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文档简介

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体基础知识巩固1.下列关于细胞融合的说法,错误的是()A.植物细胞在融合之前需经酶处理B.细胞融合过程依赖细胞膜的功能特点流动性C.融合后,动植物细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息D.动、植物细胞融合均需要诱导剂诱导解析细胞融合的原理是细胞膜的流动性,这是细胞膜的结构特点。答案B2.科学家用灭活的病毒诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞,下列有关该过程中灭活病毒的作用的叙述正确的是()A.病毒比较小,可穿过细胞膜进入细胞内B.灭活的病毒已完全死亡,死亡的病毒可以让细胞聚集C.灭活的病毒已失去感染活性,但它表面的抗原结构未被破坏,可使不同动物细胞进行融合D.灭活的病毒带有目的基因,通过诱导细胞融合可以让杂交细胞带有目的基因解析骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞,在该过程中,灭活的病毒能够诱导细胞融合。灭活的病毒已失去感染活性,但其表面抗原结构未被破坏。灭活病毒表面的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚并发生融合,C项正确。答案C3.无论是植物细胞,还是动物细胞,都可以利用一定的方法诱导融合,可用模型图表示细胞融合技术的一些过程,下列有关叙述错误的是()A.若该过程表示植物原生质体的融合,则甲、乙细胞可用酶解法获取B.若该过程表示动物细胞融合,可用灭活的病毒诱导C.若该过程表示制备单克隆抗体,则丙细胞是杂交瘤细胞D.以上三个过程体现了细胞的全能性解析植物细胞融合需先用酶除去细胞壁,制备原生质体,再诱导细胞融合,A项正确;若该过程表示动物细胞融合,则可用物理、化学和生物的方法诱导,生物方法即用灭活的病毒诱导,B项正确;若该过程表示制备单克隆抗体,则丙细胞是杂交瘤细胞,C项正确;以上三个过程都体现了细胞膜的流动性,D项错误。答案D4.下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述,不正确的是()A.制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养B.需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞C.需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞D.利用生物导弹治疗癌症就是利用单克隆抗体清除癌细胞解析生物导弹由单克隆抗体与化学药物、细胞毒素或放射性同位素结合而成,因带有单克隆抗体而能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,主要由其携带的药物产生治疗作用。答案D5.用a表示骨髓瘤细胞,b表示已免疫的B淋巴细胞,则细胞融合过程中两次筛选的目的为()A.a、aa、ab、bb、ba、aa、abab培养B.a、aa、ab、bb、bab、bb、bab培养C.a、aa、ab、bb、bab产生特定抗体的ab培养D.a、aa、ab、bb、baa能无限增殖的aa培养解析单克隆抗体制备过程中,需要两次筛选,第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞,即ab;第二次筛选的目的是获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞。答案C6.是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤,下列相关叙述不正确的是()将X抗原注入小鼠体内,获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞利用促细胞融合因子使细胞发生融合将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞从腹水中提取抗体A.实验顺序应该是B.过程中产生的多个杂交瘤细胞也为克隆C.过程获得的细胞均可无限增殖D.的过程中通常要经过两次筛选解析利用促细胞融合因子使细胞发生融合,若只考虑两个细胞的融合,则有三种情况:两个骨髓瘤细胞融合、两个能产生抗X抗体的B淋巴细胞融合和杂交瘤细胞。两个能产生抗X抗体的B淋巴细胞融合后的细胞不能无限增殖。答案C7.下面是制备单克隆抗体过程的示意图,下列叙述不正确的是()A.过程为动物细胞培养过程B.促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇诱导C.中的筛选是通过抗原抗体反应进行的D.既可以无限增殖,也能产生所需抗体解析过程为体外培养杂交瘤细胞过程,为动物细胞培养过程。