失先天性心脏病荧光原位杂交技术 doi：10.3969/j.issn.1671-332X.xx.09.029 先天性心脏畸形是一种多病因的疾病，是由遗传和环境因素决定的。在22q11微缺失综合征患者中有75%伴有各类先天性心脏病。BRETELLE等1认为先天性心脏病是22q11微缺失综合征最常见的诊断原因。目前国内22q11微缺失检测多应用于患儿的回顾性研究，本研究前瞻性应用于产前诊断标本中：应用染色体荧光原位杂交（FISH）技术，对55例疑妊娠22q11微缺失胎儿的高危孕妇进行产前22q11微缺失的检测。 1资料与方法 1.1研究对象 xx年5月xx年12月期间，南方医科大学附属中山市博爱医院产前诊断中心产前诊断病例中行22q11微缺失检测的55例胎儿，胎龄1232周，行绒毛膜穿刺1例，羊膜腔穿刺21例，脐带血穿刺33例。55例孕妇中，包括：25例为已生育（或引产）过一个先天性心脏病、面容畸形患者的孕妇，本次妊娠胎儿超声未见心脏或面容畸形；4例超声高度怀疑胎儿为唇裂或唇腭裂；26例超声高度怀疑胎儿为先天性心脏病者，见表1。 1.2方法 对55例疑妊娠22q11微缺失胎儿的高危孕妇，先行病史询问及体格检查，再行血尿常规、凝血功能、肝功能和乙肝、丙肝、艾滋、梅毒、心电图等常规检查。行介入性产前诊断的孕妇抽取绒毛23枝，或羊水5ml，或脐血1.0ml。应用荧光原位杂交技术（FISH），采用金菩嘉医疗科技有限公司DiGeorge/VCFS综合症检测试剂盒，检测标本中22号染色体上TUPLE1基因微缺失情况。检测基因名称为GLPTUPLE1/GLPARSA，探针位点TUPLE1：22q11，ARSA：22q13。TUPLE1探针杂交到22q11.21，荧光信号为红色（四甲基罗丹明），ARSA基因探针杂交到22q13.31，荧光信号为绿色（细胞绿），两者互为内对照探针。TUPLE1和ARSA基因互为内对照。FISH信号的判读：TUPLE1异常比例超过60%为阳性。随访。 2结果 全部55例标本中，25例为已生育或引产过一个先天性心脏病或面容畸形患者的孕妇，本次妊娠胎儿B超未见异常，产前诊断22q11微缺失检测均未见异常；4例声超高度怀疑胎儿为唇裂或唇腭裂的胎儿产前诊断22q11微缺失检测均未见异常；26例超声高度怀疑胎儿为先天性心脏病的胎儿中，产前诊断24例22q11微缺失检测见异常，22q11微缺失2例，见表2。 全部55例标本同时行胎儿染色体检查均未发现异常。2例有22q11微缺失的胎儿中，其中1例胎儿的父亲也进行了外周血FISH检测，为22q11微缺失携带者，无临床症状，拒绝进一步检查。另一例胎儿的双亲无临床症状，拒绝行22q11微缺失检测。对所有55例病例进行随访，随访结果见表3。 3讨论 随着心脏外科手术的进展，许多先心儿得到手术救治。但是，有一些家庭在孕期发现胎儿心脏异常后，查胎儿染色体无异常，在患儿出生后经手术治疗，花费数十万元以后，才发现孩子还患有22q11微缺失综合征，表现为免疫功能下降、语言障碍、学习能力低下，精神异常等。这对社会和家庭造成更大的伤害。故产前诊断工作的一个重点，不但是早日诊断出胎儿是否患先心，而且要更准确地评估胎儿的远期预后。 22q11微缺失综合征是迄今为止少数已明确的先心病因之一。22q11微缺失区域位于D22S427/1638和D22S306/308之间，大小为1.53Mb。目前普遍认为，缺失发生的原因是染色体减数分裂后重组时出现不对称和异常2。在新生活产儿中发病率为1/40003，其主要表现为DiGeorge综合征（DGS）：甲状旁腺发育不全、胸腺发育不全和锥干型心脏畸形（CTD）；腭-心-面综合征（VCFS）：腭裂、面容畸形等；22q11微缺失表型广泛多样，且常合并低钙血症，免疫功能缺陷，严重影响患儿的治疗及预后4。通过荧光原位杂交技术（FISH）检测绒毛、羊水或脐血中的TUPLE1基因，有助于判断胎儿是否发生22号染色体微缺失。从而有助于提高遗传咨询的准确性，可以及早进行临床干预及再发风险评估，达到优生优育的目的。 本研究55例病例中检测到2例阳性（2/55），阳性率与最近的相关报道（2/53）一致5。本研究2例阳性病例均为胎儿心脏室间隔缺损，提示22q11微缺失与室间隔缺损相关性大，2例阳性胎儿均引产，未行尸检，可能存在超声难以发现的其他心外畸形。既往有报道主动脉弓离断、法洛四联症等异常常合并有胸腺发育不良，是染色体2211缺失综合征的表现3。本研究2例法氏四联症胎儿及1例永存动脉干胎儿结果均阴性，可能与标本量有限有关。 本研究2例有22q11微缺失的胎儿中，其中1例胎儿的父亲也进行了外周血FISH检测，为22q11微缺失携带者，无临床症状，拒绝行进一步心脏彩超检查，提示携带22q11微缺失也有表型正常的病例，为临床遗传咨询提供依据。本研究24超声高度怀疑胎儿为先天性心脏病的胎儿中，没有检测到染色体异常和22q11微缺失。这一结果支持先心病的发生是多基因与环境因素相互作用的结果。 有研究显示，对已经出生的22q11缺失综合征的患者一般采取的治疗方式为：心脏畸形多采用手术对症治疗；低钙血症通常补钙治疗；胃食管返流通过抗酸、促胃动力治疗；腭异常者通过颅面手术矫形治疗；婴儿存在淋巴系统异常者应避免接种活疫苗，少数情况下，可预防性使用抗生素，静脉注射免疫球蛋白或胸腺移植。对运动、认知、语言发育迟缓者进行早期教育干预及在1岁时进行语言治疗来控制或治疗4。 参考文献 1BRETELLEF，BEYERL，PELLISSIERMC，etal.Prenatalandpost-nataldiagnosisof22q11.2deletionsyndromeJ.EurJMedGe，xx，53（6）：367-370. 2王凤羽，马林先.先天性心脏病患儿22q11微缺失的临床研究J.中国计划生育学杂志，xx，20（2）：109-113. 3李胜利.胎儿先天性心脏病的筛查和诊断J.