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DNA重组技术的基本工具课后提能训练1(2018贵州遵义四中高二月考)下列说法中,正确的是()ADNA连接酶最初是从人体细胞中发现的B限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列C利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”D限制酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并使链间的氢键断裂答案C解析DNA连接酶最初是从原核细胞中发现的,A错误;限制酶有多种,每种限制酶都能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,因此不是所有限制酶的切口都是GAATTC的碱基序列,B、D错误;利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为分子水平上的“克隆”,C正确。2(2018河南师大附中高二月考)下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是()A用限制酶切割一个DNA分子中部,获得一个目的基因时,被水解的磷酸二酯键有2个B限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大CCATG和GGATCC序列被限制性核酸内切酶切出的黏性末端游离碱基数不同D只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA片段和质粒,才能形成重组质粒答案B解析用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部,获得一个目的基因时,需要切割目的基因的两侧,因此要断裂4个磷酸二酯键,A错误;限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大,B正确;CATG和GGATCC序列被限制酶切出的黏性末端游离碱基数均为四个,C错误;不同的限制性核酸内切酶切割也可能形成相同的末端序列,因此不同限制酶处理含目的基因的DNA片段和质粒,也能形成重组质粒,D错误。3下列关于DNA连接酶作用的叙述,正确的是()A不能将单个核苷酸加到某DNA片段末端B一种DNA连接酶只能连接某一特定序列的DNA片段C连接两条DNA链上碱基之间的氢键D只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,而不能将双链DNA片段平末端之间进行连接答案A解析DNA连接酶的作用是连接两个DNA片段,形成磷酸二酯键,并不是只能作用于某一特定序列,A正确,B、C错误;T4DNA连接酶既可以连接DNA片段互补的黏性末端,也可以连接平末端,但连接平末端的效率比较低,D错误。4如图所示DNA分子的某一片段,其中分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是()ADNA连接酶、限制性核酸内切酶、解旋酶B限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶C解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶D限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶答案C解析使氢键断裂的酶是解旋酶,限制性核酸内切酶使相邻两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,连接DNA片段之间的磷酸二酯键的酶是DNA连接酶。5(2017云南师大附中月考)下列有关酶的叙述,正确的是()A同种限制酶既可以切割目的基因所在片段又可以切割质粒,因此不具备专一性BRNA聚合酶和DNA聚合酶都可以催化遗化信息的转录C限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸DDNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键答案C解析一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点上切割DNA分子,因此具有专一性,A错误;DNA聚合酶不能催化遗传信息的转录,B错误;烟草花叶病毒的核酸为RNA,不能用限制酶切割,C正确;DNA连接酶可催化DNA片段间的磷酸二酯键的形成,D错误。6(2018天津六校联考)下列有关基因工程的叙述正确的是()ADNA连接酶的作用是使互补的黏性末端之间发生碱基A与T,C与G之间的连接B基因工程中使用的载体最常见的是大肠杆菌C载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞并可促进目的基因的表达D基因工程造成的变异,实质上相当于人为的基因重组,但却产生了定向变异答案D解析DNA连接酶连接的是磷酸二酯键,A错误;基因工程中使用的载体最常见的是质粒,B错误;载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞,但不能促进目的基因的表达,C错误;基因工程能按照人们的意愿定向改造生物的性状,其原理是基因重组,D正确。7下图表示两种限制酶识别DNA分子的特定序列,并在特定位点对DNA分子进行切割的示意图,请回答以下问题:(1)图中甲和乙代表_。(2)EcoR、Hpa代表_。(3)图中甲和乙经过相应操作均形成两个片段,切口的类型分别为_、_。甲中限制酶的切点是_之间,乙中限制酶的切点是_之间。(4)由图解可以看出,限制酶的作用特点是_。(5)如果甲中G碱基发生基因突变,可能发生的情况是_。答案(1)有特定脱氧核苷酸序列的DNA片段(2)两种不同的限制酶(限制性核酸内切酶)(3)黏性末端平末端G、AT、A(4)能识别双链DNA分子的特定脱氧核苷酸序列,并从特定的位点将DNA分子切开(5)限制酶不能识别切割位点解析(1)由图示看出,甲和乙代表由脱氧核苷酸构成的有不同的酶切位点的DNA片段。(2)EcoR和Hpa能切割DNA分子,说明它们是限制酶(限制性核酸内切酶)。(3)甲中切点在G、A之间,切口在识别序列中轴线两侧,形成黏性末端;乙中切点在T、A之间,切口在识别序列中轴线处,形成平末端。(4)限制酶能识别DNA分子的特定核苷酸序列,并从特定位点切割DNA分子。(5)当特定核苷酸序列变化后,就不能被相应限制酶识别。8下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点,请回答下列问题:(1)一个图1所示的质粒分子经Sma切割前后,分别含有_、_个游离的磷酸基团。(2)若对图中质粒进行改造,插入的Sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越_。(3)要用图1中的质粒和图2中外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma切割,原因是_。(4)图1中的质粒本质为_,具有_能力,是基因工程中_的载体。除质粒外,基因工程中还可以用_、_等作为载体。(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入_酶。答案(1)02(2)高(3)Sma会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因(4)环状DNA分子自我复制最常用噬菌体衍生物动植物病毒(5)DNA连接解析(1)质粒被切割前为环状DNA分子,所有磷酸基团均参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团。从图1可以看出质粒上只含有一个Sma的切割位点,因此质粒变成线性DNA分子,含2个游离的磷酸基团。(2)由题目可知Sma识别的DNA序列只有G和C,而G和C之间形成3个氢键,所以插入的Sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越高。(3)质粒中的抗生素抗性基因为标记基因,由图1、图2知标记
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