诱导动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。如果要筛选能产生特定抗体的细胞,可以通过抗原抗体反应,有反应说明表达了抗体。融合细胞具有双亲的特点,既能无限增殖又能产生单一抗体。中有多种杂交瘤细胞,只有少部分能产生所需抗体。答案D8.下图为细胞融合的简略过程,请据图回答问题。(1)若A、B是植物细胞,A、B到C的过程中,常用的物理方法是,融合完成的标志是。(2)若A、B是植物细胞,则形成的D细胞还要应用技术把D培养成植株。(3)若A、B是动物细胞,一般取自,然后用使其分散开来;从A、B到C的过程中,常用的但不用于促进植物细胞融合的手段是,所形成的D称为。(4)若该过程是制备单克隆抗体,A为小鼠B淋巴细胞,在获得此细胞之前,小鼠已被注射了。由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为。这种细胞既能无限繁殖,又能分泌。图中B为。(5)若该过程仍是制备单克隆抗体,在A、B到C的过程中,所形成的C有种(只考虑两个细胞的相互融合),用来培养的D细胞应该是。获得D后,常用的培养方法是和。答案(1)电激、振动、离心产生新的细胞壁(2)植物组织培养(3)动物胚胎或幼龄动物的器官或组织胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)用灭活的病毒诱导细胞融合杂交细胞(4)抗原克隆(细胞培养)特异性抗体(单克隆抗体)骨髓瘤细胞(5)3杂交瘤细胞在体外培养液中培养注射到小鼠腹腔内增殖能力素养提升9.甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸,科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体,其基本操作过程如下图。下列相关叙述正确的是()A.过程注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲B.过程诱导细胞融合,利用了细胞膜的选择透过性C.过程的筛选方法相同,细胞丙、丁的遗传物质相同D.过程无论在体内还是体外进行,细胞丁都可大量增殖解析过程注射相应抗原后,机体进行免疫反应,使B淋巴细胞增殖分化产生具有免疫能力的B淋巴细胞,才可以从小鼠脾脏中提取细胞甲,A项错误;过程诱导细胞融合,利用了细胞膜的流动性,B项错误;过程是用选择性培养基获得杂交瘤细胞,过程是用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞,C项错误;杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生特异性抗体,过程无论在体内还是体外进行,细胞丁都可大量增殖,D项正确。答案D10.下图是科学家新研发的制备单克隆抗体的过程,相关叙述错误的是()A.该过程涉及基因工程和动物细胞融合技术B.经酶A处理后的与质粒具有相同的黏性末端C.若供体DNA提供了prG基因(无限增殖调控基因),则该过程中的是已免疫的B淋巴细胞D.通过检测和筛选得到的细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体解析分析题图可知,该过程是利用基因工程技术生产单克隆抗体的过程,没有涉及动物细胞融合技术,A项错误;在目的基因和质粒重组的过程中首先需要用同种限制酶切割目的基因和质粒,使它们产生相同的黏性末端,然后用DNA连接酶将其连接,B项正确;抗体是由已免疫的B淋巴细胞产生的,但是该细胞没有增殖能力,因此可以给该细胞导入无限增殖调控基因,使该细胞获得无限增殖能力,C项正确;该研发过程的结果是细胞既能无限增殖又能分泌特异性抗体,这样可以能持续不断地获得单克隆抗体,D项正确。答案A11.“筛选”是生物工程中常用的技术手段,下列关于筛选的叙述错误的是()A.基因工程中利用标记基因筛选出的细胞不一定含重组质粒B.在诱变育种中需通过筛选才能得到数量较少的有利变异C.植物体细胞杂交过程中,原生质体融合后获得的细胞需进行筛选D.单克隆抗体制备过程中,第一次筛选的目的是获得足够数量的能产生所需抗体的杂交瘤细胞解析标记基因位于质粒上,基因工程中利用标记基因筛选出的细胞不一定都含有重组质粒,也可能只含有普通质粒,A项正确;诱变育种的原理是基因突变,而基因突变具有不定向性和多害少利性,因此在诱变育种中需要通过筛选才能得到数量较少的有利变异,B项正确;植物体细胞杂交过程中,诱导原生质体融合后,可获得多种融合细胞,因此需要对获得的细胞进行筛选,C项正确;单克隆抗体制备过程中,第一次筛选出的是杂交瘤细胞,第二次筛选出的是既能迅速大量增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞,D项错误。答案D12.科学家们已陆续从病死的家禽和候鸟体内分离得到了H5N1亚型禽流感病毒,若要生产可以用于预防和治疗禽流感的抗体,请根据下面的单克隆抗体制备过程示意图回答有关问题。(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自体内的细胞,促进d过程的常用诱导剂是或。(2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成种类型的C细胞。因此需用培养基筛选出(填特点)的D细胞用于培养。D细胞的名称是。(3)目前注射禽流感疫苗是预防禽流感的一种措施。我们已经知道,决定禽流感病毒在人体细胞中增殖变化的物质是,而决定其抗原特异性的物质位于。据此分析制备禽流感疫苗的主要思路:。解析(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是已免疫的B淋巴细胞(浆细胞),取自被禽流感病毒感染的动物或人。促进d过程细胞融合常用的诱导剂是聚乙二醇(PEG)或灭活的病毒。(2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成3种类型的C细胞,分别是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞、B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞。因此需用选择培养基筛选出D杂交瘤细胞,其特点是既能无限增殖又能产生特异性抗体。(3)决定禽流感病毒在人体细胞中增殖变化的物质是病毒的RNA,而决定其抗原特异性的物质位于病毒的衣壳蛋白上。因此制备禽流感疫苗的主要思路是将禽流感病毒灭活或减毒(或利用基因工程技术生产禽流感病毒的衣壳蛋白)。答案(1)感染禽流感病毒的动物或人已免疫的B淋巴聚乙二醇(PEG)灭活的病毒(2)3选择既能无限增殖又能产生特异性抗体杂交瘤细胞(3)病毒的RNA病毒的衣壳蛋白上将禽流感病毒灭活或减毒(或利用基因工程技术生产禽流感病毒的衣壳蛋白)13.H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着其生产能力的提高。通过基因工程可改造H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力,相关步骤如下:细胞培养。将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养,一段时间后,用胰蛋白酶处理培养液,漂洗后调整细胞悬液浓度为1107个/mL。免疫小鼠。向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8 mL,以后每隔2周免疫1次,共免疫3次,最后1次免疫后3天,取脾脏制成细胞悬液备用。细胞融合及筛选。将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50% PEG作用下进行融合,筛选出能产生抗人肝癌的单克隆抗体HAb18的H18杂交瘤细胞。改造H18杂交瘤细胞。利用PCR技术获得小鼠的bcl-XL基因(抗凋亡基因),构建表达载体,通过脂质体法将其导入H18杂交瘤细胞中,再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞。请分析回答下列问题。(1)步骤中肝癌细胞合成培养液中特有的成分是,培养液中还需加入一定量抗生素的目的是。(2)步骤中,肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次,其目的是。(3)步骤中,除了用50% PEG促进细胞融合外,常用的生物诱导因素是,物理诱导方法是(写出一种即可)。步骤中通过脂质体法将表达载体导入H18杂交瘤细胞的过程依赖的原理是。(4)与普通抗肝癌药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是。(5)乙醇有诱导细胞凋亡的作用。为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型,科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导H18杂交瘤细胞凋亡,其结果如图所示:抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的诱导条件是(用图中字母表示)。解析(1)步骤中肝癌细胞合成培养液中特有的成分是血清,目的是补充细胞生长所需的未知营养物质。培养液中还需加入一定量抗生素的目的是防止杂菌污染。(2)肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次,其目的是增强免疫,刺激小鼠产生更多的淋巴细胞。(3)步骤中,除了用50%PEG促进细胞融合外,常用的生物诱导因素是灭活的病毒,物理诱导方法是电激。传统的脂质体是将磷脂、胆固醇或其他脂类的乙醚溶液加入DNA溶液中,经特殊处理而得到单层或双层的带DNA的脂质体小泡,其可被受体细胞内吞而实现基因转移。故步骤中通过脂质体法将表达载体导入H18杂交瘤细胞的过程依赖的原理是膜的流动性。(4)与普通抗肝癌药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是能

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